摘要：本试验旨在研究维生素A对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)内乳脂合成的影响。试验采用单因子完全随机试验设计,将第3代BMECs随机分为9个组,每组6个重复。其中,对照组(CON组)用生长培养基培养30 h;H_(2)O_(2)损伤组(H_(2)O_(2)组)用CON组培养基培养24 h后,再加入H_(2)O_(2)继续培养6 h;7个维生素A预保护组则在CON组培养基中添加不同浓度维生素A培养24 h后,再加入H_(2)O_(2)继续培养6 h,维生素A浓度分别为0.05(0.05 VAH组)、0.10(0.1VAH组)、0.20(0.2VAH组)、0.50(0.5VAH组)、1.00(1VAH组)、2.00(2VAH组)和4.00μg/mL(4VAH组)。结果显示:与CON组相比,H_(2)O_(2)组诱导BMECs发生氧化损伤,BMECs的相对增殖率(RGR)、甘油三酯(TG)含量、总抗氧化能力(T-AOC)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、硫氧还蛋白还原酶1(TrxR1)、脂肪酸合成酶(FASN)、脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、脂蛋白酯酶(LPL)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性显著降低(P≤0.05),ACC、FASN、谷胱甘肽过氧化物酶1(GPx1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPx4)、TrxR1、过氧化酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)相对表达量显著降低(P≤0.05),但活性氧(ROS)活性显著提高(P≤0.05)。与H_(2)O_(2)组相比,0.2VAH~2VAH组BMECs的RGR和GPx1、GPx4、TrxR1、LPL、SCD、FASN、PPARγ和SREBP1相对表达量以及GPx活性和T-AOC显著提高(P≤0.05),并且1VAH组的TG含量、T-SOD和CAT活性显著提高(P≤0.05),且1VAH组的ROS活性显著降低(P≤0.05)。由此可见,维生素A对由H_(2)O_(2)诱导引起的BMECs内抗氧化能力下降、乳脂从头合成和脂肪酸摄取相关酶活性及其基因表达的下调具有剂量依赖性的减缓效果,以0.20~2.00μg/mL维生素A的效果较好,尤以1.00μg/mL维生素A的效果最好。

摘要：本试验旨在利用二乙烯三胺/一氧化氮聚合物(DETA/NO)作为一氧化氮(NO)供体,以细胞存活率和抗氧化指标作为判断依据,确定建立奶牛外周血单个核细胞(PBMC)的氧化损伤模型的适宜条件。试验分2部分进行。试验1采用单因子完全随机试验设计,以不同浓度[0(对照)、50、100、200、300、500μmol/L]的DETA/NO作为刺激源,在37℃下分别作用细胞2、4、6、8、12 h,通过测定细胞存活率,初步确定适宜的DETA/NO作用时间。试验2根据试验1得出的DETA/NO适宜作用时间,以不同浓度[0(对照)、50、100、200、300、500μmol/L]的DETA/NO作为刺激源,依据抗氧化指标和炎症因子含量进一步筛选出适宜的DETA/NO作用浓度。结果显示:200μmol/L DETA/NO作用细胞4 h,PBMC存活率降低至72.3%,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性均较对照组显著降低(P<0.05),白细胞介素-1、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、丙二醛和NO含量均较对照组显著上升(P<0.05)。结果提示,在37℃下,DETA/NO诱导PBMC建立PBMC氧化损伤模型的适宜作用浓度和作用时间分别为200μmol/L和4 h。

摘要：试验以脂多糖(LPS)为刺激源,以细胞活力、抗氧化指标和炎症因子为判断指标,探讨白细胞介素1受体颉颃剂(IL-1Ra)通过抑制白细胞介素1β(IL-1β)的活性,对LPS诱导外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)氧化损伤的缓解作用。试验采用单因子完全随机设计,PBMCs被随机分为7个组(每组6个重复),分别给予不同的处理:第1组是阴性对照组(Neg组),完全培养基培养30 h;第2组损伤组(Dam组),是在完全培养基中培养6 h后,再经10μg/mL的LPS工作液培养24 h;第3至7组(R0.25、R0.5、R1、R5组和R10组)细胞分别经浓度为0.25、0.5、1、5、10 ng/mL的IL-1Ra培养6 h,接着经10μg/mL的LPS工作液培养24 h。结果表明:与Neg组相比,Dam组的细胞活力、抗氧化相关酶[包括总抗氧化能力(T-AOC)以及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)]的活性显著降低,丙二醛(MDA)浓度、炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和IL-1β含量以及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性、一氧化氮(NO)含量均显著升高(P≤0.05)。与Dam组相比,R1组显著逆转了氧化损伤引起的上述抗氧化活性的降低和炎症因子浓度的升高,其他IL-1Ra处理组对上述指标的逆转效果不同程度地低于R1组(P≤0.05)。上述结果说明,LPS通过诱发PBMCs产生大量IL-1β进而导致细胞氧化损伤,IL-1Ra剂量依赖性地缓解了LPS引起的氧化损伤,添加剂量以1 ng/mL为宜。

