摘要：在院前急救中,快速识别心脏骤停并对复苏后患者进行实时心电监护是非常必要的。该文提出院前急救全程心电监测的概念,并设计一种便携式院前急救心电监测仪(Prehospital ECG Monitor,Pre-ECG)。Pre-ECG具有两种工作模式,即快速检测模式和连续监护模式。在快速检测模式下使用金属电极可在几秒钟内显示患者心电波形和心率,以了解病人心脏电活动状况;接入导联线后则自动切换为连续监护模式,能够实时显示心电波形和心率,并能够对心率相关异常实时报警,满足转运过程中心电监护的要求。两种工作模式下的心电数据都可永久存储在Tran Flash卡中,可以通过蓝牙打印机打印输出或通过网络传输进行远程会诊,也可留作法律依据和学术研究资料。

摘要：为了实现非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白的可溶性表达,制备其特异性单克隆抗体,建立AHSV VP7阻断ELISA抗体检测方法,通过对编码AHSV VP7蛋白的基因序列进行突变设计与密码子优化,以大肠杆菌表达系统表达可溶性VP7蛋白并进行纯化,免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得VP7蛋白单克隆抗体。通过细胞免疫荧光和Western-blot鉴定单克隆抗体的特异性,并建立AHSV VP7阻断ELISA方法。结果显示,利用大肠杆菌表达系统成功表达了可溶性重组AHSV VP7蛋白,将纯化的VP7蛋白免疫小鼠筛选制备了2株稳定分泌VP7蛋白单克隆抗体的细胞株,分别为3F7和7H8。经鉴定证明这2株VP7单克隆抗体不仅能与大肠杆菌重组表达的VP7蛋白反应,而且也与BHK-21细胞表达的具有天然构象的重组VP7蛋白反应,具有良好的特异性和反应性。以重组VP7蛋白和单克隆抗体7H8分别为包被抗原和阻断抗体建立了AHSV VP7阻断ELISA方法,检测了277份马血清样本,结果与商品化进口AHSV抗体检测试剂盒测定结果一致。本研究在大肠杆菌表达系统中实现了AHSV VP7蛋白的可溶性表达,制备获得了VP7特异性单克隆抗体,并建立了AHSV VP7阻断ELISA方法,为我国有效防控非洲马瘟的传入提供了技术储备。

摘要：溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,Mh)和多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)是两种条件性致病菌,可导致多种临床症状,给羊产业造成一定经济损失。为临床上快速、准确地鉴别诊断这两种细菌所导致的疾病,根据Mh的Lkt基因和Pm的kmt基因分别设计引物,建立了在一个反应体系中同时鉴别检测这2种细菌的PCR方法。结果显示:建立的PCR鉴别检测方法对Mh、Pm基因组DNA的检测限分别为7.23×10^(-6)、6.99×10^(-5) ng/μL,对羊链球菌、金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、羊支原体核酸检测均为阴性,在多次重复试验中均可检测出阳性样品,其反应试剂均扩增出预期大小的片段。对95份羊源疑似临床样品进行检测,Mh检出率为38.95%(37/95),Pm检出率为53.68%(51/95),混合感染检出率为12.63%(12/95),鉴别检测结果与单重PCR检测结果基本一致。结果表明:该方法具有较好的特异性、敏感性、重复性及稳定性,可用于临床检测,为羊呼吸道疾病的鉴别诊断提供了一种方便、快捷和准确的检测手段,具有良好的临床应用前景。