摘要：目的对人促红细胞生成素（human erythropoietin，HuEPO）基因进行优化，提高其在大肠杆菌中的表达量以及纯化过程中的回收率。方法对HuEPO基因的碱基序列进行设计，用大肠杆菌偏爱密码子替换稀有密码子，构建高效表达重组（r）HuEPO（rHuEPO）的基因。设计rHuEPO的氨基酸突变位点，并对这些位点进行定点诱变，获得高亲水性的突变（M）rHuEPO（MrHuEPO）。对rHuEPO和MrHuEPO的三级结构进行预测及对比．验证突变位点设计的合理性。将rHuEPO和MrHuEPO基因克隆至表达载体pET-15b，并在大肠杆菌中进行表达。对表达产物进行初步纯化和复性，比较复性时的rHuEPO和MrHuEPO可溶性和回收率，并用HuEPO活性检测试剂盒检测rHuEPO和MrHuEPO的活性。结果rHuEPO和MrHuEPO在大肠杆菌中得到成功表达，表达量均〉25％。三级结构预测对比结果表明，突变位点设计合理。rHuEPO和MrHuEPO的表达量无明显差别，但复性时MrHuEPO的可溶性（回收率〉90％）明显高于rHuEPO（回收率〈25％）。rHuEPO和MrHuEPO的比活分别为2.36×10^5和2．33×10^5IU／mg。结论成功构建了可在大肠杆菌中高效表达rHuEPO和MrHuEPO的基因，并通过定点诱变提高了复性时的MrHuEPO可溶性。