摘要：本试验以脂多糖(LPS)为刺激源,利用白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)阻断白细胞介素-1β(IL-1β)的生物学活性,探讨壳寡糖(COS)对LPS诱导的奶牛外周血单个核细胞(PBMC)氧化应激损伤的减缓作用。采用单因素完全随机试验设计,将PBMC随机分为8个组,分别为对照组(在不含COS、LPS和IL-1ra的基础培养基中培养72 h)、COS组(在仅含COS的培养基中培养72 h)、LPS组(在基础培养基中先培养48 h,再加入LPS培养24 h)、IL-1ra组(在基础培养基中先培养42 h,再加入IL-1ra培养30 h)、COS+IL-1ra组(在含有COS的培养基中先培养42 h,再加入IL-1ra培养30 h)、COS+LPS组(在含有COS的培养基中先培养48 h,再加入LPS培养24 h)、IL-1ra+LPS组(在基础培养基中先培养42 h,然后加入IL-1ra再培养6 h,最后加入LPS再培养24 h)和COS+IL-1ra+LPS组(在含有COS的培养基中先培养42 h,然后加入IL-1ra再培养6 h,最后加入LPS再培养24 h),每组6个重复。结果显示:与对照组相比,LPS组抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)和硫氧化蛋白还原酶(TrxR)的活性与总抗氧化能力(T-AOC)以及GPx1和TrxR的mRNA相对表达量显著下降(P≤0.05),而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,炎症因子IL-1β、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及其mRNA相对表达量,核因子-κB(NF-κB)p 65的mRNA相对表达量、一氧化氮(NO)与丙二醛(MDA)含量、活性氧簇(ROS)活性均显著升高(P≤0.05),说明LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤是由于其激活了NF-κB信号通路,导致炎症因子IL-1β的释放以及iNOS活性和NO含量的增加造成的。与LPS组相比,LPS+IL-1ra组和LPS+COS组的上述抗氧化酶活性及GPx1和TrxR的mRNA相对表达量显著升高(P≤0.05),而上述炎症因子的含量及其mRNA相对表达量以及NF-κB p 65的mRNA相对表达量显著降低(P≤0.05),说明IL-1ra和COS对LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤具有相似的预防作用。综上可知,COS通过抑制IL-1β的生物学活性减缓LPS诱导的奶牛PBMC氧化应激损伤,这可能与COS抑制NF-κB信号通路的活性,进而降低IL-1β的释放及NO的生成有关。

摘要：本试验以奶牛外周血单个核细胞(PBMC)为模型,旨在研究不同剂量壳寡糖(COS)对细胞活力、抗氧化功能和炎症因子含量的影响。采用单因素随机试验设计,将体外分离得到的PBMC随机分为5组,每组6个重复,对照组(CON组)细胞培养液中不添加COS;COS40、COS80、COS160和COS320组在细胞培养液中分别添加40、80、160和320μg/mL的COS,在培养箱中培养48 h。结果表明:体外添加COS对PBMC抗氧化功能的促进效果呈剂量效应,可增强抗氧化酶如硫氧还蛋白还原酶(TrxR)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,其中以160μg/mL的COS具有较好的效果。COS可抑制炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的产生,降低诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性与一氧化氮(NO)的含量,并呈现剂量依赖性,以160μg/mL COS具有较强的抑制作用,而320μg/mL COS的抑制作用减弱。体外添加COS抑制了核因子-κB(NF-κB)p 50和NF-κB p 65的基因表达,并且呈现剂量依赖性。综上可知,COS可通过抑制NF-κB信号通路活性降低iNOS与炎症因子的基因表达以及NO的生成,进而提高PBMC的抗氧化功能。

