摘要：目的调查维持性血液透析具有残余肾功能患者的流行病学特征;探讨影响残余肾功能的因素;研究残余肾功能评估生物学标志物;分析残余肾功能对远期预后的影响。方法维持性血液透析患者残余肾功能队列研究(Huashan Residual Kidney Function Cohort Study,HRKCS)是基于复旦大学附属华山医院门诊新入有残余肾功能维持性血液透析人群,具有医学数据库和生物样本资料的全样本前瞻性队列研究。2016年1月~2026年12月开展患者入组及随访。基线调查包括问卷访谈、体格检查、生化检测、残余肾功能检测和生物标本采集。随后对入组患者进行每3个月1次随访,采集透析、生化及转归数据。结果自2016年1月~2020年1月入组患者46名,平均年龄为(61±18)岁,男性占50%,起始透析频率2次/w占57%,该部分患者在平均1.2年随访期间,46%由2次/w透析逐步过渡到3次/w。所有患者初始尿素氮清除率为(3.37±2.16)ml/(min·1.73m^(2)),1年后的尿素氮清除率逐步下降至(1.81±2.05)ml/(min·1.73m^(2))(Z=-5.924,P<0.001)。所有患者第一年的透析并发症指标控制均稳定,在平均1.8年随访期间,死亡率为1.2/100人年,心血管事件发生率为8.5/100人年。结论维持性血液透析残余肾功能队列57%采用递增透析方案,残余肾功能下降速度延缓,并发症控制理想,全因死亡风险低。本研究将提供中国维持性血液透析残余肾功能相关数据资料及生物样本资源,为残余肾功能研究提供基础数据和决策依据。

摘要：目的基于SYRCLE 动物实验偏倚风险评估工具,对国内中医药领域发表的由国家自然科学基金资助的动物实验的方法学质量及其存在的问题进行回顾性分析,为后续研究的设计和实施提供参考依据,以促进国内动物实验研究质量的提升。方法计算机检索中国科学引文数据库,检索时间限定为2011-2016 年。由4 名研究者独立筛选和提取资料,并交叉核对。组间比较采用卡方检验,检验水准α=0.05。结果最终纳入971 篇研究,其中50.8%的研究被引次数为零,资助类型和学科中所占比例最高分别为面上项目(57.0%,553/971)和中医药领域H27(32%,316/971)。基于SYRCLE 工具的评价结果显示:超过一半的亚条目(68.2%,15/22)的“低风险”符合率低于60%,甚至其中73.3%(11/15)的亚条目的“低风险”符合率低于10%。此外,随着SYRCLE 工具的发布,大部分亚条目的“低风险”符合率并未得到提高(P>0.05)。结论国内中医药领域目前发表的由国家自然科学基金资助的动物实验的方法学质量较低,而且随着SYRCLE 动物试验偏倚风险评估工具的发布,其方法学质量并未得到改善和提高。

摘要：目的:建立检测人RORγt(retinoid-related orphan receptor gammat)mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:根据人RORγt mRNA的保守序列设计特异性引物,提取经PMA和离子霉素刺激的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,并逆转录成cDNA,与pMD-18T载体连接构建质粒标准品。采用qRT-PCR方法检测RORγt mRNA水平,并评价该方法的线性、特异性及重复性。应用该方法检测Graves病(Graves′disease,GD)患者外周血中RORγt mRNA的相对表达。结果:该方法标准曲线的相关系数为0.998,融解曲线分析显示单个峰,pMD18T-RORγt质粒标准品高、低拷贝数的批内、批间变异系数分别为6.5%,8.4%和9.6%,11.2%。初步研究表明GD患者组RORγt mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(t=-3.72,P<0.01)。结论:建立的检测人RORγt mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法灵敏、特异且重复性好,为临床应用提供了实验基础。

