摘要：目的了解我国肝、肾移植受者生理和心理健康状况，为卫生管理机构和移植中心建立受者健康管理体系提供依据。方法本研究为全国范围的横断面调查。调查对象为北京、上海、广州等9个地区的392例肝、肾移植受者。采用面对面访谈，问卷问题设计参考WHO生活质量量表（QOL—BREF）及肾脏疾病生活质量简表（KDQOL—SF）。调查内容主要包括：一般人口学信息，过去4周内的生活质量、健康状况及其影响因素，心理状况，受者需求和满意度调查等。结果392例移植受者中，肝移植受者151例，肾移植受者241例。调研结果提示：（1）生活质量调查中，回答“很好”和“好”的受者比例为62．24％，年龄对移植受者生活质量的影响具有统计学意义（X2=6．60，P〈0．05）。（2）健康状况调查中，回答“很好”和“好”的比例占69．39％。移植受者的性别、年龄、移植手术后时间、医疗保障和工作状态5个因素对移植受者的健康状况无显著影响，差异均无统计学意义（X2=0．33、3．41、1．85、0．44、0．68，均P〉0．05）。（3）心理状况调查中，长期处于负性心理状态的受者比例较少。结论我国现阶段多数肝、肾移植受者的健康状况及生活质量较好。但移植受者在生理、心理等方面的满意度与其心理预期还存在一定差距。

摘要：目的研究两组不同波长630 nm和810 nm窄带LED照射对体外高糖环境培养下的小鼠成纤维细胞增殖能力的影响。方法实验对象为小鼠成纤维细胞系(L929),以高糖DMEM培养基培养,每孔3 000个细胞接种于96孔板。根据不同波长分为两组分为630 nm LED组和810 nm LED组,每组再根据不同照射时间(0,100,200,500,1 000和2 000 s)分为6个小组,LED光照功率密度5 mW/cm^2,其中照射时间0 s为对照组,仅接种细胞但不进行光照处理。另设1个空白对照组,即不接种细胞不进行细胞照射。各组处理后24 h均采用CCK8法检测并计算成纤维细胞增殖率。每组设计6个复孔,每组实验重复3次取平均值。结果波长630 nm和810 nm窄带LED在功率密度为5 mW/cm^2,照射时间100~500 s时皆可促进成纤维细胞的增殖,且其促细胞增殖率随照射时间的延长而增加,照射时间达到500 s,能量密度2.5 J/cm^2时,即达到最佳增殖效果。照射时间增至1 000 s,细胞增殖率逐渐进入平台期;照射时间增至2 000 s时,细胞增殖率开始下降,但仍显著高于对照组(P0.05)。结论功率密度5 mW/cm^2,波长630 nm和810 nm窄带LED照射时间100~2 000 s均可促进高糖环境下成纤维细胞的增殖,能量密度2.5 J/cm^2时,细胞增殖作用显著,细胞增殖率不随照射时间的增加而无限增高。

摘要：采用Vero-76细胞系从临床样品小肠内容物中分离到1株猪流行性腹泻病毒(PEDV),通过RT-PCR进行了鉴定。针对PEDV,参照保守的M基因序列设计了特异性引物和探针,建立了针对PEDV特异性的实时荧光定量RT-PCR检测方法(PEDV-rRT-PCR)。所建立的方法特异性强,与传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪细小病毒等猪主要病原体无交叉反应;方法灵敏度高,检测灵敏度达到重组质粒10-8稀释度(约20cop);重复性好,组内变异系数≤0.26%。20份田间样品检测结果表明,所建立的PEDV-rRTPCR方法快速、灵敏,检测结果准确可靠,适合用于PEDV的快速检测和流行病学调查。

摘要：针对现有牛病病原检测方法指标单一,操作复杂的现状,拟建立一种可高效检测牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎的基因芯片技术。根据已公布的各病原核酸序列,设计引物和探针。利用多重PCR方法扩增目的片段,扩增产物与探针特异性杂交,芯片反应显色后肉眼观察进行检测结果判定。优化反应条件、建立检测方法,同时对检测方法的灵敏度、可重复性、特异性、保存期等进行评价。结果显示,该基因芯片检测方法单一病原灵敏度检测可达1.0×10^(-6) ng/μL,混合病原灵敏度检测可达1.4×10^(-5) ng/μL;各病原间无交叉反应,检测健康牛血清、组织,牛流行性热病毒也均无响应;针对同一阳性质控品,芯片重复率达100%。保存期试验表明,芯片在2～8℃至少可保存6个月。检测30份临床样本,结果与标准方法结果一致。实验建立的方法具有高通量、高灵敏度、高特异性等特点,可在3 h内完成同时对七种牛重要疫病的检测,在牛群疫病诊断、净化及流行病学调查等方面有良好的应用前景。

摘要：原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,设计特异性引物,采用PCR方法扩增RBD基因,扩增产物经双酶切(EcoRⅠ/XhoⅠ)后定向克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒pET-30a(+)-GP-RBD,转化BL21(DE3)感受态表达宿主菌,在不同条件下(时间、IPTG浓度、温度)诱导表达目的蛋白,并用His-Band N+柱进行亲和层析纯化;以纯化的重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western blot和IFA鉴定重组蛋白的反应原性及免疫原性。结果显示:PCR扩增到长度为453bp的RBD基因片段;构建的重组质粒pET-30a(+)-GP-RBD经双酶切后得到与目的片段长度相同的特异性条带,测序结果显示没有突变;转化产物在培养7h、终浓度为0.4mmol/L IPTG和37℃条件下能够充分诱导目的蛋白表达,得到相对分子质量为25 000的重组蛋白,主要以包涵体形式存在,BCA试剂盒产量测定,每升诱导的重组菌可纯化约20mg纯度较高的目的蛋白;Western blot检测证实重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白能同时被抗His标签的单抗和兔源多抗识别并发生特异性反应,证明重组蛋白有良好的反应原性;IFA鉴定证实所制备的兔源多抗能够特异性识别表达MARV GP蛋白的重组杆状病毒rBacmid-GP-VP40,证明重组蛋白具有良好的免疫原性。结果表明:成功表达、纯化了MARV GP RBD蛋白,并完成了兔源多抗的制备,为MARV亚单位疫苗的制备和抗原、抗体检测方法的建立奠定基础。

