摘要：目的建立一种简便、快速和高敏感度的蚊体内间日疟原虫检测的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法针对间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因种属特异性保守区域6个位点设计2对引物,以感染性按蚊、阴性按蚊、恶性疟原虫及正常人血DNA为模板评价LAMP的特异性。将间日疟原虫CSP基因质粒DNA梯度稀释,并与阴性按蚊DNA按1.0μl加1.3×106、1.3×105、1.3×104、1.3×103、1.3×102、1.3×101、1.3×100拷贝混合后为模板进行LAMP反应,观察其检测敏感性;将感染性按蚊与阴性按蚊DNA作1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256稀释,然后以稀释样本为模板进行LAMP反应,观察批量检测的敏感性。再用此方法与镜检解剖、巢式PCR同时检测同批次人工感染的67只按蚊,评价其应用价值。结果此法检测感染性按蚊阳性,对照组均为阴性;检测不同比例稀释的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA混合物,最低可检测1.3×102拷贝的间日疟原虫CSP基因质粒DNA与按蚊DNA的混合物;检测不同比例感染按蚊与阴性按蚊DNA混合样本,最低可检测出在128个按蚊中有1个感染按蚊的混合样本;用此法检测67只同批次人工感染的按蚊,检出率为47.76%,解剖镜检检出率为25.37%(χ2=7.24,P0.05)。以镜检解剖作为金标准,LAMP敏感性为100%,巢式PCR敏感性为100%。结论LAMP检测蚊体内间日疟原虫简便、快速、敏感性高,具有广阔的应用前景。

摘要：[目的]筛选白芨试管球茎膨大培养基配方,为白芨的离体快繁和工业化生产提供参考依据。[方法]采用L( 9 34)正交试验和单因素完全随机试验设计方法,筛选适宜白芨试管球茎膨大的基本培养基、生长调节剂种类和浓度及蔗糖和活性炭浓度,确定白芨试管球茎膨大的最佳培养基配方。[结果]萘乙酸(NAA)和基本培养基对白芨试管球茎膨大的影响大于6-苄氨基嘌呤(6-BA),当NAA浓度为0.1 mg/L时,试管球茎膨大的各指标值均最大;6-BA对试管球茎膨大各指标值均无显著影响(P>0.05);以1/2MS为基本培养基更有利于白芨试管球茎生根和膨大。蔗糖是影响白芨试管球茎膨大的重要因素,随蔗糖浓度增加,试管球茎逐渐膨大且根生长量及植株长势渐好,当蔗糖浓度为20.0~40.0 g/L时试管球茎增殖效果较佳。培养基中添加0.5 g/L活性炭的白芨试管球茎鲜重增殖率最高,为33.41%。相关性分析结果表明,试管球茎生根率与鲜重增殖率呈正相关,与高度增殖率呈显著正相关(P<0.05);试管球茎萌芽率与鲜重增殖率、高度增殖率和直径增殖率均呈负相关,即生根对试管球茎膨大起促进作用,而芽分化对试管球茎膨大起抑制效应。[结论]1/2MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+20.0 g/L蔗糖+0.5 g/L活性炭可作为白芨试管球茎膨大的最佳培养基配方加以推广应用。

摘要：以表观填隙系数为主要控制指标制备了不同强度等级的透水混凝土,分析了透水指标与连通孔隙率的关系。采用黄泛区粉土饱和泥浆作为堵塞介质,测定了预定次数堵塞(淋泥-晾干)循环后的各项透水指标,评价了饱和泥浆对透水混凝土抗堵塞性能的影响。结果表明:透水混凝土各项透水指标与连通孔隙率密切相关;当体系水灰(胶)比为0.24、表观填隙系数为0.70、高性能减水剂掺量适当时,透水混凝土抗压强度达到最高(28.3 MPa)且不积浆;经过堵塞循环后,透水混凝土的透水性下降明显,与掺减水剂试样相比,未掺减水剂试样的透水性损失速度快;初始连通孔隙率为10.5%的透水混凝土,经受近30次饱和泥浆的堵塞循环后,透水系数基本衰减到相关规程规定的下限值以下。

摘要：为快速、灵敏、准确检测猫传染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,FIPV),以FIPV N基因为靶序列设计合成特异性引物及TaqMan探针,建立了一种FIPV实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行了试验。结果表明:该方法灵敏度高,最低检测限为3.4 copies/μL;特异性强,与狂犬病毒、猫疱疹病毒、猫杯状病毒、猫细小病毒、犬流感病毒、犬瘟热病毒等均无交叉反应;重复性好,批内变异系数为0.99%~4.13%,批间变异系数为1.29%~4.64%。以上结果说明,本试验建立的实时荧光定量RT-PCR检测方法特异、敏感、重复性好,适用于FIPV的快速检测。

摘要：目的设计并合成4-(2',3'-二氯苯基)-1,4-二氢-2,6-二甲基-3-吡啶甲酸甲酯。方法以2,3-二氯苯甲醛为起始原料经缩合、环合、水解反应制备得到目标化合物。结果合成了目标化合物,并利用MS和1H-NMR确证了结构;HPLC归一化法测得质量分数为98.3%。结论 4-(2',3'-二氯苯基)-1,4-二氢-2,6-二甲基-3-吡啶甲酸甲酯的合成为丁酸氯维地平中杂质的研究提供了方便。

