摘要：目的应用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制自噬调控基因Beclin 1的表达,检测Beclin 1表达对mTOR、ULK1、LC3-B的表达以及对HCT116细胞株增殖与凋亡的影响。方法设计4条针对Beclin 1基因的干扰RNA表达载体及阴性对照载体分别瞬时转染HCT116细胞。采用RT-PCR及Western blot法筛选出1条抑制率最高的Beclin 1干扰序列后,瞬时转染HCT116细胞,检测mTOR、ULK1及LC3-B的mRNA及蛋白表达,CCK-8实验检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 (1)转染细胞后,BECN1-1245组mRNA及蛋白抑制率最高,达80%。(2)RT-PCR结果显示,BECN1-1245组转染细胞48 h后,与阴性对照组相比,ULK1与LC3-B mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(P≤0.05),mTOR在两组中的表达无差异(P>0.05),Western blot法检测结果与之相同。(3)CCK-8细胞增殖实验显示,BECN1-1245组转染24、48、72 h后,细胞生存率较阴性对照组明显降低(P≤0.05)。(4)流式细胞仪检测结果显示,BECN1-1245组转染48 h后,与阴性对照组细胞相比,细胞凋亡率明显升高(P≤0.05)。结论 Beclin 1在HCT116细胞自噬中发挥重要的调控作用,抑制Beclin 1的表达,可抑制细胞的自噬活性,并能抑制细胞增殖,促进其凋亡,推测Beclin 1基因可作为结肠癌治疗的新靶点。

摘要：近些年国内已经陆续修建了几座非整体式系杆葵花拱桥,但是结构和受力上还存在不够完善的地方。整体式预应力葵花拱桥对此进行了改进,通过设置整体式桥面板,并在桥面板设置有粘结预应力束代替系杆,具有自己独特的结构和受力特点。本文通过与非整体式系杆葵花拱桥比较,分析了整体式预应力葵花拱桥的特点:整体式桥面板,避免了设置多道伸缩缝,大大改善了行车的舒适度;整体式桥面板内布置高预应力值有粘结预应力束,既能起到系杆的作用,平衡结构的水平推力,同时可以很好地改善梁的受弯性能;桥梁结构为拱式刚架体系,结构受力复杂,但是具有很好的整体性能;增加了结构施工技术难度。以应城市富水河桥为例,利用有限元模型分析了桥梁结构的受力特点,提出该类桥梁设计时的关键控制截面。

摘要：MGF360-9L是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重要的毒力基因,本实验室前期使用免疫共沉淀和液相色谱-质谱(IP-MS)联合技术,明确了MGF360-9L和宿主蛋白自噬/苄氯素1调节因子1(autophagy/beclin-1 regulator 1,Ambra 1)具有相互作用,现有的研究已经证实宿主蛋白Ambra 1在病原感染中发挥重要作用。为明确Ambra 1介导MGF360-9L对ASFV复制的调控作用及其机制,本研究构建Ambra 1真核表达质粒,使用免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)和间接免疫荧光(indirect immunofluorescence assay,IFA)技术,验证了Ambra 1和MGF360-9L的互作及互作区域。设计并合成Ambra 1的RNA干扰(RNAi)序列,运用实时荧光定量PCR(real-time q PCR,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western-blot)技术,证明了Ambra 1过表达抑制ASFV的复制,下调Ambra 1的表达则能够促进ASFV的复制。此外也证明了Ambra 1剂量依赖性降解MGF360-9L蛋白。总之,本研究明确了宿主蛋白Ambra 1介导ASFV MGF360-9L抑制其复制的初步机制。该研究丰富了ASFV蛋白与宿主蛋白之间的互作调控网络,为进一步研究ASFV-宿主相互作用积累了数据。

摘要：智能卡与口令相结合的身份认证方式既可保留使用强密钥优势,又具有使用方便的特点,是一种理想的安全双因子认证方式。当前许多公开的口令认证方案,要么需要较强的计算环境而难于采用智能卡快速实现,要么不能抵抗离线口令猜测攻击或服务端内部攻击而存在安全缺陷。提出一种非平衡型口令认证方案,基于智能卡和用户口令双因子设计,具有简便高效、口令安全、双向认证特点,能够抵御离线口令猜测攻击和服务端内部攻击,可用于满足设备开机时的安全认证需求。

摘要：本文以非洲大陆扎伊尔克拉通铜钴矿床最新勘探资料为依据,对矿床的地层、构造、矿体特征、围岩蚀变等进行阐述,对矿床成因进行深入研究,根据多年勘探经验,确定该矿床的成因类型为沉积-热液型。

