摘要：目的：克隆表达华支睾吸虫脂肪酸结合蛋白（ Clonorchis sinensisfatty acid binding protein，CsFABP），并对其免疫原性进行分析。方法根据编码CsFABP的已知基因序列设计合成一对引物，应用RT－PCR技术扩增编码CsFABP的基因片段。将扩增的CsFABP的基因片段克隆到原核质粒pET30a（＋）中，转化入大肠埃希菌（ E． coli） DH5α中，经含卡那霉素琼脂平板筛选，小量抽提质粒，经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。将阳性重组质粒转化入*** BL21中，经异丙基－β－D－硫代半乳糖苷（ IPTG）诱导表达，表达产物经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ SDS－PAGE）、考马斯亮蓝染色、Western blot分析鉴定。结果经酶切、菌液PCR以及测序确认，成功构建重组质粒pET30a（＋）－CsFABP，并在*** BL21中高效表达。 Western blot试验证实表达的Cs-FABP能被特异的兔抗华支睾吸虫免疫血清识别。结论本研究成功构建重组质粒pET30a（＋）－CsFABP，获得的CsFABP表达蛋白质具有一定的反应原性。

摘要：背景在5G+区块链建立的转出医院、医疗急救中心和接诊医院三位一体的危重新生儿急救转诊网络体系中,实现“上车即入院”,提升危重新生儿转运(NT)质量。目的构建多场景NT给药方案标准化知识库,开发多场景NT给药临床决策支持系统。设计质量改进研究。方法检索急危重NT途中给药管理的指南或共识,提取不同转运场景下药物应用证据,并通过专家共识构建NT给药知识库,基于决策支持系统帮助转运医生规范用药,分析其运行前(对照组)后(干预组)在上海市内NT药物使用情况。主要结局指标NT用药次数和种类。结果中英文数据库和其他资源系统共检索到149篇文献,去重、初筛和全文筛选后纳入了1篇专家共识,同时增加权威专著3部作为证据来源进入不同场景NT药物使用知识库的提取,共识专家组细化了低血糖场景设置(分为症状型和非症状型),对12种药物的推荐方案做了细化,NT不同场景药物使用知识库确定了16种药物。对照组30例,干预组61例,两组患儿性别、病种、胎龄差异均无统计学意义(P>0.05),出生体重差异有统计学意义(P=0.02)。对照组NT中使用了33次4种药物,干预组NT中使用了88次11种药物,其中由决策支持系统智能识别后触发弹窗提醒使用74次(85.9%),由医生主观判断选择场景后触发使用14次(14.1%)。干预组用药种类覆盖了对照组,对照组人均使用药物次数比为1.1(33/30),较干预组[1.4(88/61)]差异有统计学意义(P=0.041);对照组人均使用药物种类占比为25%(4/16),较干预组[62.5%(11/16)]差异有统计学意义(P=0.013)。结论构建的NT给药知识库及决策支持系统促进了NT中的规范用药和积极用药。