摘要：目的基于八模块设计的GNM C7-8实时荧光PCR系统实现对8种动物源性成分同时快速检测.方法基于猪朊蛋白基因、牛生长激素基因、羊生长激素基因、驴线粒体ATPase 6基因、马线粒体ATPase 6基因、鸭生长激素基因、水貂线粒体细胞色素b基因、狐狸线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ亚基基因引物设计了8种动物源性成分实时荧光PCR检测方法.应用GNM C7-8实时荧光PCR系统,对8种动物源性成分启动同时检测和每隔5 min顺序启动不同时检测,并将检测结果和ABI 7500荧光PCR分别检测结果进行比较.结果GNM C7-8实时荧光PCR系统同时检测猪、牛、羊、驴、马、鸭、水貂、狐狸8种动物源性成分,起峰周期数分别为30、27、21、21、24、17、15、17,与其不同时检测结果一样,与ABI 7500荧光PCR系统检测结果相比,猪、羊、马、鸭、水貂5种成分的起峰快1~2个周期数,其余3种成分检测结果一致,检测完成时间少16~20 min.结论GNM C7-8实时荧光PCR系统8个模块独立运行,互不干扰,无交叉污染,能够同时快速检测8种动物源性成分,为快速筛查动物源性成分提供强有力的设备技术支持.

摘要：目的评估强化门诊戒烟随访对冠心病的吸烟患者戒烟效果及临床预后的影响。方法入选在我院心血管内科门诊就诊并确诊有冠心病的吸烟患者140例，按1：1采用随机数字表法分为强化戒烟门诊随访组（随访组）70例和常规治疗组（常规组）70例，分别进行不同干预。于6个月后比较两组的戒烟情况、戒烟误区、心血管事件率、药物使用率、门诊医疗费用和生活质量。并在研究结束时，对该方案进行可行性分析。结果基线时，两组患者的年龄、性别、伴发疾病、药物使用率差异均无统计学意义（P均〉0．05）。随访统计时，随访组的戒烟率高于常规组[34．2％（24／70）比5．7％（4／70），P〈0．01]；总心血管事件率低于常规组[21．4％（15／70）比47．1％（33／70），P〈0．01]；药物使用率均高于常规组（P均〈0．05），其中降脂药[95．3％（67／70）比80．4％（56／70）]、β受体阻滞剂[82．4％（57／70）比41．3％（28／70）]和血管紧张素转换酶抑制剂和（或）血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂[61．4％（43／70）比34．4％（24／70）]在随访组中的高使用率表现更为明显（P〈0．01）；门诊医疗费用中位数明显低于常规组（3789．3元比4984．2元，P〈0．01）；参考MYO健康状况调查问卷，生活质量各项评分均明显高于常规组（P〈0．01）。对两组戒烟失败原因统计发现，吸烟误区中排名前3位的是：①别人比我吸得更多，现在还健在[90．3％（56／62）]；②吸烟使人放松，消除烦恼[70．9％（44／62）]；③朋友聊天，喝酒吸烟[66．1％（41／62）]。门诊强化戒烟随访患者对该方案总体很满意率达42．8％，满意率达50．0％。结论强化门诊戒烟随访可以明显提高冠心病吸烟患者的戒烟率、药物使用率以及生活质量，降低医疗费用。

摘要：目的了解我国手术部位感染管理现状,为制定手术部位感染防控措施提供依据。方法课题组设计手术部位感染管理调查表,中国医院协会医院感染管理专业委员会于2016年3月-6月抽取东部、中部、西部14个省的省级、地市级、县级医院,发放收集调查表并反馈至课题组进行统计分析。结果在所调查的199所医院中,87.63%的医院开展了手术部位感染目标性监测,61.30%的医院通过信息化预警发现手术部位感染疑似病例,38.69%的医院院感系统与手麻系统实现了对接,在手术区皮肤准备方面,使用刀片刮除、化学脱毛法、电动剪毛、常规不去除毛发的医院分别占63.31%、11.56%、4.52%、3.51%,使用碘伏、碘酒-酒精、氯己定消毒手术区皮肤的医院分别占71.35%、15.07%、2.51%,腹腔镜镜头灭菌方式的选择上,使用过氧化氢等离子体低温灭菌、化学浸泡的医院分别占86.94%、23.62%。结论我国手术部位感染防控能力逐渐增强,手术部位感染监测及信息化发展迅速,但手术部位感染防控措施落实方面尚存在较多问题急需改进。

摘要：目的探索分层分级的进阶式超声住院医师规范化培训模式,以提高超声住院医师的培训质量。方法对不同教育背景的超声住院医师进行分层培养,按照年级和培训阶段设计制定进阶式的培训方案,建立分层分级的进阶式超声住培体系,并在2016级超声规培住院医师中尝试应用。将改革前2013级住院医师和改革后2016级住院医师的超声报告质量进行对比,评价教学改革效果。结果施行分层分级的进阶式培养方案后,2016级住院医师超声报告的病理符合率为97.2%,而改革前2013级超声报告的病理符合率为92.8%。教学改革后年级超声报告的病理符合率显著高于改革前(P<0.05)。结论分层分级的进阶式培养模式有助于超声住院医师培训质量的提高,在超声住院医师规范化培训中具有一定的应用价值。

摘要：通过设计特异引物,扩增获得口蹄疫病毒3ABC编码区的目的基因片段,将其用SalI和NcoI双酶切后,与经同样处理的带有一段信号肽序列的穿梭质粒pMelBac-B连接,经筛选、鉴定及DNA序列分析后,获得重组质粒pMel-3ABC.将重组质粒与线性化的杆状病毒骨架Bac-N-Blue共转染Sf9昆虫细胞,通过噬斑筛选和PCR鉴定,获得了含有目的基因的重组杆状病毒.用重组病毒感染Sf9昆虫细胞,通过间接ELISA方法,检测细胞培养基上清液中表达的口蹄疫病毒抗原.结果表明,口蹄疫病毒基因片段3ABC正确克隆到杆状病毒载体上,重组病毒可在昆虫细胞中表达目的蛋白.

