摘要：为研究NDRG1基因在绵羊生长繁殖中的功能,本实验通过克隆NDRG1基因编码区并分别构建过表达和干扰载体,在细胞水平对其功能进行验证。利用RT-PCR扩增绵羊NDRG1基因CDs区,将其克隆至pcDNA3.1(+)载体构建重组表达载体,设计并构建针对NDRG1CDs区干扰载体,利用内切酶消化法对相关质粒进行鉴定。将构建成功的重组载体转染到HEK293T细胞中,分别利用RT-qPCR和Western Blot方法检测其mRNA和蛋白表达量,确认载体功能。结果显示,NDRG1基因克隆片段为1378 bp,与已发布预测的绵羊NDRG1基因进行比对显示在第1031核苷酸位点发生了G-A突变,氨基酸比对结果显示其同源性为100%。酶切鉴定结果显示,NDRG1表达载体和干扰载体构建成功。RT-qPCR与WesternBlot结果表明,构建的重组载体可介导NDRG1基因在HEK 293T细胞中极显著增高,构建的干扰载体可显著降低NDRG1基因表达水平,其中NDRG1-shRNA3干扰效果极显著且高达90%。本实验成功克隆绵羊NDRG1基因,构建针对该基因的表达载体和干扰载体,并在细胞水平验证其功能,为深入研究NDRG1基因在绵羊细胞中的功能提供基础。

摘要：配合我国第一套高产高效综放开采成套装备的使用 ,围绕配套工艺技术及主要参数的确定 ,进行了大量的现场实测研究 ,对工艺配合及参数选择进行了全面、系统的现场试验和优化设计 .据此形成了适应高产高效综放工作面生产的回采工艺技术 ,有效地发挥了配套设备能力 ,取得了国内领先的技术经济效果 .

摘要：在对综放采场放煤、割煤、移架工序进行详细分析的基础上 ,结合煤层条件与设备参数提出了工作面合理年产量的确定方法 ,并将设计结果与兴隆庄煤矿 5 3 18综放面实际产量进行了对比分析。