摘要：鉴于目前出现了多种亚型禽流感病毒共存的局面，研究多价流感疫苗具有重要意义。根据各表位的免疫学特性，结合分子生物学信息软件的模拟功能，以H3、H9亚型流感病毒的HA抗原表位、流感病毒的其他主要抗原（NP、NA、M）表位的基因为基础，再附以Kozak序列和适当的酶切位点，设计并合成大小为765bp的复合多表位基因盒-Epi。将Epi基因克隆入真核表达载体pIRES1neo中，构建DNA重组体pIR—Epi；将H7HA、Epi、H5HA基因以融合表达方式克隆到pIRES1neo中，构建了DNA重组体pIRE—H57一Epi。以上述构建的DNA重组体与鸡痘病毒重组株对BALB／c小鼠进行免疫接种后，检测体液与细胞免疫指标。研究结果表明，流感病毒复合多表位DNA重组体pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi免疫组小鼠均能产生针对H3亚型流感病毒的特异性抗体，抗体效价（1：1600～1：64003低于灭活疫苗免疫组（1：12800），但均高于其他对照免疫组（P〈0．01）。pIRE—H57-Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价分别为1：12800和1：6400，均高于其他免疫组（P〈0．05）。pIRE—Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价（1：200，1：100）较低，与其他对照免疫组差异不显著。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi免疫组抗H9亚型AIV的HA抗体效价（1：6400，1：3200）明显高于其他免疫组（P〈0．05）。与PBS对照组及空质粒pIRES1neo对照组比较，用所构建的重组体免疫的各试验组小鼠的T淋巴细胞亚类CD4^＋和CD8^＋的数量显著提高（P〈0．05）。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi试验组的CD4^＋与CD8^＋淋巴细胞的数量较灭活苗显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。此外，所有组的CD4^＋／CD8^＋比值均稳定在1．5～2．0，表明无异常免疫应答出现。ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN—γ斑点数实验结果表明，pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi试验组的IFN—γ斑点数量（〉70）比灭活苗（〈40）显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。上述结果说明，所构建的DNA重组体有良好的免疫原性，为最终获得能同时预防多种亚型流感病毒的多价疫苗奠定了基础。

摘要：目的:采用性状鉴别和聚合酶链式反应(PCR)技术对我国主要的海马养殖品膨腹海马Hippocampus abdominalis Leeson进行研究,为该品种鉴别技术开发提供数据支持。方法:通过查阅文献资料并结合样品统计观察,总结膨腹海马的性状鉴别特征;根据膨腹海马及其他海马的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列,筛选出膨腹海马的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计专属膨腹海马的引物PFHM-Primer-F和PFHM-Primer-R。通过优化PCR体系反应条件,考察最佳的PCR反应体系。结果:膨腹海马的核心性状特征主要包括有较多的体环、尾环和背鳍条数,背鳍覆盖4个体环+1个尾环;眼周和鳃盖部具有明显的大而黑的斑点等。基于COⅠ序列展开的PCR鉴别方法研究表明,当退火温度为65℃,循环30次时,膨腹海马样品在100~250 bp呈现单一明亮条带,而其他品种均无此条带。结论:建立的性状鉴别和特异性PCR鉴别方法可快速鉴别膨腹海马,为我国海马新资源的鉴别和后续开发提供参考。

摘要：目的针对临床上常见的由于重睑成形术失误所遗留的严重畸形，尤其表现为重睑线异常宽阔，上睑凹陷粘连并伴有眼轮匝肌下脂肪垫不足者，探索一种能有效改善外观畸形的简便方法。方法在原畸形的重睑切口线痕迹下设计新的重睑线，去除其间的多余皮肤，彻底松解眼睑内组织粘连，切除异常的瘢痕组织，将移位的眼睑结构彻底复位，分离眼轮匝肌下脂肪垫并将其形成蒂在上方的脂肪瓣，在不影响此脂肪瓣血运的前提下，将其向内下旋转达睑板上缘的合适位置固定，充填上睑的腔隙，若仍有残余空间，可以在进行确定重睑皱襞外形及缝合上下缘皮肤的操作后，行自体游离颗粒脂肪进行最后的补充。结果2年中对42例（共80只眼）重睑成形术后上睑粘连畸形进行治疗，其中32例为只应用眼轮匝肌下脂肪垫形成脂肪瓣充填矫正，10例另加颗粒脂肪注射补充，随访30例（共60只眼），外观改善显著，多数受术者十分满意。结论此方法简单易行，效果好，可在临床推广应用。