摘要：目的了解2008~2018年我国公众急救培训的现状及发展态势,为进一步规范公众急救培训及开展相关研究提供思路和指导。方法检索中国知网(CNKI)数据库在2008~2018年期间发表的与公众急救培训内容相关的文献,经过遴选后,运用文献计量学方法对上述文章进行定量分析。结果通过检索筛选最终纳入283篇有效文献,2008~2018年发文量呈逐年上升趋势,平均每年发表25.7篇,分别刊载于159种期刊,其中有47篇为核心期刊。发文作者相对集中在经济较发达地区,发文机构排名前5的分别是广东医科大学、首都医科大学、昆山市急救中心、南京医科大学和郑州大学。纳人的文献以类实验研究为主,占总文献的40.28%,283篇文献中,有42篇基金论文,占文献总数的14.8%;文献作者共1046人,文献合作度为3.70人;165篇培训对象为普通公众,占58.30%。对283篇文献分析发现,培训方法以传统集中培训法为主,排名前4位的是传统集中培训法、情景模拟教学法、PDCA循环法、分层次培训法。结论我国公众急救培训研究数量呈增长趋势,但系统规范的培训体系建设仍是薄弱环节,急救培训研究的文献整体质量不高,研究深度不足,培训方法单一,尚未形成统一的培训模式,培训内容缺乏设计,需开发多层次公众急救培训教材体系,公众急救培训研究仍有很大的提升空间。

摘要：矿区位于中国著名三江成矿带,构造位置上相当于昌宁—澜沧复背斜(Ⅲ1)构造单元褶皱带南延部份,为长期多旋回发展的优地槽褶皱带。成矿带内寻找与元古界中基性火山岩建造控制的海相火山—沉积变质型铁矿床有良好的找矿前景。

摘要：目的探讨斜视矫正术对术眼短期矫正视力及屈光状态的影响。设计前瞻性临床研究。研究对象北京同仁医院2013年12月-2017年8月间进行斜视矫正术治疗的斜视患者321例(475眼)。患者平均年龄(12.21±15.12)岁(年龄范围3~58岁)。方法根据斜视手术方式将术眼分为5组:1组为单条直肌后退术组(n=222),2组为单条直肌后退术联合单条直肌截除术组(n=93),3组为单条直肌后退联合单条直肌改良线状折叠术(n=99),4组为单条直肌后退联合单条斜肌后退术(n=37),5组为2条直肌手术联合单条斜肌后退术(n=24)。对术前及术后1个月患者的最佳矫正视力(BCVA)及等效球镜(SE)、散光度进行测量并比对分析(12岁以下患者为麻痹睫状肌验光)。主要指标 BCVA、SE及散光度。结果 5个组术前BCVA、SE及散光度组间比较无统计学差异(P=0.75、0.56、0.39)。术后1个月5个组间BCVA比较无统计学差异(P=0.29),术后1个月第5组SE为(-1.09±1.16)D,散光度为(1.39±2.05)D,较其他4组均大(P=0.02、0.01);5个组SE手术前后改变前4组无明显差异,第5组手术前为(-0.67±2.34)D,手术后为(-1.09±1.16)D,近视增加;5个组手术前散光度依次为(0.52±0.83)D、(0.74±0.52)D、(0.73±1.19)D、(0.61±1.67)D、(0.71±1.41)D,术后散光度依次为(0.81±0.88)D、(1.12±1.55) D、(1.14±2.30)D、(1.06±1.69)D、(1.39±2.05)D,均较术前增加(P均<0.01)。结论 5种手术方式对患者术后1个月手术眼的矫正视力无明显影响,对等效球镜影响较小,但会对散光度数有增加作用,其中3条肌肉手术眼较2条肌肉和1条肌肉手术眼变化更大。

摘要：基于镰孢菌ITS序列,设计一对应用于实时荧光定量PCR(Real-Time QPCR)反应的镰孢菌属特异性引物TS和TR,并建立了相应的Real-Time QPCR体系。应用该反应体系,绝对定量了无肥(NF)、化肥(NP)以及化肥配施有机肥(NPM)等3种施肥措施下大豆田土壤镰孢菌DNA含量。结果表明:引物TS和TR对镰孢菌属真菌有较好的特异性;Real-Time QPCR反应的扩增曲线中各梯度浓度标准品的循环阈值(Ct值)间隔均匀,熔点曲线无杂峰,标准曲线的相关系数R2=0.993,斜率为-0.2927;在大豆生育时期的苗期,NF、NP及NPM措施下土壤镰孢菌总DNA每克干土中含量分别为18.33、44.61和140.83 pg,且NPM措施含量极显著高于NF及NP措施(P<0.01)。

摘要：游客调查是旅游规划的基础和依据,国家森林公园因其生态旅游的开发属性,了解游客需求对于其规划和开发尤为关键。从游客行为分析、景点景区评价、旅游安排及消费、游客意见和建议、游客基本情况等几个方面对太白山国家森林公园进行了全面的游客调查,在深入分析调查结果的基础上,对游客关注的游客容量、游线设计、服务设施、解说系统等问题和公园的竞争策略和可持续发展等方面提出有针对性的规划建议。