摘要：随着城市化进程的加快以及极端天气的频发，城市内涝现象日益严重。本文以大连市片区为研究区域，应用SWMMI具，结合ArcGIS，对其排水系统进行了模拟计算，研究分析了城市化对原有排水系统的影响，并提出应用了优化制动阀的改造措施。结果表明，城市扩张增加了汇水区的径流总量和老管网的排水负荷；优化制动阀能够通过控制上游管网中的水流，从而对下游管网中的水流起到错峰的作用，可作为防洪除涝的辅助措施。本文研究为城市排水系统规划设计和城市防洪排涝提供了理论依据和指导。

摘要：为探讨羊痘病毒感染后机体的凋亡细胞因子mRNA表达水平的变化,深入探讨羊痘病毒免疫机制,本研究设计针对羊凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1和TNF-α特异性引物,建立羊凋亡细胞因子实时荧光定量方法。分别建立荧光定量PCR反应体系并进行优化。结果表明:Fas、FasL、TNFR1和TNF-α的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR各基因的溶解曲线均呈单一溶解峰。组内变异系数均小于2.00%。本研究建立的羊凋亡细胞因子SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法为凋亡细胞因子mRNA表达水平提供了技术平台。

摘要：探讨高校护生对社区卫生服务的认知、参与态度及对在社区参与中提升自身能力的需求。加强高校与社区卫生服务中心合作,为培养高水平、实用型创新型社区护理人才提供依据,推动社区卫生服务及社区护理教育的发展。本文采取分层随机抽样法,采用自行设计的问卷对武汉市某高校229名护生进行调查。55.5%的护生对社区卫生服务不了解,护生对社区服务的认识46.3%来自教学课堂;88.2%的护生愿意成为社区卫生服务的志愿者,护生认为最想在社区提升自身能力排在前五位的依次是:对社区常见急症、创伤和中毒的现场救助能力,对儿童的计划免疫和预防接种知识的宣教和实际操作能力,对患者进行健康教育的能力,团队协作的能力,对社区老年人健康保健的护理能力。依托社区卫生服务中心,鼓励高校护生与社区卫生服务中心互动,重视社区护理教育的发展,提高护生的综合能力,培养实用型创新型社区护理人才。

摘要：根据GenBank羊炎性细胞因子(IL-1β和IL-8)和Mx1保守序列,设计特异性引物,利用SYBR Green I染料法建立实时荧光定量检测方法。将羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子基因保守区域克隆到pMD18-T载体,构建标准质粒。分别以标准质粒为模板建立荧光定量PCR反应的标准曲线、熔解曲线。结果表明,羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子实时荧光定量检测方法Ct值与标准品呈良好的线性关系,R^2均大于0.990,所有稀释度标准品模板出现特异性熔解峰。应用所建立的方法对山羊痘病毒AV41感染山羊外周血淋巴细胞中IL-1β、IL-8和Mx1 mRNA表达水平进行检测,山羊痘病毒AV41可以刺激机体产生较高的炎性细胞因子。建立的羊IL-1β、IL-8和Mx1细胞因子荧光定量检测方法,可以为山羊痘病毒感染后分子免疫机制研究奠定基础。

摘要：针对扎伊尔型埃博拉病毒（Zaire Ebolavirus,ZEBOV）的糖蛋白（GP）基因（158-368aa）设计引物,将PCR扩增产物克隆至原核表达载体pET30a（＋）,在宿主菌BL21（DE3）中IPTG诱导表达。对诱导条件进行优化,纯化后的蛋白通过SDS-PAGE和Western blot鉴定正确后免疫BALB/c小鼠,二免后分离小鼠血清,制备多克隆抗体并进行间接免疫荧光鉴定。结果显示,埃博拉病毒GP在大肠杆菌中以包涵体的形式成功表达,蛋白最佳诱导条件为37℃,0.4mmol/L IPTG诱导6h。经间接免疫荧光鉴定多克隆抗体可以识别重组杆状病毒rBacmid-GP。本研究成功表达并纯化埃博拉病毒GP,制备鼠多克隆抗体,为建立基于ZEBOV GP的检测方法和相关研究奠定了基础。

