摘要：目的建立并鉴定人NSPc1慢病毒过表达系统,以便应用过表达技术进一步研究NSPc1功能。方法设计针对人NSPc1cDNA序列的带酶切位点引物,PCR扩增获得双链DNA后,与酶切后的pLenti6-TO-EGFP-TRIP载体片段进行连接、转化,酶切及DNA测序鉴定重组克隆。提取阳性克隆质粒,转染293T细胞并用Western blot检测质粒过表达效果。用293T细胞制备慢病毒颗粒,感染293T细胞后收集细胞全蛋白,用Western blot检测慢病毒系统过表达效果。结果证实人NSPc1正确插入慢病毒载体,人NSPc1慢病毒过表达质粒及相应病毒颗粒能有效过表达NSPc1。结论人NSPc1慢病毒表达系统的成功建立,为应用过表达技术研究人NSPc1功能打下了基础。

摘要：目的研究多梳蛋白家族成员NSPc1对HeLa细胞增殖的影响。方法运用生物信息学设计并合成敲低NSPc1表达的siRNA序列,用半定量RT-PCR、Real-time PCR及Western blot等检测siRNA序列在HeLa细胞中敲低NSPc1的有效性;将相应有效序列构建到pSUPER载体中,观察其瞬时转染对HeLa细胞BrdU掺入的影响;用G418筛选并建立稳定敲低NSPc1的HeLa细胞系,观察敲低NSPc1对HeLa细胞体外增殖能力的影响。结果(1)设计的siRNA序列可显著敲低NSPc1的表达;(2)瞬时敲低NSPc1阻碍了HeLa细胞BrdU的掺入;(3)成功构建稳定敲低NSPc1的HeLa细胞系,其增殖速度较对照组明显变慢。结论NSPc1的正常表达是维持HeLa细胞正常增殖能力所必需的,稳定敲低NSPc1的HeLa细胞群可作为进一步研究NSPc1相关信号通路的有效模型。

摘要：采用全计算法进行了高性能混凝土配合比设计,在试验过程中分析了掺合料的作用机理,通过试验优化了配合比,配制出了C60泵送高性能混凝土,并成功将其应用于南通某高层结构的混凝土工程中。

摘要：检验检测机构在进行结果质量控制时,虽然按照预先设计的方案进行了相关的机构间和机构内的人员比对、设备比对、方法比对、样品复测等质量控制活动,但由于种种原因,对于其结果缺少合理的评价。利用T检验方法查找比对数据之间差异的显著程度,对其进行了结果评定;同时通过实例分析,验证了该方法的可行性。

摘要：目的探讨Polycomb家族基因Nspc1在模式生物斑马鱼发育早期的表达模式。方法根据GenBank中斑马鱼Nspc1的cDNA序列设计Nspc1原位杂交探针片断,并制备地高辛标记的探针。收取单细胞期、双细胞期、胚芽期及不同时间点的体节期斑马鱼胚胎,用制备好的探针作原位杂交,显微镜下拍照,获得信号适当的杂交结果。结果在斑马鱼体节期前,Nspc1在全身表达;从体节期开始,其表达逐渐表现出特异性,主要在头部的神经系统中表达。结论Nspc1在模式生物斑马鱼的早期发育、尤其是神经系统发育的过程中可能扮演重要角色。

摘要：【目的】构建包装NSPc1-si RNA慢病毒颗粒,并在U87胶质瘤细胞中鉴定其感染及基因沉默效果。【方法】根据Gen Bank中基因信息,采用干扰序列设计软件设计靶点,制备合成GV118-si RNA目的质粒,转化感受态细胞,对于长出的克隆应用菌落PCR鉴定,再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和对比分析,重组病毒质粒与另外2种辅助包装载体质粒通过Lipofectamine TM2 000共转染293T细胞,培养48 h后,收集细胞培养上清液,将病毒浓缩后在293T细胞中测定病毒滴度;并检测病毒颗粒在目的细胞U87胶质瘤细胞中的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blotting方法检测NSPc1 si RNA慢病毒对U87中NSPc1的干扰作用。【结果】成功构建NSPc1 si RNA慢病毒载体GV118-si RNA,重组病毒滴度为4×108TU/ml;用该病毒体外感染U87胶质瘤细胞,当感染复数(MOI)为10时,感染效率大于90%;RT-PCR和Western blotting方法检测NSPc1基因沉默的效率分别为66.4%、60.0%。【结论】成功构建了NSPc1 si RNA慢病毒载体GV118-si RNA,该重组病毒包装后在体外感染U87胶质瘤细胞的效率较高,且具有显著的基因沉默效果。

摘要：直接电位法是一种利用电极来检测水溶性氯离子含量的电化学方法,具有速度快、适用性广等优点,既可用于试验室检测,又可用于现场检测。文中的试验设计了四种浓度的NaCl标准溶液;并以此绘制了三种E-lg C关系曲线;对四种已知浓度的试验溶液分别采用三种E-lg C关系曲线进行推算;并对推算结果进行了对比分析。研究结果显示,选用与待测溶液浓度相适应的标准曲线进行推算,将极大地提高氯离子含量检测结果的准确性。

摘要：目的探究认知康复结合肢体训练对颅脑损伤患者认知与肢体功能的影响,为临床制定相关护理与康复方案提供参考。方法纳入无锡市人民医院2018年5月—2019年5月收治的74例颅脑损伤患者为干预对象,按照随机分组设计法将其分为观察组37例与对照组37例,对照组常规予以营养神经及对症护理支持,观察组在对照组干预基础上给予认知康复结合肢体训练干预,护理干预时间为4周。观察2组护理干预后肢体功能、认知功能恢复情况及生活质量改善情况,认知功能采用记忆商评分(MQ)与精神状态简明检查表(MMSE)予以评估,生活质量则采用生活质量测评表(QOL)进行评估。结果护理后,2组患者的肢体运动功能Fugl-Meyer评分、MMSE评分、MQ评分及QOL各项评分均显著升高,且观察组均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论对颅脑损伤患者实施认知康复结合肢体训练模式干预,可明显改善患者的认知功能、肢体运动功能及生活质量。

摘要：目的构建并鉴定NSPc1-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术以及慢病毒感染系统进一步研究NSPc1的功能。方法设计针对NSPc1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化。用双酶切及DNA测序鉴定重组克隆。提取阳性克隆质粒并转染293T细胞,收集细胞全蛋白用Western检测RNAi效果。结果重组克隆经酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,Western检测证实设计的三条RNA干扰序列有效敲低了293T细胞中的内源性NSPc1。结论 3个NSPc1-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用基于慢病毒系统的RNAi技术来研究NSPc1基因的功能打下了基础。