摘要：选择牛粪、羊粪、蔗渣、草炭、谷壳等农业废弃物为原料,掺入本土、江沙,以不同体积比设计7种基质配方,以筛选出最适合柠檬砧木枳壳苗生长的基质配方。研究结果表明:不同处理的基质配方对枳壳苗的生长有显著影响,其中M4(本土∶江沙∶草炭=4∶1∶1.5)和M5(本土∶江沙∶蔗渣=4∶1∶1.5)处理的枳壳苗地上部的生物量居前2位;M4处理的枳壳苗地径显著高于其他处理的,比对照(CK)高13.9%;M4和M5的株高分别达到70.49 cm和65.72 cm;M5处理的地下部生物量显著高于CK的,同时具有较大的根系体积、根尖数。综合考虑成本、效益,筛选出M5处理为枳壳苗繁育的最适基质配方。

摘要：本文采用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱(UPLC-MS/MS)建立槟榔壳中槟榔碱、槟榔次碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱、儿茶素和表儿茶素含量的检测方法。样品使用50%甲醇水提取,色谱条件:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 Column(1.8μm,2.1*100mm)色谱柱分离,以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,柱温38℃,流速0.4mL·min^(-1),进样体积2μL;质谱条件:喷射流电喷雾(AJS ESI)离子源,正离子模式多反应监测(MRM),外标法定量。在相应浓度范围内,槟榔碱、槟榔次碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱、儿茶素、表儿茶素的质量浓度与峰面积都呈现良好的线性关系(R^(2)>0.99);平均回收率为80.13%~106.22%,RSD为0.25%~3.55%。

摘要：目的观察有螺排灌沟使用黑色塑料地膜结合氯硝柳胺不同用量一次性喷洒与未覆盖近期灭螺效果。方法选择1条有螺排灌沟,分12段,覆盖6段分设氯硝柳胺0、2、4、6、8、10g/m2组。未覆盖6段分设空白对照,氯硝柳胺2、4、6、8、10g/m2组,试前各组按系统抽样法每组调查7框,捕获框内全部土表钉螺观察。调查后各组按设计用药量每m2加水1000ml配制喷洒,各组覆盖黑色塑料地膜。试后12个组1、2、3、5、7、10d按试前调查方法捕获钉螺观察,同时每天8、10、12、16、18时测环境气温覆盖与未覆盖土表、土内3cm、6cm、15cm处温度。结果覆盖组10:00-16:00土表温度最高,晴天维持在40oC62oC之间,土层内315cm深处均在22oC36oC之间,在盖膜10d内,无药组累计钉螺死亡率44.55%,,密度下降72.90%,加药各组死亡率为64.79%85.59%,密度下降率84.83%95.24%,未覆盖各组死亡率58.03%83.81%,密度下降率59.96%90.17%。结论黑色塑料地膜灭螺近期效果,喷药各组均比不喷药组钉螺死亡率和活螺平均密度下降率高,同时高于对应未覆盖各组,该方法省时、省工、操作简便,灭螺效果好,易检查考核,适合多种有螺环境灭螺,宜继续研究和推广应用。

摘要：为研究施氮量和种植密度对川西平原区粳稻产量及氮肥利用的影响,以德粳3号为材料,采用裂区试验设计,主区因素为4种施氮量,即N180—纯氮用量为180 kg·hm^(-2),N210—纯氮用量为210 kg·hm^(-2),N240—纯氮用量为240 kg·hm^(-2)和N0—纯氮用量为0 kg·hm^(-2);副区因素为种植密度,即行距×株距为25 cm×20 cm、25 cm×16 cm和25 cm×12 cm,分别记为D20、D16和D12;测定水稻齐穗期叶面积指数、SPAD值和净光合速率,齐穗期和成熟期干物质积累量,成熟期产量及产量构成因素指标。结果表明,与N180处理相比,N210和N240处理有效穗数分别增加4. 14%和12. 84%,产量分别提高8. 42%和10. 05%。施氮量从180 kg·hm^(-2)增加至240 kg·hm^(-2),齐穗期和成熟期干物质积累量逐渐增加,而水稻氮肥偏生产力均逐渐降低。N180和N210处理中,增加种植密度可以明显提高成熟期有效穗数和干物质积累量、籽粒产量和氮肥偏生产力。可见,川西平原粳稻种植推荐施氮量为180～210 kg·hm^(-2),种植密度为25 cm×(12～16) cm。