摘要：目的:运用实时荧光定量PCR法检测产气荚膜梭菌,为早期快速诊断气性坏疽提供新方法。方法:以产气荚膜梭菌16s rDNA基因序列为模板,在其保守区域设计特异性引物与探针,将PCR扩增所得产物片段克隆,作为定量检测的标准品,绘制标准曲线。并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性、重复性及可行性。结果:实时荧光定量PCR法对产气荚膜梭菌的检测具有高度特异性,与创伤弧菌等24种相关细菌等均无交叉反应;检测灵敏度以纯菌计数达9×102cfu/mL,相当于9 cfu/反应;反应体系有较高稳定性;整个操作过程仅需3 h;300例创伤可疑分泌物样本的荧光定量PCR检测结果与细菌培养结果一致。结论:实时荧光定量PCR法特异、灵敏、快速,适用于产气荚膜梭菌的临床检测及突发事件的批量检测。

摘要：采用不同种植规格氮肥减量的试验设计,研究了不同种植规格氮肥减量对烟株农艺性状、烟叶外观质量、内在化学成分、中性致香物质含量、感官评吸质量及经济效益的影响。结果表明:1.3 m×0.55 m种植规格下氮肥减量15%,烟株的农艺性状较好、外观综合质量提升、内在化学成分协调、中性致香物质总量提升、感官评吸质量改善和经济效益增加。烟叶有效叶数为21.7,叶面积系数为3.3,中部和上部烟叶外观质量评价综合得分分别为79.0和76.5分,中上部烟叶的中性致香物质含量丰富,分别为642.86μg/g和619.60μg/g,中部和上部烟叶感官质量评价得分分别为85.0和83.5分,产量、均价、产值和上等烟比例分别为2830.5 kg/hm^(2)、29.6元/kg、83782.8元/hm^(2)和68.4%。1.3 m×0.55 m种植规格下氮肥减量15%的生产技术在澄江抚仙湖径流区具有良好的推广应用价值和前景。

摘要：目的建立适用于扩增我国常见的乙型肝炎病毒(HBV)A～D基因型全长逆转录酶(RT)区(包含全长HBsAg编码区)的聚合酶链反应(PCR)法,并确定其在分析临床标本中的应用价值。方法建立我国HBV基因序列库,设计适用于扩增A～D基因型HBV全长RT区引物,以A～D基因型HBV重组质粒为模板建立半巢式PCR(snPCR)法,并确定该法灵敏度。用所建立的snPCR对44份HBV DNA定量阳性(>5.0×102拷贝/ml)慢性乙型肝炎患者血清标本进行扩增及PCR产物直接测序。结果琼脂糖凝胶电泳及测序证实,snPCR可扩增A～D基因型HBV全长RT区,对A、B、C和D基因型HBV质粒扩增的灵敏度分别为1.2×103、7.0×102、6.0×102和6.0×102拷贝/ml。snPCR检测HBV DNA>5×102拷贝/ml血清标本的阳性率为88.64%(39/44),扩增阴性血清标本HBV DNA滴度均处于103拷贝/ml水平。扩增目的产物经直接测序确证无误。生物信息学分析显示,样品中B和C基因型分别占35.90%(14/39)和64.10%(25/39);其中15.38%(6/39)发生RT区变异,包括4例为已知耐药变异;7例(17.95%)存在HBsAg编码区变异,其中2例为已知免疫逃逸变异;6例(15.38%)发生RT区和HBsAg编码区"镜像改变"。结论建立了一种新的扩增全长RT区(涵盖全长HBsAg编码区)的snPCR。该法结合直接测序法,可同时分析我国HBVA～D基因型已知和潜在的耐药变异位点。

摘要：采用单因素随机设计的方法,选择4月龄左右的小尾寒羊30只,按体重大小随机分为3组,研究含有复合蛋白0%、4%和8%的日粮对肉羊生产性能、养分消化率、血清指标及经济效益的影响。结果表明:在肉羊饲料中添加复合蛋白不仅可以改善机体的生化代谢和基础代谢,而且能降低饲养成本,提高经济效益。

摘要：为探明华北地区最佳密度条件下玉米群体产量的最优种植形式,采用裂区试验设计,主区种植形式设带宽150 cm三密一稀[60 cm种植3行(行距30 cm)+90 cm大行距种植为一带]、带宽120 cm三密一稀[40 cm种植3行(行距20 cm)+80 cm大行距种植为一带]和60 cm等行距(CK)3个水平,副区密度设4.50万、6.00万、8.25万、10.50万和12.75万株/hm^2计5个水平,研究了不同种植形式与密度对玉米产量和生物性状的影响。结果表明:采用150 cm三密一稀种植形式中高密度栽培时,与对照相比,可以显著降低穗位高,增加叶面积指数,株高和茎粗差异不显著,抽丝后8.25万、10.50万和12.75万株/hm^2密度处理的叶面积指数平均值分别提高了15.00%、5.69%和19.82%;穗位高分别降低6.17 cm、2.17 cm和3.67 cm,有效降低倒伏风险;籽粒产量明显提高,6.00万和8.25万株/hm^2密度下分别较CK增产7.83%和6.72%。经回归分析,得到150 cm三密一稀种植形式的理论籽粒产量最大值为12 030.80 kg/hm^2,相应的定植密度为8.49万株/hm^2。

