摘要：根据GenBank登录的鸭疫里默氏杆菌外膜蛋白(OmpA)基因保守区序列,设计引物和探针,建立了直接检测鸭疫里默氏杆菌的实时荧光定量PCR快速方法。10倍梯度稀释RA菌株制备DNA模板测定方法的灵敏度,结果可在8.0×103CFU/mL浓度下特异地检测出目的菌,最低能检测到RA的DNA模板为8.0拷贝/μL;对鸭源大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌进行检测,结果均为阴性,建立的实时荧光定时PCR方法特异性强。用RA菌株人工感染雏鸭,感染后定时采集咽喉拭子、泄殖腔拭子、心血、肝脏、肺脏、脑,分别用实时荧光定量PCR检测,对脏器进行病原菌分离。结果表明,1/10半数致死量接种组,感染后8 h从心血、肝脏、脑组织检测到RA核酸,16 h后全部试样呈阳性;24 h首先从肝脏分离到RA,心血、肝脏、肺脏、脑组织均分离出RA。心血和脏器RA实时荧光定量PCR阳性检出率为63.8%(51/80),RA分离率为28.8%(23/80)。10个半数致死量接种组,1 h即可从咽喉拭子、心血和肝检测到RA核酸,5 h全部样品为阳性;5 h从肺和脑分离到RA。RA人工感染鸭的心血、肝脏、肺脏、脑实时荧光定量PCR阳性检出率为86.3%(69/80),RA分离率为60%(48/80)。用加热裂解法提取样品RA DNA只需30 min,建立的实时荧光定量PCR检测RA只需2 h,适用于RA的快速诊断、流行病学调查、种鸭引进隔离检疫、活鸭及其产品国内市场和进出口检验检疫。

摘要：根据GenBank公布的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ATCC VR-2332株GP5基因序列设计1对特异性引物,应用RT-PCR方法扩增PRRSV Hn/06-1分离株GP5基因片段.将扩增片段克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,测序后用DNAstar序列分析.构建的pcDNA-GP5重组质粒瞬时转染293T细胞,48 h后用Western-blot检测,证明GP5基因在293T细胞中获得了表达,可与PRRSV阳性血清发生特异性反应.

摘要：通过系统地研究γ干扰素-乙酰胆碱对家兔十二指肠肌电活动的协同作用规律,为探索IFN-γ影响十二指肠运动的作用机制及其临床应用提供参考依据。按正交试验设计分组,采用BL-420F生物机能试验系统实时监测不同剂量的IFN-γ联合乙酰胆碱对家兔十二指肠肌电活动的影响。在单因素IFN-γ的作用下,十二指肠肌电活动指数随着IFN-γ剂量的增加先升高后降低;而在氯化氨甲酰胆碱的作用下,随着IFN-γ剂量的增加,十二指肠肌电活动指数整体上呈现出逐渐下降的趋势,当且氯化氨甲酰胆碱的浓度越大,十二指肠肌电活动指数下降的幅度也越大。细胞因子IFN-γ可能是通过胆碱能神经这条途径发挥对十二指肠的调节作用,这是除经典内分泌调节、下丘脑-垂体-靶腺轴外,一种通过神经系统作用间接支配靶器官活动的神经传导作用模式。

摘要：以砀山酥梨脱病毒苗作为实验材料,应用正交设计研究了基本培养基、间苯三酚(PG)、IBA和NAA的不同组合对脱病毒苗瓶内直接生根的影响,并进行了瓶内生根培养方式的研究。结果表明:间苯三酚是影响砀山酥梨脱病毒苗瓶内生根的重要因子,瓶内直接生根的最佳培养基组合为ASH+80 mg/L PG+1 mg/L IBA+0.5 mg/LNAA。采用二步生根培养方式,脱病毒苗的综合生根效应优于直接培养生根方式,生根率高达87.5%。

摘要：简要介绍了铅芯隔震橡胶支座微分型恢复力模型的发展过程及其在隔震设计中的应用.基于两个不同规格支座的压剪试验,比较了不同屈服前刚度的微分型恢复力模型与实测结果差异,对隔震设计中铅芯隔震橡胶支座屈服前刚度的合理取值提出建议.