摘要：针对牛寨换流站阀厅空调系统螺杆冷水机组启停过于频繁,多次出现压缩机烧坏现象,通过深入实地调查和研究,采用一系列的故障诊断方法,分析了螺杆压缩机频繁启停的原因,提出了对应的解决方案,为后续直流工程阀厅空调系统设计运维提供科学依据。

摘要：本文旨在制备迷迭香酸自微乳并研究其口服生物利用度。通过溶解度考察、配伍试验与伪三元相图绘制初步筛选配方,再以油相占比(质量比)、K_(m)(乳化剂与助乳化剂质量比)为影响因素,粒径、Zeta电位、载药量为评价指标,进行星点设计-效应面法进一步优化配方。大鼠随机分为2组,分别灌胃给予原料药(0.5%羧甲基纤维素钠溶)、自微乳,给药剂量200 mg/kg,于0.25、0.5、0.75、1、2、4、8、12 h采血,HPLC法测定迷迭香酸血药浓度,计算主要药动学参数。结果表明,自微乳配方为:MCT(中链甘油三酯)为油相、RH40为乳化剂、PEG400为助乳化剂,油相占比14.85%,K_(m)为2.61。与原料药相比,自微乳t_(max)有效缩短(P<0.01),C_(max)、AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)升高(P<0.01),相对口服生物利用度提高至1.7倍,本研究证实迷迭香酸自微乳可有效提高其口服生物利用度。

摘要：目的:建立检测急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)患者PML/RARα融合基因6种特异性异构体(bcr1/2、P4R3、P46R3、bcr3及P2R3)的实时定量PCR(RQ-PCR)技术,并评价其特异性。方法:设计不同异构体的特异性引物和探针,建立异构体特异性RQ-PCR方法对6种特异性异构体PML/RARα阳性模板进行扩增,评价异构体定量检测的特异性,并检测10例APL患者中不同异构体的含量。结果:所建立的各异构体特异性RQ-PCR法最大敏感性均达10拷贝/μL,但其重复性较差,108~102拷贝/μL阳性模板的重复性良好,正常对照及空白对照无扩增信号,每个异构体特异性RQ-PCR均不能扩增其他异构体。5例长型(bcr1)和1例变异型(bcr2)阳性APL患者中bcr1/2异构体表达量为7.71%~89.71%(中位数13.70%),P4R3异构体表达量为0.71%~16.26%(中位数4.48%),P46R3异构体表达量为3.57%~14.09%(中位数6.33%)。4例短型(bcr3)患者中bcr3异构体表达量为21.43%~197.04%(中位数100.69%),P2R3异构体表达量为0.34%~9.07%(中位数2.45%)。1例短型患者经诱导治疗缓解后bcr3和P2R3异构体转录本明显下降,复发时又明显升高。结论:检测PML/RARα异构体特异性RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于APL患者不同异构体的定量检测和微小残留病灶的随访监测。

摘要：目的:应用生物信息学技术筛选影响胶质母细胞瘤(GBM)化疗敏感性的相关基因。方法:对2批胶质瘤患者BIOSTAR基因芯片进行分析。通过随访完善临床资料,筛选芯片中胶质母细胞瘤患者生存期长、短两组间的差异基因,明确差异基因参与的功能和通路,并构建与烷化剂相关基因的信号传导网络,结合芯片数据、患者预后和信号传导网络,筛选GBM化疗敏感性的相关基因。结果:两组芯片中间差异基因有503条。2批芯片的差异基因主要参与62项基因功能,主要参与31条信号传导通路。通过对差异基因功能、通路,烷化剂信号转导网络的分析,得到影响胶质母细胞瘤化疗敏感性的核心的差异基因IFNGR2、IL8、ITGA5、TNFRSF1B。结论:通过严谨的实验设计和科学的统计学判别,结合患者完整的生存资料,本研究成功地应用生物信息学技术对基因芯片的大量数据进行挖掘和分析,并筛选出了可能影响GBM患者预后和化疗药物敏感性的基因,为进一步功能实验和患者个体化治疗奠定了基础。

摘要：目的:评价龙牡壮骨颗粒治疗小儿汗证肺脾气虚证(维生素D缺乏性佝偻病早期)的临床疗效及安全性。方法:采用随机双盲、阳性药平行对照、多中心设计,将240例患儿以1∶1比例分为试验组和对照组。试验组予龙牡壮骨颗粒+维生素D滴剂模拟剂,对照组予龙牡壮骨颗粒模拟剂+维生素D滴剂,疗程均为8周。比较两组自汗、盗汗总有效率,中医证候疗效,血清钙、磷、碱性磷酸酶、25-(OH)D_(3)、腕部X线复常率和安全性指标。结果:试验组、对照组自汗、盗汗疗效总有效率分别为86.44%(102/118)、75.00%(87/116),试验组优于对照组(P<0.05)。中医证候疗效试验组优于对照组(P<0.05);两组血清钙、磷、碱性磷酸酶、25-(OH)D_(3)、腕部X线复常率比较,差异无统计学意义。两组各发生16例不良事件,无药物不良反应,组间差异无统计学意义。结论:龙牡壮骨颗粒治疗小儿汗证肺脾气虚证(维生素D缺乏性佝偻病早期)疗效确切,且临床应用安全性较好。