摘要：目的分析一家系2例远端型遗传性运动神经病(distal hereditary motor neuropathy,dHMN)患者临床特征,探讨牛痘相关激酶1(vaccinia-related kinase 1,VRK1)基因突变情况。方法收集一家系2例dHMN患者临床资料。采集先证者及其父母、女儿外周血,提取基因组DNA,进行全外显子组测序及生物信息学分析,采用Sanger测序进行验证。结果先证者双下肢肌萎缩并逐渐加重,感觉无异常。先证者弟弟有类似症状及体征,父母及女儿无相关症状及体征。先证者存在VRK1基因c.1124G>A位点纯合突变;先证者父母及其女儿均存在VRK1基因c.1124G>A位点杂合突变;先证者弟弟未行全外显子组测序及Sanger测序。该突变为已报道致病性突变;该突变使VRK1蛋白C端第375位色氨酸变为终止密码子(p.W375X),导致VRK1蛋白部分功能缺失,为无义突变。结论VRK1基因c.1124G>A(p.W375X)位点纯合突变可能是该家系2例dHMN患者的致病原因;VRK1基因突变导致dHMN患者的临床表型存在异质性。

摘要：参照已发表的主要表面蛋白5(MSP5)基因的核苷酸序列,设计了一对特异性引物,以边缘无浆体基因组DNA为模版,采用PCR技术扩增获得了MSP5基因;将其克隆到pGEM-T Easy载体,并进行测序分析,结果表明,克隆的MSP5基因与GenBank上登录的Florida株MSP5基因的序列同源性达98.6%,编码氨基酸的同源性为99%,并且该序列包含有完整的开放阅读框,大小为633 bp。将该基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建了重组原核表达载体。将其转化到DH5α宿主菌中,用IPTG进行诱导表达,实现了融合表达,表达产物的分子质量为45 ku。Western blot分析表明,此表达产物能够被抗边缘无浆体阳性血清所识别。通过裂解、洗涤、变性、复性等方法对包涵体蛋白进行处理,获得的纯化产物浓度为1 mg/mL。

摘要：目的研究小春花根黄酮提取工艺及其抗油脂氧化活性。方法以总黄酮提取率为考察指标,利用单因素试验结合响应面Box-Benhnken试验设计方法,研究乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度4个因素对提取工艺的影响,优化小春花根黄酮提取工艺;通过烘箱热贮藏实验研究小春花根黄酮对油脂的抗氧化作用。结果影响小春花根总黄酮提取的因素依次为:超声提取温度>乙醇浓度>提取时间>料液比,小春花根总黄酮最佳工艺条件为:乙醇体积分数73%,料液比1:43(g/mL),提取时间73 min,提取温度71℃。黄酮提取得率为3.4299 mg/g,与理论预测值3.4913 mg/g接近。抗氧化活性分析表明,黄酮提取物有较强抗油脂氧化活性;对油脂的抗氧化能力与黄酮提取物浓度成正相关,1 mg/mL黄酮提取物与VC的抗氧化作用相当。结论小春花根黄酮对油脂良好的保护效果,在油脂抗氧化添加剂的应用方面具有潜在的开发价值。

摘要：针对现有牛病病原检测方法指标单一,操作复杂的现状,拟建立一种可高效检测牛布鲁氏菌病、结核、炭疽、口蹄疫、病毒性腹泻黏膜病、副流感、传染性鼻气管炎的基因芯片技术。根据已公布的各病原核酸序列,设计引物和探针。利用多重PCR方法扩增目的片段,扩增产物与探针特异性杂交,芯片反应显色后肉眼观察进行检测结果判定。优化反应条件、建立检测方法,同时对检测方法的灵敏度、可重复性、特异性、保存期等进行评价。结果显示,该基因芯片检测方法单一病原灵敏度检测可达1.0×10^(-6) ng/μL,混合病原灵敏度检测可达1.4×10^(-5) ng/μL;各病原间无交叉反应,检测健康牛血清、组织,牛流行性热病毒也均无响应;针对同一阳性质控品,芯片重复率达100%。保存期试验表明,芯片在2～8℃至少可保存6个月。检测30份临床样本,结果与标准方法结果一致。实验建立的方法具有高通量、高灵敏度、高特异性等特点,可在3 h内完成同时对七种牛重要疫病的检测,在牛群疫病诊断、净化及流行病学调查等方面有良好的应用前景。

摘要：设计并合成了一种未曾报道的胡椒醛-罗丹明B衍生物荧光探针,并将其用于识别金属铜离子。研究表明,在pH为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,在乙腈/水的溶液体系中,探针为无色且无明显荧光强度;Cu2+的加入使得探针螺环打开体系共轭增加,溶液由无色变为粉色,且在578 nm处出现强的荧光响应,说明该探针可识别Cu^(2+)。相同条件下,通过与多种金属离子对比,发现该探针对Cu2+识别具有高选择性。在0~2.8μmol/L范围内,Cu^(2+)浓度与荧光强度呈现良好的线性关系。

