摘要：为获得产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)的重组突变体,并评价其毒力及免疫原性。对已知的D型产气荚膜梭菌ETX编码基因进行优化设计,并将第106位组氨酸突变为脯氨酸,经人工合成获得基因片段GETXH106P。将GETXH106P克隆至原核表达载体p ET30a(+),转染BL21(DE3)菌中进行表达与纯化,从而获得重组蛋白r ETXH106P。利用Western blot方法检测r ETXH106P与D型产气荚膜梭菌抗血清的反应性,并检测其对犬肾细胞系(MDCK细胞)以及小鼠的毒力。随后,将r ETXH106P与Montanide ISA 201佐剂混合乳化制备疫苗,免疫4只健康家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测一免及二免后兔血清的中和抗体效价。结果表明,r ETXH106P为可溶性表达,通过灰度扫描,其可溶性表达量比例可达30%;该重组蛋白能与D型产气荚膜梭菌毒素抗血清反应;细胞毒性试验结果显示,100μg/m L的重组蛋白仍无细胞毒性;小鼠安全性实验结果显示,6.25×106ng/kg剂量的重组蛋白对小鼠仍无致死性;每毫升的一免抗血清可中和450~700个最小致死量(MLD)、二免抗血清可中和3000~4000个MLD的D型产气荚膜梭菌毒素;用1 MLD的D型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔4/4死亡,免疫组家兔4/4保护。以上结果表明,产气荚膜梭菌r ETXH106P重组蛋白毒力基本消失,且保留了良好的免疫原性,是D型产气荚膜梭菌病基因工程亚单位疫苗的理想候选抗原蛋白。

摘要：目的:通过多中心完全随机、标准治疗平行对照方法评价京万红软膏治疗糖尿病足慢性创面的疗效。方法:本研究共有11家医院参加,采用多中心完全随机、标准治疗平行对照、前瞻性临床研究设计。131例糖尿病足溃疡患者随机分为京万红软膏组67例和对照组64例,两组创面面积分别为(16.7±6.1)cm2和(15.9±8.3)cm2,创面形成时间(45.7±68.3)d和(52.5±79.6)d。两组分别用京万红软膏或复方磺胺嘧啶锌凝胶涂于创面,观察疗程均为20周。结果:两组患者年龄、糖尿病病程、血常规、肝功能、肾功能等数据差异无统计学意义。京万红组于2、5、10、15周创面愈合速率明显优于复方磺胺嘧啶锌凝胶组,以第5周、10周最为明显(P<0.01)。京万红组创面达到完全上皮化平均时间为(46.5±15.6)d,复方磺胺嘧啶锌凝胶组为(67.9±17.9)d,差异显著(P<0.05)。结论:京万红软膏与复方磺胺嘧啶锌凝胶均有促进糖尿病足创面愈合的作用,京万红软膏作用更优。

摘要：目的探讨肱骨近端解剖锁定型钢板治疗肱骨近端骨折的手术方法和疗效。方法我院2009～2012年应用肱骨近端解剖锁定型钢板治疗肱骨近端骨折46例,总结手术疗效。结果本组45例患者获随访3～18个月,平均7个月,1例丢失。患者骨折均达临床愈合,肩关节功能Neer评分：优35例、良7例、可3例。结论肱骨近端解剖锁定型钢板设计合理,可避免股骨头内螺钉松动不稳,固定强度能达到早期功能锻炼的要求,而且安装时不需过多剥离软组织,是一种较好的内固定方法。

