摘要：目的建立3种用于检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因的一步法实时逆转录PCR,用于本实验室G1、G2和G4型轮状病毒的快速检测和定量、定性分析。方法设计G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因特异性引物和探针,采用G1、G2和G4型轮状病毒特异性体外转录RNAs,建立实时逆转录PCR,特异性检测G1、G2和G4型轮状病毒VP7基因方法。结果 3种实时逆转录PCR标准曲线R^2均大于0.99,扩增效率均在90%～110%之间。不同浓度体外转录RNAs重复性检测结果 CV均<5%,且可以对单拷贝RNAs样本进行检测。结论本检测方法快速、灵敏且重复性好,可以对轮状病毒VP7基因进行特异而有效的检测,为实验室轮状病毒毒株的分型和定量检测提供了特异而有效的检测方法,也为今后多重实时逆转录PCR的建立奠定了试验基础。

摘要：根据GenBank中的副猪嗜血杆菌(HPS)的infB基因的序列(DQ781808.1),利用分子生物学软件Premier 5.0设计一对特异性引物,建立基于SYBR Green I荧光定量PCR检测HPS的技术。试验采用煮沸法从HPS培养物中提取DNA,进行PCR扩增。将鉴定正确的目的基因片段克隆入pMD18-T载体中,转化大肠杆菌DH5α,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为阳性标准品。结果表明,该方法对HPS具有良好的特异性,不与其它猪源细菌发生交叉反应,其敏感性比常规PCR高100倍,而且非常稳定,批间与批内重复试验变异系数均小于2.5%。临床应用表明本方法的建立实现了对HPS的快速诊断和定量的检测。

摘要：目的了解甘肃省、内蒙古自治区、宁夏回族自治区吸毒成瘾人群药物滥用现状,为该地区药物滥用的防治提供科学依据。方法采用分层整群抽样方法抽取北方三省区15个强制隔离戒毒所内的5 677例吸毒成瘾者为研究对象;采用自行设计的调查问卷,对研究对象开展面对面流行病学调查。结果 (1)北方三省区药物滥用种类共28种,前5顺位(滥用率)依次为海洛因(67.6%)、冰毒(28.3%)、底料加黄皮(11.6%)、复方地芬诺酯片(9.4%)和曲马多(9.2%);(2)北方三省区吸毒成瘾人群药物滥用种类、滥用率和顺位存在差异;(3)滥用年限、戒毒次数、获得难易程度、主要获得途径是主要毒品滥用的影响因素。结论北方三省区吸毒成瘾人群药物滥用种类以海洛因、冰毒和底料加黄皮为主,并辅以医疗用药物的滥用。3种主要毒品在不同省份、滥用特征方面均存在一定的差异性,提示应根据各地区不同的滥用特点采取相应的防治策略。

摘要：AutoCAD软件中,在对三维模型剖切得到的平面采取提取边界措施后,所得到的内外边界轮廓几何参数的Z轴方向可能会出现相反的情况,从而导致读取的几何参数与实际不符。针对剖切三维模型得到的平面边界,本文提出了一种坐标系转换算法,借助于内嵌的Visual LISP开发工具,为进一步分层研发设计、逐层加工制造提供准确的几何数据参数。