摘要：哺乳动物正呼肠孤病毒(MRV)是双链RNA病毒,可以感染自然宿主的哺乳动物和脊椎动物。为建立一种针对3型哺乳动物正呼肠孤病毒(MRV-3)的特异且快速的检测方法,本研究根据Genbank登录的MRV-3(OQ627746-OQ627755)S1基因保守区设计1对特异性引物,并从MRV-3中扩增S1基因,构建重组质粒p MD18-S1,经PCR和测序鉴定正确后作为质粒标准品,经反应体系及反应条件优化后首次初步建立了检测MRV-3的SYBR Green I荧光定量PCR(q PCR)方法。将质粒标准品10倍倍比稀释后作为模板经该q PCR扩增,建立标准曲线,结果显示,质粒标准品在1.3×10^(8)拷贝/μL~1.3×10^(3)拷贝/μL与各自的Ct值均呈良好的线性关系,斜率为-3.1706,R^(2)为0.9999,熔解曲线为单峰。以牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛肠道病毒(BEV)、水牛匈爱病毒(Buf Hu V)、牛冠状病毒(BCo V)、牛细小病毒(BPV)和MRV-3的基因组DNA/c DNA为模板,利用本研究建立的q PCR方法检测,评估该方法的特异性;将质粒标准品10倍倍比稀释至1.3×10^(2)拷贝/μL~1.3×10^(8)拷贝/μL后作为模板,分别利用本研究建立的q PCR和常规PCR检测,比较两种方法的检测结果,评估本研究建立q PCR方法的敏感性;以1.3×10^(3)拷贝/μL~1.3×10^(7)拷贝/μL 5个不同浓度的质粒标准品为模板,利用该方法分别进行批内和批间的重复性试验,评估该方法的重复性。结果显示,该方法只能检测出MRV-3,其他相关病原的检测结果均为阴性;该q PCR对质粒标准品的检测限为1.3×10^(3)拷贝/μL,比常规PCR敏感性高10 000倍;批内和批间重复性试验的变异系数均小于或等于1.0%,表明该q PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好。利用该方法检测220份牛粪便样品,结果显示MRV-3的检出率(3.64%,8/220)高于常规PCR的检出率(1.36%,3/220),两种检测方法的阳性符合率达100%,阴性符合率为97.75%,总符合率为97.78%。综上所述,本研究首次建立的检测MRV-3的SYBR Green I q PCR方法可以用于临床牛腹泻病原的检测,为MRV-3尤其是牛源MRV-3提供了一种快速灵敏的检测手段,也为MRV-3的后续研究奠定了基础。

摘要：目的研究小春花根黄酮提取工艺及其抗油脂氧化活性。方法以总黄酮提取率为考察指标,利用单因素试验结合响应面Box-Benhnken试验设计方法,研究乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素对提取工艺的影响,优化小春花根黄酮提取工艺;通过烘箱热贮藏实验研究小春花根黄酮对油脂的抗氧化作用。结果影响小春花根总黄酮提取的因素依次为:超声提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,小春花根总黄酮最佳工艺条件为:乙醇体积分数73%,料液比1:43(g/mL),提取时间73 min,提取温度71℃。黄酮提取得率为3.4299 mg/g,与理论预测值3.4913 mg/g接近。抗氧化活性分析表明,黄酮提取物有较强抗油脂氧化活性;对油脂的抗氧化能力与黄酮提取物浓度成正相关,1 mg/mL黄酮提取物与VC的抗氧化作用相当。结论小春花根黄酮对油脂良好的保护效果,在油脂抗氧化添加剂的应用方面具有潜在的开发价值。

