摘要：为采用SYBR GreenⅠ染料建立检测水貂IFN-α、IFN-β和IFN-γmRNA荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank中登录的MiIFN-α和MiIFN-β、MiIFN-γ和3-磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)基因序列,分别设计合成特异性引物,通过RT-PCR扩增MiIFN-α、MiIFN-β、MiIFN-γ和MiGAPDH的基因片段,构建到pMD18-T载体中制备质粒标准品,建立了相应基因mRNA的荧光定量RT-PCR检测方法并建立标准曲线。结果表明,MiGAPDH、MiIFN-α和MiIFN-β和MiIFN-γ基因的Ct值与标准品稀释度在10拷贝质粒/μL^107拷贝质粒/μL内均呈良好的线性关系,相关系数(R2)均为1.00,熔解曲线均呈单一熔解峰,检测下限为10拷贝质粒/μL,重复性试验表明组内、组间变异系数均小于4.5%。临床样品检测结果表明水貂感染肠炎病毒后,MiIFN-α、MiIFN-β和MiIFNγ相对表达水平均在6d达到最高峰值,MiIFN-α相对表达量要比MiIFN-β和MiIFN-γ相对表达量高两个数量级,并且在感染期(4d^6d)MiIFN-α相对表达量明显提高。本研究为水貂IFN mRNA的定量分析提供了有效工具。

摘要：大体积钢筋混凝土结构温度裂缝的开始、发展和贯通过程具有长期性、复杂性和随机性等特点,温度裂缝的防治在建筑工程领域是个难题。采取措施减少混凝土浇筑体微裂纹、降低浇筑体的入模温度、加强温度观测、保温保湿养护等方法被证明是某剪力墙结构住宅楼基础——大体积钢筋混凝土结构控制温度裂缝成功有效的方法。

摘要：目的本研究以心肺复苏乌斯坦因（Utstein）评估模式评价海南省13家医院心搏骤停患者流行病学特征、心肺复苏结果及其影响因素。方法在Utstein指南基础上设计“海南省心肺复苏Utstein注册登记表”，在2007年1月1日至2010年12月31日期间对海南省13家医院急诊科心搏骤停心肺复苏患者实施注册登记。通过方差分析等统计学方法，对心肺复苏患者实施前瞻性描述性研究。结果1125例心搏骤停患者男性占73．8％，女性26．2％，年龄为（53．9±13．1）岁，既往病史以冠心病最为多见，其次为高血压病；自主循环恢复率为23．8％，成活出院为7．4％。自主循环恢复和成活出院的患者中发病1min内获得心肺复苏患者所占比例分别为41．8％和49．4％。院内心搏骤停（IHCA）患者和院外心搏骤停（OHCA）患者ROSC率分别为36．3％，11．6％，成活出院率分别为11．5％，3．3％。心室纤颤／无脉性室性心动过速患者188例（16．7％），其自主循环恢复率及成活出院率分别为58．0％，21．8％。心源性心搏骤停448例（39．8％）；其中院内与院外心搏骤停患者自主循环恢复率分别为36．3％，11．6％，成活出院率分别为11．5％，3．3％。非心源性心搏骤停677例（60．2％）。三级医院和二级医院自主循环恢复率分别为69．8％和30．2％，成活出院率分别为7．4％和7．3％。结论心搏骤停更常见于男性。慢性疾病在本组患者中普遍存在，其中以冠心病和高血压病最为多见。院内心搏骤停患者自主循环恢复和成活出院率均明显高于院外心搏骤停患者。心室纤颤／无脉室性心动过速患者心肺复苏自主循环恢复及成活出院率高于其他类型初始心律的患者。缩短心肺复苏启动时间有助于提高自主循环恢复率及成活出院率。

摘要：为了有效降低RFID有源电子标签应用过程中的功率损耗,提升使用寿命,设计了一种基于低频唤醒的RFID有源电子标签。将低频唤醒技术作为电子标签系统硬件的主要元素,采用LC并联谐振电路设计理念,通过低频唤醒接收、高频收发、电源、控制、其余外设5个板块组建有源电子标签硬件结构。计算电路的谐振频率与品质因子,运用AS3933低频唤醒芯片监听固定区域频率生成的唤醒信号;使用C语言和星型拓扑下的工作流模型搭建RFID有源电子标签软件部分,为避免电子标签碰撞利用哈希算法确定各电子标签对应某唯一值,给标签配发输送时隙,利用得到的时隙和阅读器实现通信,完成低功耗有源电子标签设计目标。仿真结果证明,所提方法低频唤醒距离长且唤醒稳定性高,休眠功耗较低,有效延长了有源电子标签使用年限,拥有极强实用性。