摘要：本试验旨在研究放牧补饲精补料对苏尼特母羊体重、血清生化指标和矿物质含量以及羔羊初生重的影响。试验采用单因子随机试验设计,选择体重、胎次接近、健康无病的苏尼特妊娠母羊66只,随机分为2组,每组33只。分娩前,对照组妊娠母羊补饲玉米和青干草,试验组则用等量的精补料代替对照组中的玉米;分娩后,对照组泌乳母羊补饲玉米、豆粕和青干草的混合料,试验组则用等量的精补料替代混合料中的玉米和豆粕。试验期120 d,分为妊娠后期与泌乳前期2个阶段。结果表明:试验组母羊补饲结束时体重以及羔羊初生重有高于对照组的趋势(0.05≤P≤0.10),羔羊2月龄体重显著高于对照组(P<0.05),母羊产后2个月失重显著低于对照组(P<0.05)。妊娠后期试验组血清碱性磷酸酶活性有高于对照组的趋势(0.05≤P≤0.10),血清磷、铜、锰、锌和硒含量显著高于对照组(P<0.05)。泌乳前期试验组血清碱性磷酸酶活性以及尿素氮、钙、磷、镁、钾、铜、锌和铬含量显著高于对照组(P<0.05),血清铁、钴和硒含量有高于对照组的趋势(0.05≤P≤0.10)。由此得出,放牧补饲精补料等量替代玉米或玉米与豆粕的混合料,促进了苏尼特母羊产后体重的恢复与羔羊的生长,提高了妊娠后期与泌乳前期母羊血清磷、镁、铜、锌、硒含量,以及泌乳前期母羊血清钙、钾、铁、钴和铬含量。

摘要：本试验旨在研究妊娠后期饲粮蛋白质水平对母驴初乳与常乳中蛋白质、脂肪和氨基酸含量的影响,为母驴饲粮蛋白质的适量供给和驴乳的优化生产提供理论依据。采用二因素完全随机试验设计,因素一为妊娠后期饲粮蛋白质水平,因素二为产后时间。选择24头年龄[(7.15±1.69)岁]、体重[(270.11±63.24)kg]、胎次[(1.63±0.48)胎]及预产天数[(58.66±4.28)d]相近的德州三粉母驴,随机分为3组,每组8头,妊娠后期分别饲喂高(12.48%,HP组)、中(11.52%,MP组)和低(10.54%,LP组)3个蛋白质水平的饲粮,产后14 d内统一饲喂相同的泌乳饲粮,并分别在产后2、6、12、24、48 h和3、5、7和14 d采集乳样。结果表明:乳中干物质、天冬氨酸(Asp)、丙氨酸(Ala)、酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)、苯丙氨酸(Phe)、缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、组氨酸(His)及必需氨基酸(EAA)、非必需氨基酸(NEAA)、呈味氨基酸(DAA)、支链氨基酸(BCAA)的含量在HP和MP组显著高于LP组(P<0.05);乳中丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、苏氨酸(Thr)的含量在HP、MP和LP组中依次显著降低(P<0.05);HP组乳中蛋白质、总氨基酸(TAA)的含量与EAA/TAA、EAA/NEAA最高,显著高于MP和LP组(P<0.05),乳中脂肪含量正好相反。产后2 h的初乳中,干物质、蛋白质、脂肪以及17种单一氨基酸、EAA、NEAA、DAA、BCAA的含量最高,产后6~12 h快速降低,从产后24 h开始降低趋于平缓,蛋白质及各种氨基酸含量于产后14 d降至最低,脂肪含量在产后5 d降到稳定水平。EAA/NEAA、EAA/TAA以产后2 h、6 h、72 h和14 d较低,其他时间点较高,尤以产后24 h最高。综上可知,与低蛋白质水平饲粮相比,母驴妊娠后期饲喂中、高蛋白质水平饲粮可以提高初乳中的干物质、蛋白质和多数单一氨基酸的含量,改善乳蛋白质品质;随产后时间的延长,驴乳中的脂肪、蛋白质和多数AA含量逐渐降低,以产后2 h最高,从产后24 h开始降低的趋势逐渐平缓,产后14 d降至最低。

摘要：试验探究休牧期饲喂非纤维性碳水化合物(NFC)/中性洗涤纤维(NDF)不同的日粮对苏尼特断奶羔羊体重变化、血清生化指标和矿物元素浓度的影响。试验采用单因素完全随机试验设计,选取体重接近的健康断奶羔羊56只,随机分为NFC/NDF比值不同的低精料(LC)与高精料(HC)2个日粮处理组(公、母比例一致),LC组的NFC/NDF为0.39,HC组为0.52。结果表明:HC组的羔羊体重、血清中谷草转氨酶、碱性磷酸酶活性与尿素氮、甘油三酯含量显著高于LC组(P<0.05),HC组的β-羟丁酸含量明显低于LC组(P<0.05)。HC组血清Ca含量显著高于LC组(P<0.05),其他矿物质含量在两组间无显著性差异。休牧期,在日粮中适当增加精粗比,提高NFC/NDF可以促进苏尼特断奶羔羊的生长发育。根据各指标综合分析,日粮中NFC/NDF为0.52比0.39更有利于促进和改善休牧期断奶羔羊的生长和营养状况。