摘要：在油气集输系统中,采用机器学习技术与油气集输过程相结合的方式,进行集输系统的能耗预测研究。分析了集输过程主要耗能参数,定量化描述了各耗能参数与能耗之间的变化关系,研究建立耗能定量化预测大数据模型,实现了集输系统能用能定量化预测分析。以胜利油田A集输系统为例,对建立的模型进行了验证。结果表明:采用此方法可以大大降低建模难度,缩短设计周期,降低工作量,进而为油田集输方案的调整与节能优化运行提供合理的参考依据。

摘要：目的:探讨CYP17基因多态性与老年男性血性激素水平的关系。方法:83例正常男性平均年龄66.7岁,分为66.7岁组(47例),分别提取他们的血DNA标本。设计引物通过PCR技术扩增出包括CYP17基因多态位点的片段,用限制性内切酶MspA1Ⅰ进行酶切,确定出CYP17基因的3种基因型,即A1/A1、A1/A2、A2/A2,并经测序证实。同时测定血清中睾酮(T)和雌二醇(E2)水平。结果:3种基因型之间的T和E2水平差异均无显著性;年龄>66.7岁组与<66.7岁组比较,T和E2水平差异无显著性,但T/E2比值显著升高(P<0.05)。结论:CYP17基因的多态性并未使男性体内的性激素水平发生显著性差异,随着年龄增加,T水平虽有所下降,但T/E2比值却有显著增加,这可能与老年男性前列腺增生和前列腺癌的发生有密切关系。

摘要：[目的]分析肿瘤患者在入院时、住院期间及出院时的症状分布及患者日记管理工具在疾病管理中的可行性。[方法]选取全国17家医院的恶性肿瘤患者,向其发放患者日记,指导其如何填写,嘱其每日认真填写日记。通过第三方研究者问询获得并分析患者在住院时、住院期间及出院时的相关症状,通过患者对日记满意度调查与主管医生对日记认可度调查分析患者日记工具的可行性。[结果]共纳入符合要求的152例患者,调查发现肿瘤患者入院时排名前10位的症状分别是疲乏、食量下降(近1周)、疼痛、体重下降(近1个月)、睡眠不好、厌食、胸闷气短、便秘、咳嗽咳痰和心情郁闷;住院期间排名前10位的症状分别是便秘、恶心呕吐、厌食、食量下降(近1周)、腹胀、疼痛、睡眠不好、疲乏、腹泻和发热。出院时排名10位的症状分别是疲乏、便秘、睡眠不好、胸闷气短、疼痛、咳嗽咳痰、厌食、出汗、小便减少、心情郁闷。肿瘤疾病分期为Ⅳ期的患者,入院时的症状患病率明显高于非Ⅳ期患者。绝大部分患者(91.4%,139/152)认可患者日记,认为该患者日记能帮助医生更好的了解自己,65.1%(99/152)的患者表示自己出院后会继续填写该日记内容,82.2%(125/152)的患者表示填写日记不会造成负担。绝大部分主管医生(77.6%,118/152)认为患者日记设计合理,77.0%(117/152)的主管医生认可患者日记并愿意继续使用,75.7%(115/152)的主管医生认为患者日记实用性很强,72.4%(104/152)主管医生认为患者日记能够帮助自己全面了解患者症状,64.4%(98/152)的主管医生认为患者日记能够提高查房效率。[结论]Ⅳ期肿瘤患者相关症状发生率明显高于非Ⅳ期患者,需重点监测和管理。肿瘤患者临床症状在住院期间部分会得以改善,但治疗相关的不良反应使出院时症状又有升高,需要主管医生引起重视并加强出院后随访及症状管理。患者日记工具能够使患者重视肿瘤所有相关的症状的监测,能提高医护工作人员的查房效率,有助于患者及家属在出院后的疾病全程相关症状管理,值得进一步临床研究及使用。

摘要：2005年是中国承诺碳减排目标的基准年份,因而也是中国城市碳减排战略制定和近中期低碳转型的基准年份和对照年份。中国城市2005年CO_2排放数据的一致性、全面性和精准性对于中国所有城市和每个具体城市的目标考核和评估都有重要意义。基于中国高空间分辨率网格数据(CHRED 2.0)、城市层面统计数据以及大量现场调研和走访,建立2005年中国城市CO_2排放数据集,包括工业能源排放、工业过程排放、农业排放、服务业排放、城镇生活排放、农村生活排放、交通排放7个部门的直接排放数据和间接排放数据。该数据集的建立汇总了86名研究人员的工作成果,在企业、城市不同行业与部门、城市工业和城市总化石能源等不同层面进行了大量的交叉验证和数据分析,有效保障了数据的精确性和准确性。结果显示,2005年中国城市碳排放呈现出较大的体量差异和空间格局差异。排放前10的城市几乎比排放后10的城市的排放量高出两个数量级。高排放城市基本都是城市群的核心城市。东部城市直接排放占全国直接排放比例最高,达到44.59%,其次是西部城市21.76%,中部城市22.70%,东北城市10.95%。