摘要：目的探讨腹腔镜下肾前筋膜间平面的活体形态解剖和毗邻关系,总结和阐述肾前筋膜间平面相关的解剖分层,以便为腹腔镜下上尿路手术中寻找安全正确的外科解剖层面,进行无血化解剖性手术操作提供筋膜解剖学依据。方法经腹腔入路3例,经腹膜后腔入路25例,其中肾上腺肿瘤切除术11例、肾切除术8例、肾癌根治术2例、肾部分切除术2例、肾盂输尿管成形术3例、输尿管上段结石2例。术前进行320排CT影像解剖分析肾筋膜结构。术中对镜下肾前筋膜间层面解剖结构及毗邻关系认真分析、仔细辨别。术后反复观看视频,反复讨论,并将研究理论应用于手术实践中。绘制解剖图片、展示肾前筋膜间平面解剖、设计新的手术入路。结果肾前筋膜间平面在胚胎学上也称为系膜后平面,肾前筋膜间平面包括结肠融合筋膜肾前融合筋膜间平面、肾前融合筋膜肾筋膜前叶间平面、肾筋膜前叶肾脂肪囊外平面,是多层次的无血管筋膜结构。在手术中选择经肾旁前间隙解剖大层面入路,循筋膜间隙及肾前筋膜间平面进入正确的解剖层面精细操作,保持镜下术野清晰,进行无血化解剖性手术处理,便捷、精准到达目标器官。在腹腔镜下肾前筋腹间平面内可观察到充满蜘蛛丝网格状白色纤维组织,直视下操作能得到一个更大的手术工作间隙和无血管游离平面。结论肾前筋膜间平面是肾脏和肾上腺外科手术时前入路的安全层面。循肾前筋膜间平面直视下辨别肾前筋膜及毗邻脏器,为无血化解剖性腹膜后脏器微创手术带来新的视野和理念,

摘要：目的构建中医药治疗新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)疗效评价标准。方法检索中医药治疗新冠肺炎的相关文献,提取其中临床疗效评价信息;对所承担武汉市金银潭医院、武汉市将军路街卫生院救治任务所获得的临床数据进行分析,获取可用于中医药疗效评价的指标。结合文献报道与临床资料筛选出中医药治疗新冠肺炎的疗效评价指标,并根据其反映机体恢复的能力大小,结合专家意见设置相应的权重等信息,提出中医药治疗新冠肺炎疗效评价指标的遴选原则,并进行疗效评价指标筛选。结果综合文献与临床资料分析,能够较好地反映经过中医药治疗后机体功能恢复的有发热、咳嗽、呼吸急促、乏力、纳差、恶心、胸闷、舌象等主要证候指标,指端血氧饱和度(%)、淋巴细胞计数(LY)、淋巴细胞百分比(LY%)、中性粒细胞计数(NEUT)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、C反应蛋白(CRP)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)等实验室检查及胸部影像学检查,认为以上指标可作为中医药治疗新冠肺炎疗效的评价指标。结论设计完成了中医药治疗新冠肺炎疗效评价量表,构建了疗效评价指标体系及结果判定标准。该标准的构建将有利于后续中医药临床数据的收集,可为科学评价中医药在治疗新冠肺炎中的作用与优势提供依据。

摘要：目的探讨桥粒芯糖蛋白（DSG2）基因沉默对HL-1细胞超微结构、细胞凋亡以及纤维化、脂肪化相关基因表达的影响。方法设计并合成针对DSG2基因编码区的干扰序列，构建真核细胞表达质粒并转染HL-1细胞。荧光定量PCR（RT—PCR）和蛋白免疫印迹（Westernblot）技术检测DSG2在mRNA和蛋白水平表达变化，筛选出沉默效率最佳的细胞株。观察其超微结构、细胞凋亡和纤维化与脂肪化相关基因mRNA水平表达的改变。结果成功构建了4种ShDSG2重组质粒，转染HL-1细胞并获得稳定转染细胞株，筛选出对DSG2基因mRNA水平（71．67％对0，P〈0．01）和蛋白水平表达（51．72％对0，P〈0．01）的抑制效率最显著的ShDSG2—273组。电镜扫描显示后者细胞空泡样变性、线粒体肿胀和嵴消失，流式细胞仪检查提示细胞凋亡显苫增加，RT-PCR示纤维化相关基因（Collal、Colla2、C013a1）与脂肪化相关基因（Adiponectin、PPAR-γ和C／EBP-α）的mRNA表达显著升高。结论成功建立能有效抑制DSG2表达的HL-1细胞株，表现出符合致心律失常型右心室心肌病（ARVC）患者病理和分子生物学特点的表型特征，提示其可作为深入研究ARVC致病机制的工具细胞。

