摘要：民营中小企业信用担保体系可归纳出四大设计原理:功能原理、经营原理、正选原理和博弈原理。针对信用担保体系的问题,提出其健全与发展的建议是:清晰定位担保对象;科学择优担保运作方式;完善资金补偿机制;健全风险分散机制;正确发挥政府作用;促进社会信用体系建设;加强监管体系;建立社会化中介服务体系;加强金保合作,形成共生机制。

摘要：在化学反应动力学机理的研究过程中,某些环境因素如缓冲液组成和离子强度的影响常会被忽略。采用高效液相色谱法,对ClO2^-氧化S2O3^2-受缓冲溶液离子强度以及种类的影响进行研究。结果表明,在同一类型的缓冲溶液中,反应中间物的物种并不受缓冲溶液离子强度的影响,但反应速率随其离子强度的增加而加快。在四个不同的缓冲溶液中测试的反应动力学表明,缓冲物组分对反应速率和反应途径均存在显著的影响,尤其是NH4^+-NH3·H2O缓冲溶液对S2O3^2-的氧化反应和中间物(S4O6^2-)的分解都有明显的促进作用。在对ClO2^--S2O3^2-氧化反应进行动力学机理的研究中,应严格控制反应溶液中离子强度和缓冲溶液中缓冲物的组成,并将其考虑到动力学模型中。

摘要：目的运用原位滚环扩增和原位PCR方法检测HBVcccDNA在肝组织中的表达。方法收集20例乙肝表面抗原携带者、慢性乙型肝炎、慢性乙型肝炎后肝硬化及肝细胞性肝癌患者的石蜡包埋肝组织切片,采用PSAD酶消化、原位滚环扩增方法及使用根据HBVcccDNA与HBVrcDNA结构上的差异而设计的地高辛标记的原位跨缺口引物进行原位PCR,然后用免疫组织化学方法进行显色,显微镜下观察HBVcccDNA在肝组织中表达分布,并对结果进行评价分析。结果：20例标本中有15例可见HBVcccDNA阳性信号,组织切片阳性表达率为平均40-85%,以核型为主,呈蓝色、紫色或紫蓝色,呈颗粒状、弧形或圆形团块状,主要在核及核膜上表达。结论原位滚环扩增方法用于检测肝组织中HBVcccDNA的表达,具有敏感性高、特异性强的特点。

摘要：目的预测金黄色葡萄球菌类肠毒素W(SElW)与T细胞受体(TCR)的对接和超抗原活性位点,并对SElW进行克隆表达和纯化。方法利用AlphaFold对SElW蛋白单体进行三维结构预测,借助SAVES在线服务器使用ERRAT、拉氏图和Verify_3D等软件对蛋白模型进行评估。用ZDOCK服务器模拟SElW与TCR的对接构象,并对SElW与其他肠毒素的氨基酸序列进行比对。设计引物扩增selw基因,将该片段重组于pMD18-T载体中并进行测序;经限制性内切酶BamHⅠ和HindⅢ双酶切后将目的片段重组于表达质粒pET-28a(+)中,重组质粒鉴定后用IPTG诱导表达;用亲和层析法对表达于上清中的SElW蛋白进行纯化,用BCA法对蛋白进行定量。结果三维结构预测结果显示,SElW蛋白由氨基末端和羧基末端两个结构域组成,其中氨基末端结构域由3个α-螺旋和6个β-片层组成,羧基末端结构域由2个α-螺旋和7个反向平行的β-片层组成。SElW蛋白模型的整体质量因素得分为98.08,其中93.24%的氨基酸Verify_3D得分≥0.2,且无氨基酸位于不允许区。模拟对接预测选择评分最高的对接构象(评分值为1521.328)作为分析对象,采用PyMOL软件分析SElW与TCR之间形成的19个氢键。结合序列比对和既往研究结果,本研究预测发现了SElW蛋白的5个重要超抗原活性位点,分别是Y18、N19、W55、C88和C98。通过克隆表达和蛋白纯化,获得了高纯度的可溶性重组蛋白SElW。结论研究预测了SElW蛋白中5个可能的超抗原活性位点,成功构建并表达了SElW蛋白,为进一步探索SElW免疫识别机制奠定了基础。

摘要：目的:建立能同时测定风热感冒颗粒中5种成分含量的方法。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃;1.0 mL/min乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱;多波长转换法测定,检测波长327 nm、278 nm;对绿原酸、牛蒡苷、异绿原酸A、连翘苷、芸香苷的含量测定方法进行方法学验证,将实验结果运用聚类分析(CA)进行评价。结果:在其各自相对应的浓度范围内,风热感冒颗粒中的5种成分均呈现出良好的线性关系(n≥0.9991),平均加样回收率分别为98.67%、97.44%、97.94%、98.44%、100.03%,RSD分别为1.61%、1.38%、1.70%、1.55%、0.96%;10批次样品中绿原酸、芸香苷、异绿原酸A、连翘苷、牛蒡苷成分含量分别为0.091 mg/g~0.227 mg/g、0.094 mg/g~0.258 mg/g、0.084 mg/g~0.274 mg/g、0.080 mg/g~0.217 mg/g、0.809 mg/g~2.584 mg/g;10批样品明显聚为两类,聚类情况为:s3、s10、s4、s2、s5、s9为一类,s1、s8、s6、s7为一类。结论:所建立的方法科学准确,可用于风热感冒颗粒的含量测定。

摘要：目的:建立风热感冒颗粒(FGG)指纹图谱结合化学计量学的多元质量评估方法,为其质量控制提供参考依据。方法:采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)(250 mm×4.6 mm, 5μm),柱温20℃;乙腈为流动相A,0.1%的磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;检测波长为330 nm;进样体积:10μL。运用中药色谱指纹图谱相似度评价系统建立FGG的HPLC指纹图谱,确认共有峰并进行相似度分析;基于指纹图谱共有峰峰面积、相对峰面积测定数据,采用聚类分析化学计量学方法对10个不同批次的FGG进行质量研究。结果:FGG HPLC指纹图谱共标定15个共有峰,指认其中5个,分别为绿原酸、芦丁、连翘苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、牛蒡苷。10批FGG样品相似度为0.881~0.991,相似度存在一定差异;10批FGG按成分比例可以聚为三类,按成分含量可以聚为两类。结论:建立指纹图谱方法精密度、重复性良好,结合化学计量方法可用于FGG的质量控制提供参考依据。