摘要：为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗,利用甲基营养型汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)系统表达戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)Ⅳ型结构区ORF2编码蛋白第112-607氨基酸片段。为实现目的基因在汉逊酵母中的高效表达,根据汉逊酵母偏爱密码子优化设计目的基因,用搭桥PCR法合成优化后的基因序列,并克隆到多拷贝表达载体上,转化汉逊酵母营养缺陷宿主菌ATCC26012(Ura3-),在选择培养基上培养,运用PCR法筛选得到携带外源基因的重组菌株,然后用含甲醇的培养基诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE、ELISA和Westernblot检测和鉴定。SDS-PAGE实验结果表明目的蛋白分子量约为56kD,表达量占菌体总蛋白的12%;ELISA检测结果表明表达产物为具有免疫反应性的HEVORF2蛋白,ELISA效价最高可达1∶2048,目的蛋白表达量随着基因拷贝数的增加呈升高的趋势;Westernblot鉴别实验结果证实表达产物与HEV多抗有特异性抗原抗体结合反应。HEV结构区ORF2蛋白在汉逊酵母中的成功表达,为研制基因工程戊型肝炎疫苗奠定了基础。

摘要：为探讨不同桩径、不同桩长的旋挖成孔嵌岩灌注桩在不同荷载水平下的荷载传递规律,基于印尼某燃煤电站桩基工程,在6根嵌岩桩桩身安装钢筋应力计进行单桩竖向抗压静载试验。试验结果表明:6根试桩的荷载—位移(Q-s)曲线均为缓变型,没有明显的陡降段,桩顶沉降与桩顶荷载呈非线性关系,回弹率介于37.6%~70.9%之间,残余沉降较小,承载力较高,均满足设计要求;桩身轴力随深度逐渐衰减;随桩顶荷载增加,桩侧摩阻力发挥表现出异步性,最大荷载作用下嵌岩段侧摩阻力达到峰值,6根试桩在嵌岩段的最大侧摩阻力介于136.2~166.4 kPa之间;桩端阻力随荷载水平的增加逐渐增大,在最大荷载作用下,桩径为800 mm的试桩长径比介于19.38~20.13,其桩端阻力分担荷载介于54.8%~55.2%,表现出摩擦端承桩的特性;桩径为600 mm的试桩长径比介于42.17~44.67,其桩端阻力分担的荷载介于30.9%~32.6%,侧摩阻力发挥主要作用,表现出端承摩擦桩特性。试验结果对印尼地区嵌岩灌注桩的应用具有重要意义。

摘要：随着嵌入式系统的发展,如何在嵌入式控制终端上实现不同根温、气温、CO2浓度下光饱和点的动态获取,成为设施农业发展的重要问题。以水培生菜为试验材料,设计多因子嵌套试验方案,基于随机森林算法建立面向嵌入式控制终端的光调控目标值模型,研究随机森林算法参数对模型的影响,并对模型进行验证分析。结果表明:该模型可实现基于嵌入式控制终端的光饱和点的动态获取,模型决定系数为0. 9955,均方根误差为5. 677,平均绝对误差为5. 3475,可为面向嵌入式系统的光环境高效精准调控提供理论依据。

摘要：竖井是深隧排水系统的重要组成部分,传统交错板竖井的水舌交替撞击井壁,易引起受力不平衡及不利振动。研究提出一种水舌对冲式交错板竖井,归纳出估算其基本参数的经验公式,通过实例设计及CFD模拟,分析了其流态特征、消能机理和效果,并总结了几点入流竖井设计基本原则,以期为今后竖井设计提供参考。结果表明:水舌对冲式交错板方案过流能力充足,正常运行下水流不堵塞通气孔,水舌对冲消能效果好,结构受力平衡;底部筛孔水垫相配合,保证竖井与主隧道水流衔接平稳;随着入流量减小,竖井消能率增大。

摘要：目的:建立UPLC-MS/MS法测定人血浆中非那雄胺的浓度,并用于非那雄胺片在中国健康男性受试者的生物等效性研究。方法:采用单中心、开放、单剂、双周期、随机、自身交叉设计,28例健康男性受试者口服1 mg非那雄胺片试验制剂或参比制剂分别进行空腹和餐后试验。采用UPLC-MS/MS法测定人血浆中的非那雄胺浓度;Win Non Lin 6.4软件,非房室模型法计算药动学参数,并进行生物等效性的判断。结果:非那雄胺在0.05~40 ng·m L-1线性良好,准确度、精密度、基质效应、回收率和稳定性符合相关要求。2种给药条件下,试验制剂AUC0~t,AUC0~∞和Cmax的90%置信区间均在参比制剂相应参数的80%~125%,2种制剂Tmax间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法能快速、准确测定非那雄胺在人血浆中的浓度,2种片剂生物等效。