摘要：锦屏深地核天体物理(JUNA)实验项目将利用中国锦屏深地实验室(CJPL)的良好条件,在天体物理伽莫夫能量窗口开展核天体关键反应^(25)Mg(p,γ)^(26)Al、^(19)F(p,α)^(16)O、^(13)C(α,n)^(16)O和^(12)C(α,γ)^(16)O的直接测量,为理解恒星演化和元素起源提供新的数据。目前,已经在地面上对加速器装置、束流稳定性、靶、探测器以及电子学进行了系统的测试。地面实验内容包括高纯锗探测器效率刻度,^(25)Mg(p,γ)^(26)Al在304 keV的共振强度测量,^(19)F(p,δ)^(16)O的截面测量,聚乙烯作为慢化体的中子探测器的设计、加工和效率刻度,靶的设计和稳定性检测等。JUNA项目整体进展顺利,地面实验已取得一系列关键进展和初步成果。在不远的将来,JUNA项目将有序开展地下实验,完成设定目标,也将促进更广泛的国际合作,助力于天体演化中的若干重大科学问题的解决。

摘要：作为提高动物实验报告质量的工具,ARRIVE指南自2010年发布以来得到了众多专家学者的认可。限于ARRIVE 2010部分条目过于繁琐,导致研究人员在其实际应用中遇到诸多困难。为此,指南制定专家重新对ARRIVE指南进行修订,即ARRIVE 2019。本文对ARRIVE 2019进行详细介绍,以便于国内研究人员充分利用ARRIVE指南改进动物实验的设计、实施与报告规范,提高动物实验的可重复性和结果的再现性。

摘要：穿支皮瓣由皮肤穿支血管供血,是常用的组织缺损修复形式,但头颈部解剖复杂、缺损形式多样以及穿支血管解剖变异等,阻碍了穿支皮瓣在口腔颌面-头颈部缺损修复中的进一步应用。迄今为止,国内外对于穿支皮瓣修复口腔颌面-头颈部缺损临床应用缺少相关治疗指南,穿支血管的术前评价缺乏统一标准,穿支皮瓣的应用设计缺乏科学的规范,穿支皮瓣修复术后缺少客观的监测和评价体系。为进一步统一和规范穿支皮瓣在口腔颌面-头颈部缺损修复中的应用,提高重建效果,本共识总结全国多家著名医学院校及附属医院口腔颌面外科专家团队的实践经验,供临床医师参考。

摘要：目的 探讨医院感染信息化建设对防控能力提升的效果。方法 2017年10-12月对多中心进行研究,设计标准化问卷,在三级综合甲等医院中开展调研。床位数2 000的医院9所(34.62%)。采用回顾性研究,分析医院感染信息系统安装后医院感染质控指标提升情况。再采用前瞻性研究,选择神经外科、重症监护病房、血液科和神经内科的连续病例,通过人工全病例判定与医院感染信息系统预警后人工处理对比医院感染率差异,并采用Meta分析综合比较计算率差及95%CI。结果 共有26所三级综合医院进入本次研究。所有医院均可主动生成预警病例、医院感染发病(例次)率、自动抓取微生物培养阳性监测信息。23所(88.46%)医院可获取多药耐药菌发生率、抗菌药物治疗前病原菌送检率。22所(84.62%)医院可以获取多药耐药菌检出率、I类切口手术部位感染率及患者抗菌药物使用升级能预警。22所(84.62%)医院每年预算中有医院感染监测系统维保经费。21所(80.77%)医院患者血常规指标异常能预警、20所(76.92%)医院患者影像学异常能预警,医院感染信息系统显著减少4.00%的医院感染漏报率(RD=-4.00%,-2.00%^-6.00%,P<0.001),信息系统辅助可提升85.00%MDRO发生率(OR=1.850,95%CI=1.340~2.540,P<0.001)。在前瞻性研究中,总共抽取了5 320例连续病例,通过信息系统预警并结合手工判定与全病例纯手工判定差异无统计学意义,合并率差为0.017(-0.001~0.035)。结论 医院感染信息系统应用后可显著提升医院感染风险识别能力,更高效的预警且不减少医院感染病例发现。