摘要：原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,设计特异性引物,采用PCR方法扩增RBD基因,扩增产物经双酶切(EcoRⅠ/XhoⅠ)后定向克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒pET-30a(+)-GP-RBD,转化BL21(DE3)感受态表达宿主菌,在不同条件下(时间、IPTG浓度、温度)诱导表达目的蛋白,并用His-Band N+柱进行亲和层析纯化;以纯化的重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western blot和IFA鉴定重组蛋白的反应原性及免疫原性。结果显示:PCR扩增到长度为453bp的RBD基因片段;构建的重组质粒pET-30a(+)-GP-RBD经双酶切后得到与目的片段长度相同的特异性条带,测序结果显示没有突变;转化产物在培养7h、终浓度为0.4mmol/L IPTG和37℃条件下能够充分诱导目的蛋白表达,得到相对分子质量为25 000的重组蛋白,主要以包涵体形式存在,BCA试剂盒产量测定,每升诱导的重组菌可纯化约20mg纯度较高的目的蛋白;Western blot检测证实重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白能同时被抗His标签的单抗和兔源多抗识别并发生特异性反应,证明重组蛋白有良好的反应原性;IFA鉴定证实所制备的兔源多抗能够特异性识别表达MARV GP蛋白的重组杆状病毒rBacmid-GP-VP40,证明重组蛋白具有良好的免疫原性。结果表明:成功表达、纯化了MARV GP RBD蛋白,并完成了兔源多抗的制备,为MARV亚单位疫苗的制备和抗原、抗体检测方法的建立奠定基础。

摘要：沙柳(Salix psammophila)是内蒙古西部荒漠化地区的主要造林树种之一。文章对15 a林龄沙柳经过1次、2次、3次平茬和未平茬人工沙柳生物量进行研究的基础上,分析了沙柳生物量与丛高、冠幅、基径、枝条基部粗度、基部分枝数、单枝最大分枝数、单枝最大芽眼数的关系。研究结果如下:(1)随着平茬次数的增加,沙柳生物量也在增加,丘间低地沙埋区的沙柳生物量高于丘间低地未沙埋和迎风坡风蚀区的生物量。(2)从各生长因子与生物量的相关系数来看,基部分枝数>枝条基部粗度>基径>冠幅>单枝最大芽眼数>丛高>单枝最大分枝数。沙埋能够明显增加15 a林龄沙柳的冠幅、基径、基部分枝数。(3)随着沙柳基部分枝数增加,沙柳生物量明显增加,沙柳生物量与基部分枝数的关系方程为y=0.020 4x1.052 8(R2=0.669 8)。通过本研究,可以为我国西部地区开展人工沙柳林产量和生产力估算以及碳汇能力的计量打下良好的基础。

摘要：运用数值计算，研究铝电解槽壳垂直平板肋的稳态自然对流与表面辐射的耦合传热模型，求解肋板的温度分布、散热量等参数，对肋板性能进行分析，并进行现场实测检验·设计的数值计算程序能简单、精确、快速地计算电解槽垂直平板肋的散热量，程序计算所得结果比原来算法所得结果包含更多的信息量．

摘要：目的探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562粒系分化的影响。方法针对CIAPIN1基因设计并构建短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,转染K562细胞并作为干扰组,以无关序列shRNA处理的K562细胞作为对照组。采用Real-time PCR及Western blot技术鉴定干扰效率;采用瑞氏染色和电镜分别观测K562细胞形态学和超微结构的改变;采用Real-time PCR方法检测粒系分化标志基因中性粒细胞胞浆因子1(NCF1)、血清黏蛋白1(ORM1)以及粒系分化转录因子CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBPα)、低氧诱导因子1α(HIF1α)mRNA水平的改变;流式细胞术检测K562细胞表面分化抗原CD11b表达的改变;Western blot技术检测ERK1/2、JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果与对照组相比,干扰组的CIAPIN1基因表达被有效抑制(P<0.05);K562细胞的形态和超微结构趋向成熟粒细胞阶段;NCF1、ORM1、C/EBPα及HIF1αmRNA表达水平升高(P<0.05);CD11b表达升高(P<0.01);ERK1/2磷酸化水平升高(P<0.05),而JNK、p38MAPK及Akt磷酸化水平未见明显改变。结论抑制CIAPIN1基因表达能促进K562细胞向成熟的粒细胞阶段分化,ERK1/2磷酸化水平的升高可能参与了该分化过程。

摘要：为了解正丁醛在还原反萃分离铀、钚、镎过程中的作用 ,以正丁醛为还原剂 ,进行了硝酸水溶液反萃含U(Ⅵ )、Np(Ⅵ )或U(Ⅵ )、Np(Ⅵ )、Pu(Ⅳ )的TBP/煤油中Np的实验研究 ,测定了串级实验时Np在各萃取器中的分布 ,讨论了正丁醛、镎、铀、硝酸浓度、相比等对镎在萃取器中分布的影响。单级实验结果表明 ,正丁醛的加入和延长正丁醛与镎的相互作用时间 ,有利于从有机相中反萃镎 ;正丁醛的加入对铀、钚分配比的影响不大 ;但铀浓度增加会增加镎的反萃。串级实验结果表明 ,镎在 1BP中的比例小于 10 % ;第二级加入正丁醛时 ,正丁醛和镎在各级的分布较合理 ,能兼顾镎的去污与反萃。为了减少铀的损失 ,需要采用较高的硝酸浓度 ;在 1BW中出现少量白色沉淀。