摘要：目的了解北京市丰台区社区卫生服务中心医务人员流感疫苗接种现状、推荐意愿及影响因素,为提高该人群流感疫苗接种率提供依据。方法采用自行设计的问卷,对北京市丰台区23家社区卫生服务中心的医务人员和公卫科负责人分别进行调查和访谈。了解流感及流感疫苗的认知情况、2018—2019年度流感疫苗接种现状和推荐意愿、医务人员接种流感疫苗的相关政策等内容,采用非条件多因素logistic回归分析流感疫苗接种现状和推荐意愿的影响因素。结果共回收有效问卷1359份,应答率平均为58.48%(1359/2324),2018—2019年流感疫苗调整权重后接种率为32.81%,推荐率为79.76%(1084/1359)。公共卫生等科室、知晓疫苗效果、知晓疫苗接种时间、知晓医务人员是我国推荐优先接种流感疫苗的人群、单位免费提供等因素促进流感疫苗接种。年龄较大、医师和护士等岗位、既往接种流感疫苗、流感及流感疫苗知识得分高等因素促进流感疫苗推荐意愿。78.26%(18/23)受访者认为流感疫苗接种率不高的原因主要是流感疫苗未免费。91.30%(22/23)受访者建议加强流感和流感疫苗知识宣传以提高流感疫苗接种率。结论丰台区社区卫生服务中心医务人员流感疫苗接种率较低,推荐率较高,为医务人员免费提供疫苗并针对性开展宣传教育是提高该人群流感疫苗接种率的关键。

摘要：原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,设计特异性引物,采用PCR方法扩增RBD基因,扩增产物经双酶切(EcoRⅠ/XhoⅠ)后定向克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒pET-30a(+)-GP-RBD,转化BL21(DE3)感受态表达宿主菌,在不同条件下(时间、IPTG浓度、温度)诱导表达目的蛋白,并用His-Band N+柱进行亲和层析纯化;以纯化的重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western blot和IFA鉴定重组蛋白的反应原性及免疫原性。结果显示:PCR扩增到长度为453bp的RBD基因片段;构建的重组质粒pET-30a(+)-GP-RBD经双酶切后得到与目的片段长度相同的特异性条带,测序结果显示没有突变;转化产物在培养7h、终浓度为0.4mmol/L IPTG和37℃条件下能够充分诱导目的蛋白表达,得到相对分子质量为25 000的重组蛋白,主要以包涵体形式存在,BCA试剂盒产量测定,每升诱导的重组菌可纯化约20mg纯度较高的目的蛋白;Western blot检测证实重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白能同时被抗His标签的单抗和兔源多抗识别并发生特异性反应,证明重组蛋白有良好的反应原性;IFA鉴定证实所制备的兔源多抗能够特异性识别表达MARV GP蛋白的重组杆状病毒rBacmid-GP-VP40,证明重组蛋白具有良好的免疫原性。结果表明:成功表达、纯化了MARV GP RBD蛋白,并完成了兔源多抗的制备,为MARV亚单位疫苗的制备和抗原、抗体检测方法的建立奠定基础。

摘要：在飞机机电综合设计过程中，预先规划“六性”相关信息的分析和提取，通过相关数据采集、装订，运用计算机的分析、存储使得这些性能可视化、智能化。为用户提供友好的使用维护界面，优化飞行器保障维护流程，采用计算机技术实现自动诊断、故障预警、参数调试、健康管理等功能。

摘要：转向制动是车辆经常遇到的工况之一。本文提出了汽车转向制动时防抱死制动系统（ＡＢＳ）基于优化目标滑移率模糊控制的策略。该策略根据路面附着条件以及车辆所处的运动状态实时计算出车轮优化目标滑移率，作为防抱死制动系统的控制目标，并利用模糊推理理论进行了ＡＢＳ模糊控制器设计。在此基础上结合８自由度非线性车辆系统模型，利用Ｍａｔｌａｂ／Ｓｉｍｕｌｉｎｋ软件对装有ＡＢＳ的车辆转向制动过程进行模拟试验。结果表明基于优化目标滑移率ＡＢＳ模糊控制策略优于传统固定目标滑移率控制策略，它有效地提高了车辆转向制动性能，同时也保证了横向稳定性，实现了车辆的制动性能、可控性及横向稳定性最佳协调，同时且具有较强的鲁棒性。

摘要：静电式空气过滤器以其低风阻、可清洗重复使用、可杀灭微生物等优点,广泛应用于净化家居、办公空气环境。一般通风用空气过滤器现行有效的评价标准为ISO 16890-2016、ASHRAE52.2-2017和GB/T 14295-2019。静电式空气过滤器由于其技术特点,不完全适用于上述3项标准。分析表明,上述3项标准可有效评价静电式空气过滤器阻力、计数效率两项指标,但是不适用于评价静电式空气过滤器容尘量。ISO 16890-2016与GB/T 14295-2019两项标准产品评级方法适用于静电式空气过滤器,而ASHRAE 52.2-2017评级方法不适用于静电式空气过滤器。建议应依据静电式空气过滤器容尘特性,以过滤器电流变化或过滤器效率变化为判据,制定适宜的容尘量评价方法。以期能够更好的规范静电式空气过滤器研发、设计、生产与使用,保障人民生产、生活健康安全。