摘要：目的探讨云南普通人群女性阴道微生态异常中细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)、滴虫性阴道炎(trichomonas vaginitis,TV)、外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)、阴道清洁度降低(Ⅲ~Ⅳ)、pH值升高(pH>4.5)与高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)感染的相关性。方法采用横断面研究设计,研究对象招募于云南省新平县年龄为20~65岁的普通女性人群。纳入者按HR—HPV感染情况分组,组间率比较采用r检验,单因素分析采用logistic回归,进而分析上述阴道微生态异常与HR—HPV感染的相关性。结果入组研究对象HR—HPV阳性率为5.7%(28/491),BV、TV、VVC、清洁度Ⅲ~Ⅳ及pH值>4.5在HR—HPV阳性组中的发生率分别为28.6%(8/28)、10.7%(3/28)、10.7%(3/28)、21.4%(6,28)、78.6%(22/28);在HR—HPV阴性组中发生率分别为16.4%(76/463)、0.6%(3/463)、15.3%(71/463)、7.1%(33/463)和58.5%(271,463)。TV、清洁度Ⅲ~Ⅳ、pH>4.5在HR—HPV阳性组中发生率较高,且差异具有统计学意义(均P4.5可能与HPV感染存在相关性。

摘要：目的评估强化门诊戒烟随访对冠心病的吸烟患者戒烟效果及临床预后的影响。方法入选在我院心血管内科门诊就诊并确诊有冠心病的吸烟患者140例，按1：1采用随机数字表法分为强化戒烟门诊随访组（随访组）70例和常规治疗组（常规组）70例，分别进行不同干预。于6个月后比较两组的戒烟情况、戒烟误区、心血管事件率、药物使用率、门诊医疗费用和生活质量。并在研究结束时，对该方案进行可行性分析。结果基线时，两组患者的年龄、性别、伴发疾病、药物使用率差异均无统计学意义（P均〉0．05）。随访统计时，随访组的戒烟率高于常规组[34．2％（24／70）比5．7％（4／70），P〈0．01]；总心血管事件率低于常规组[21．4％（15／70）比47．1％（33／70），P〈0．01]；药物使用率均高于常规组（P均〈0．05），其中降脂药[95．3％（67／70）比80．4％（56／70）]、β受体阻滞剂[82．4％（57／70）比41．3％（28／70）]和血管紧张素转换酶抑制剂和（或）血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂[61．4％（43／70）比34．4％（24／70）]在随访组中的高使用率表现更为明显（P〈0．01）；门诊医疗费用中位数明显低于常规组（3789．3元比4984．2元，P〈0．01）；参考MYO健康状况调查问卷，生活质量各项评分均明显高于常规组（P〈0．01）。对两组戒烟失败原因统计发现，吸烟误区中排名前3位的是：①别人比我吸得更多，现在还健在[90．3％（56／62）]；②吸烟使人放松，消除烦恼[70．9％（44／62）]；③朋友聊天，喝酒吸烟[66．1％（41／62）]。门诊强化戒烟随访患者对该方案总体很满意率达42．8％，满意率达50．0％。结论强化门诊戒烟随访可以明显提高冠心病吸烟患者的戒烟率、药物使用率以及生活质量，降低医疗费用。

摘要：当前国内核电机组系统运行中,蒸汽发生器出口压力普遍存在高于额定设计值的现象。对此现象进行了梳理,并通过上汽厂先进整体汽轮机热力计算平台对堆机不匹配问题进行了分析计算,发现适度提高汽轮机主汽阀前设计压力可有效提高机组出力。在此基础上,结合全寿命周期的蒸汽发生器出口压力变化曲线和机组老化大修策略,提出了针对汽轮机全寿命周期的堆机匹配优化策略。经济收益相关计算结果显示,机组经过堆机匹配优化后,其总发电量在全寿命60年间有了显著提升。研究成果可为安全提升核电机组全寿命周期经济性提供参考。

摘要：目的调查2020年新冠疫情严格管控初期(1月23日~2月23日)及缓解期(10月1~31日)眼科急诊疾病谱特征。设计横断面调查。研究对象新冠疫情严格管控初期及缓解期北京同仁医院(崇文门及亦庄院区)眼科急诊连续就诊的病例7741例。方法通过医院信息系统收集与分析患者人口学信息、疾病诊断、就诊时间。主要指标疾病构成比。结果缓解期接诊5704例,是初期的2.8倍。30~39岁就诊者最多,占21.8%(初期占22.6%,缓解期占21.5%)。初期与缓解期患者平均年龄分别为(43.0±20.1)岁、(39.6±21.2)岁(P<0.001),18岁以下者初期与缓解期分别占12.3%、19.7%(P<0.001)。7741例中眼表疾病占43.0%,(初期41.4%、缓解期43.6%),眼外伤占29.5%(初期28.9%、缓解期29.7%,其中初期及缓解期电光性眼炎分别占3.5%、0.7%,P<0.001;眼球穿通伤分别占2.7%、1.7%,P<0.05;眼异物伤分别占2.7%、6.2%,P<0.05),眼睑泪器疾病占10.3%(初期9.0%、缓解期10.9%)、青光眼占5.8%(初期7.8%、缓解期5.0%,P<0.001)、玻璃体视网膜疾病占4.0%(初期4.9%、缓解期3.6%)、自身免疫性疾病占3.0%(初期4.1%、缓解期2.6%)。结论新冠疫情造成眼科急诊就诊人数减少尤其是18岁以下患者。疫情期间电光性眼炎明显增多,眼异物伤明显减少。

摘要：根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/*** blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.