摘要：目的利用RNA干扰（RNAi）技术，将携带表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）同源基因的重组质粒稳定转染非小细胞肺癌细胞株A549细胞，观察其对A549细胞生长抑制作用及对顺铂敏感性的变化。方法根据RNAi原理，体外设计并合成靶向EGFR特异性干扰片段，即h-EGFR，以pGensil-1为载体，构建重组质粒pGensil-1-EGFR，以Lipofectamine 2000介导转染肺腺癌细胞株A549细胞，经G418筛选后挑选出稳定转染的单克隆细胞。将所挑选出的单克隆细胞大量培养后加入不同浓度顺铂（40mg／L、10mg／L、2．5mg／L），采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞活力，绘制生长曲线，流式细胞仪分析细胞周期及细胞凋亡的变化，观察RNAi对A549细胞抑制作用及是否与顺铂有协同作用。结果与对照组、阴性对照组相比，从第2天起实验组生长缓慢，吸光度有统计学差异（P〈0．05）；顺铂或联合dsRNA-EGFR对A549细胞有抑制作用，且随着浓度的增加和时间的延长抑制作用增强，dsRNA—EGFR联合顺铂与等浓度顺铂吸光度有统计学差异（P〈0．05），顺铂作用24h后40mg／L、10mg／L、2．5mg／L顺铂抑制率分别提高了7．8％、30．70％、34．42％。实验组G0／G1细胞百分比较对照组增加了13．84％，较阴性对照组增加了14．65％，进入S期的细胞百分比较对照组减少了19．10％，较阴性对照组减少了18．68％；40mg／L、10mg／L、2．5mg／L顺铂处理细胞24h后，与对照组相比，凋亡率明显增高（P〈0．05），且浓度越高，凋亡率越高；同一浓度顺铂作用下转染pGensil-1-EGFR的A549细胞凋亡率较A549细胞增高（P〈0．05）。结论dsRNA-EGFR可有效抑制A549细胞生长，使细胞阻滞在G0-G1期，顺铂可有效诱导细胞凋亡，RNAi与顺铂具有协同效应，提高细胞对顺铂的敏感性，RNAi技术为非小细胞肺癌基因治疗提供了新策略。

摘要：严重急性呼吸综合征(SARS)自2002年12月开始流行,至今已3年有余,人们对于它的发生、发展、演变和未来趋势,即它的流行规律不无困惑.近来Kan等[1]提出了病毒分群及有关流行的许多论点很有创意.我们也曾提出过2个毒种、2种流行、2个源头、2种疫区、3个期和今后趋势的观点[2,3],根据新近进展,我们再作一些补充和讨论.