摘要：目的了解安徽省成年人血脂异常流行水平,为制定血脂异常防治卫生政策提供依据。方法利用2013年中国成年人慢性病及其危险因素监测项目中安徽省的调查数据,采用多阶段整群随机抽样方法,以面对面询问方式收集调查对象的相关信息,采集空腹静脉血,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),并使用事后分层权重调整和复杂抽样设计方法进行统计分析。结果有效样本量为7120人,成年人血脂异常患病率为29.56%,其中男性为34.91%,女性为24.26%,男性血脂异常率随年龄增加而降低(χ2=13.907,P=0.000),女性则随年龄增加而增加(χ2=73.366,P=0.000)。血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平分别为4.53、1.43、2.73和1.39 mmol/L,男性血清TG和HDL-C水平与文化程度分别呈正相关和负相关(t=5.938,P=0.000;t=-12.641,P=0.000),女性血清TC、TG和LDL-C水平均随年龄增长而增加(t=10.060,P=0.000;t=12.531,P=0.000;t=8.058,P=0.000),不同职业间4种指标差异均有统计学意义。高TC血症、高TG血症、高LDL-C血症和低HDL-C血症患病率分别为5.14%、12.36%、5.18%和16.94%,高TC、高LDL-C和低HDL-C血症患病率随年龄增加而升高(χ2=13.631,P=0.000;χ2=14.684,P=0.000;χ2=8.893,P=0.003),男性高TG和低HDL-C血症患病率与文化程度呈正相关(χ2=40.386,P=0.000;χ2=70.480,P=0.000),不同职业间的高LDL-C血症和低HDL-C血症患病率差异有统计学意义(χ2=28.783,P=0.000;χ2=14.687,P=0.040)。结论血脂异常是安徽省成年人居民中常见的健康危险因素,应根据血脂异常的年龄、性别、文化程度和职业等差异实施针对性的防控措施。

摘要：静电式空气过滤器以其低风阻、可清洗重复使用、可杀灭微生物等优点,广泛应用于净化家居、办公空气环境。一般通风用空气过滤器现行有效的评价标准为ISO 16890-2016、ASHRAE52.2-2017和GB/T 14295-2019。静电式空气过滤器由于其技术特点,不完全适用于上述3项标准。分析表明,上述3项标准可有效评价静电式空气过滤器阻力、计数效率两项指标,但是不适用于评价静电式空气过滤器容尘量。ISO 16890-2016与GB/T 14295-2019两项标准产品评级方法适用于静电式空气过滤器,而ASHRAE 52.2-2017评级方法不适用于静电式空气过滤器。建议应依据静电式空气过滤器容尘特性,以过滤器电流变化或过滤器效率变化为判据,制定适宜的容尘量评价方法。以期能够更好的规范静电式空气过滤器研发、设计、生产与使用,保障人民生产、生活健康安全。

摘要：目的研究氨氯地平联合依那普利/叶酸片对H型高血压颈动脉粥样硬化的临床疗效,并观察其对患者血清同型半胱氨酸(Hcy)、胱抑素(Cyst-C)、尿酸(UA)水平的影响。方法选取2016年12月至2018年12月于我院治疗的H型高血压颈动脉粥样硬化患者90例,在患者自愿基础上采用非随机对照试验设计分组,最终纳入80例患者,分为观察组(40例)与对照组(40例)。在给予入院一般处理的基础上,对照组给予氨氯地平治疗方案,观察组给予氨氯地平与依那普利叶酸片联合治疗方案,两组患者均进行6个月的治疗。比较两组患者治疗有效率、血压水平、颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)、血清指标及不良反应发生情况。结果观察组治疗有效率高于对照组(P0.05)。治疗期间,观察组与对照组不良反应发生率分别为15.00%、12.50%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论氨氯地平联合依那普利/叶酸片治疗H型高血压颈动脉粥样硬化疗效良好,可改善血压水平,缓解动脉粥样硬化,且不良反应少。

摘要：目的了解我国手术部位感染管理现状,为制定手术部位感染防控措施提供依据。方法课题组设计手术部位感染管理调查表,中国医院协会医院感染管理专业委员会于2016年3月-6月抽取东部、中部、西部14个省的省级、地市级、县级医院,发放收集调查表并反馈至课题组进行统计分析。结果在所调查的199所医院中,87.63%的医院开展了手术部位感染目标性监测,61.30%的医院通过信息化预警发现手术部位感染疑似病例,38.69%的医院院感系统与手麻系统实现了对接,在手术区皮肤准备方面,使用刀片刮除、化学脱毛法、电动剪毛、常规不去除毛发的医院分别占63.31%、11.56%、4.52%、3.51%,使用碘伏、碘酒-酒精、氯己定消毒手术区皮肤的医院分别占71.35%、15.07%、2.51%,腹腔镜镜头灭菌方式的选择上,使用过氧化氢等离子体低温灭菌、化学浸泡的医院分别占86.94%、23.62%。结论我国手术部位感染防控能力逐渐增强,手术部位感染监测及信息化发展迅速,但手术部位感染防控措施落实方面尚存在较多问题急需改进。