摘要：以长沙市某道路改造工程为例,根据工程地质条件、周边环境以及道路改造方案等情况,分析了现状排水管道废除的原因,提出了现状排水管道废除常见的4种施工方案——放坡开挖废除、钢板桩支护开挖废除、非开挖灌砂废除、非开挖注浆废除。结合本项目特点,为避免管道开挖对道路质量的影响及节约工程造价的原则,最终确定本项目现状排水管道的废除采用非开挖注浆废除方案。此方案的成功应用可为今后现状排水管道的非开挖废除提供范例。

摘要：建筑供热供冷是社会各界高度关注的民生工程,热泵是将热能从低品位提升到高品位的高效低碳供能方式,也是国际建筑领域实现碳中和的重要途径。本项目针对大型建筑群复合式热泵供热供冷系统存在总冷热负荷动态预测方法缺失、规划设计体系不完备、系统运行能效低、关键技术和产品不配套、规模化推广难度大等问题,以提升复合式热泵系统能效、有效推进规模化应用为目标,系统性地开展了“负荷预测-优化设计-智慧运行-关键产品-标准推广”的全链条创新工作:提出了基于建筑特征、用户需求的大型建筑群供热供冷系统总负荷动态预测方法,开发了冷热动态负荷特征因子数据库和建筑群负荷集合寻优工具;提出了一种多场景复合式热泵系统能源总线架构理论,建立了仿真平台及综合评价体系,形成了系统容量弹性配置方法;建立了数字孪生复合式热泵系统模型,提出分层控制架构和预测方法,建立了智慧优化运行控制体系;研发了大型复合式热泵系统的关键技术和成套产品;制定了相关工程标准。相关研究成果实现了规模化稳定高效利用可再生能源供热供冷的技术突破,对推进建筑用能方式变革和实现建筑领域国家双碳战略起到重要支撑作用。

摘要：结合镇域资源,潭门镇政府和规划建设者提出紧抓千年古渔镇渔业文化这一最大品牌,打造潭门渔家风情特色。特色塑造主要从以下四方面展开:一是强调"产业支撑、文化展示、风情体验"结合的规划设计理念;二是空间布局上合理设置功能区域;三是在物质环境设计中充分挖掘海洋文化元素并以符号的形式再现于小镇空间;四是注重对赶海节、放海灯等体验项目的开发。真正做到对海洋文化的资源开发的静态展示和动态体验结合,营造出具有浓郁渔家风情的小镇环境。

摘要：目的:采用一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),检测外科手术切除新鲜组织、石蜡包埋组织及纤维支气管镜活检组织中WIF-1基因启动子的异常甲基化状态。方法:将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果:在3种类型的原发性非小细胞肺癌标本中都检测出了WIF-1基因启动子的异常甲基化。结论:巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化的分析。

摘要：出现于20世纪80年代后期的微机械技术可以制作出微米尺度的传感器和执行器。这些微器件与信号调节和处理电路集成后,组成了可执行分布式实时控制的微电子机械系统(MEMS)。这种性能为流动控制研究开辟了一个崭新的研究领域。利用MEMS技术设计和制作了一种传感器和一种执行器。实验证明,采用体硅腐蚀的工艺制作微流体器件是可行的,同时可以避免牺牲层腐蚀和释放的复杂工艺。

摘要：[目的]构建猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)ORF2 DNA核酸疫苗,并评价其免疫效果和安全性。[方法]设计一对特异性引物,扩增PCV2-ORF2,利用T载体对其进行克隆,与真核表达载体PcDNA3.1在同等条件下进行双酶切,并进行连接,转化感受态细菌DH5α并克隆,经双酶切鉴定筛选阳性重组质粒,即DNA核酸疫苗,命名为PcDNA3.1-ORF2。将该核酸疫苗瞬时转染Vero细胞,通过RT-PCR鉴定其在细胞内的表达情况;并且将该核酸疫苗按100μg.只-1腿部肌肉注射免疫Balb/c小鼠,同时设PBS和PcDNA3.1空载体为对照,免疫2次,间隔2周。分别于首免后第14 d和第28 d采血,用ELISA方法检测其血清抗体。取首免后56 d小鼠的心、肝、脾、肺、肾和脑等实质器官,采用PCR方法检测该核酸疫苗的安全性。[结果]成功地构建了PcDNA3.1-ORF2核酸疫苗,在体外Vero细胞中得到了瞬时表达,并且能诱导小鼠产生较强的免疫应答。安全性试验表明该核酸疫苗未整合到小鼠染色体上。[结论]PcDNA3.1-ORF2核酸疫苗可以诱导小鼠产生较强的免疫应答,并且是安全的。