摘要：利用在剪力墙多垂直杆非线性单元模型中增设支撑斜杆的方法,来分析带暗支撑剪力墙结构的非线性地震反应,给出了带支撑斜杆的多垂直杆剪力墙单元模型的刚度矩阵和各元件的本构关系。最后提供了算例,并与试验结果比较,表明带支撑斜杆的多垂直杆剪力墙非线性单元模型具有较好的计算精度。

摘要：目的:构建CYP1A2基因高表达载体,转染到L02肝细胞,建立CYP1A2高表达细胞株并检测三氯乙烯对该细胞株凋亡基因和癌基因的影响。方法:根据GenBank提供的CYP1A2基因cDNA序列设计引物,PCR扩增该基因并将其克隆到慢病毒高表达载体pLVX-acGFP1-C1中,将已经构建的慢病毒载体对293FT细胞进行转染,收集病毒上清,感染正常L02肝细胞。用嘌呤霉素进行筛选得到CYP1A2高表达L02细胞株,通过荧光定量PCR和Westernblot对细胞株进行鉴定。用不同剂量三氯乙烯对正常L02肝细胞和CYP1A2高表达细胞进行染毒12h,采用PCR方法检测凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、c-myc、K-ras、p53)mRNA表达的变化。结果:测序证明重组慢病毒高表达载体CYP1A2基因序列与GenBank提供的CYP1A2序列一致,荧光定量PCR检测显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2mRNA表达比正常L02肝细胞提高317倍,Westernblot结果显示CYP1A2高表达细胞株CYP1A2蛋白表达水平比正常L02肝细胞高3.41倍。三氯乙烯染毒后,CYP1A2高表达细胞中凋亡基因Bcl-2mRNA表达水平与正常肝细胞无显著性差异(P>0.05),而Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9mRNA表达水平高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。CYP1A2高表达细胞中癌基因c-myc和p53mRNA表达水平低于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01),而c-fos和K-rasmRNA则高于正常肝细胞(P<0.05或P<0.01)。结论:三氯乙烯对CYP1A2高表达细胞凋亡基因和癌基因表达有显著影响,提示CYP1A2是三氯乙烯在体内代谢的重要因素,与三氯乙烯毒性存在一定关系。

摘要：目的运用降落聚合酶链反应(touchdown PCR,TD-PCR)技术快速从腹泻、手足口病人粪便标本中同时检测诺如病毒(Norovius,NV)、肠道病毒71型(Enterovirus 71 EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus,CoxA16),并评价该技术用于检测这3种病毒的效能和敏感性。结论根据touchdown PCR原理设计TD-PCR程序,试验选择最佳反应条件,与普通PCR扩增效果进行评价。用10倍稀释检验TD-PCR方法的灵敏度,并用轮状病毒、札幌病毒、星状病毒、伤寒杆菌、小肠结肠炎耶尔森菌、香港海鸥形菌检测该方法的特异性。结果 TD-PCR能在一个反应条件下同时检测NV、EV71和CoxA16,扩增片段条带清晰,检测效果明显优于普通PCR,测序证实了3组片段的特异性,3种病毒cDNA的最低检测浓度分别为4.775μg/ml、2.360μg/ml、43.273μg/ml。检测该方法特异性时,其他病原体未见特异性条带扩增。结论成功建立的TD-PCR方法可同时检测腹泻和手足口病人粪便中NV、EV71和CoxA163种病毒,为快速检测相关病原体、科学防治腹泻和手足口病疫情暴发提供了可靠手段。

摘要：群体药动学/药效学研究以及基于此之上的量效关系研究已成为新药研发与监管的工具与重要组成部分。将其有机地嵌入新药研发和评审过程中,将能够使研发和评审更为高效,并回答一些传统药动学/药效学无法回答的问题。作为专家共识,本文对群体药动学/药效学研究在新药研发与评审中的应用、试验设计、模型分析方法、分析结果的质量控制与研究报告内容进行了论述。作者们期望本文能为群体药动学/药效学研究在我国新药研发中的应用提供积极有益的参考。