摘要：背景:骨髓干细胞移植可改善心功能、预防心室重构,目前用于移植的成体骨髓干细胞有骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞和内皮祖细胞等,不同种类的骨髓干细胞移植后的效果及具体机制尚不清楚。目的:比较自体骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞冠状动脉移植对急性心肌梗死后心室重构的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-03/2006-12在河北省人民医院临床研究中心、河北医科大学电镜室及大连宝生物进行。(basic fibroblast growth factor,bFGF)材料:36只冀中白猪随机分为4组:假手术组6只、模型组10只、骨髓单个核细胞组10只、骨髓间充质干细胞组10只。方法:采用梯度密度离心法分离培养猪自体骨髓单个核细胞,以贴壁法分离培养猪自体骨髓间充质干细胞,移植前均行胶体金标记。除假手术组外,其余3组均以球囊导管压迫冠状动脉前降支的方法建立猪急性心肌梗死模型。造模后90min,经导管由冠状动脉腔内骨髓单个核细胞组移植自体骨髓单个核细胞(6.0±1.3)×107个,骨髓间充质干细胞组移植自体骨髓间充质干细胞(4.5±2.1)×107个,培养28d。主要观察指标:光镜及电镜观察心肌组织病理学改变;超声检查心功能变化;免疫组织化学检测心肌血管数、心肌细胞凋亡、心肌组织核因子κB及肌钙蛋白I阳性表达情况,及其与心功能的关系;RT-PCR法检测心肌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)mRNA的表达,及其与心功能的关系。结果:①骨髓间充质干细胞组在梗死区、梗死边缘区均可见大量血管增生,冠脉血管周围可见异常细胞团生长,骨髓单个核细胞组有较多的毛细血管"芽生"现象。②细胞移植前各组心功能指标基本相似(F=1.550,P>0.05)。移植后28d与模型组比较,其余3组左心室射血分数均明显降低(F=5.30,P<0.05)。③与模型组比较,骨髓单个核细胞组梗死区及梗死边缘区的血管数明显增加(F=29.56～34.87,P<0.01),骨髓间充质干细胞组无变化;移植细胞两组的梗死区、梗死边缘区心肌细胞凋亡率均显著降低(F=14.31～35.34,P<0.01),肌钙蛋白I阳性率均明显升高(F=19.05,P<0.01);梗死边缘区核因子кB阳性率均明显降低(F=19.05,P<0.01)。④骨髓单个核细胞组梗死边缘区VEGF基因的表达显著高于模型组、骨髓间充质干细胞组(F=49.41,P<0.01)。骨髓间充质干细胞组梗死边缘区bFGF基因的表达显著高于模型组、骨髓单个核细胞组(F=4.71,P<0.01)。⑤左室射血分数与心肌细胞凋亡率、心肌核因子κB呈负相关(r=-0.4411,P<0.05;r=-0.5796,P<0.01);与血管数、VEGF及bFGF表达呈正相关(r=0.775,P<0.01;r=0.5651,P<0.05;r=0.5735,P<0.05)。结论:经冠脉自体骨髓单个核细胞或骨髓间充质干细胞移植均可减轻心肌梗死后左心室重构,心功能的改善与干细胞移植后增加心肌血管数量及心肌VEGF,bFGF表达、减少心肌细胞凋亡及核因子κB水平有关。骨髓单个核细胞移植促心肌血管增生及VEGF的表达均优于骨髓间充质干细胞,而后者促bFGF基因表达的作用优于前者。

摘要：目的建立快速检测副溶血性弧菌的实时重组酶聚合酶扩增技术(RPA)。方法根据副溶血性弧菌tlh基因保守序列设计筛选引物及探针,建立检测副溶血性弧菌的实时RPA方法。通过检测不同浓度副溶血性弧菌标准株DNA模板评价方法灵敏度,通过检测不同种属弧菌及其他细菌标准株评价方法特异度,通过重复试验评价方法稳定性,通过实样检测评价方法应用效果。结果建立的实时RPA方法在39℃恒温下20min内完成副溶血性弧菌扩增,最低检测限为5pg/反应,与其他致病菌无交叉反应,不同浓度的副溶血性弧菌DNA模板和大肠杆菌DNA模板隔日3次实时RPA检测结果一致,实时RPA对51份鲜活/冰鲜鱼、虾、贝、蟹类样品的检测结果与GB4789.7—2013《食品微生物学检验副溶血性弧菌检验》检测结果一致。结论建立的实时RPA方法可定性检测副溶血性弧菌,且实验操作及结果判读简单,适用于突发公共卫生事件、食品安全监管中的副溶血性弧菌快速检测。

摘要：目的 观察h-R3与放疗联合治疗晚期鼻咽癌的疗效和不良反应。方法 采用随机对照设计，共7个治疗中心参加了这项研究。符合入组标准的晚期鼻咽癌患者随机分为单放组和联合治疗组，两组患者均接受单纯根治性放射治疗，总剂量70～76Gy，联合治疗组同时给予h-R3治疗，剂量为100mg／次，静脉滴注，每周给药1次。结果 共137例患者入组，其中单放组67例，联合治疗组70例。联合治疗组治疗结束、治疗后第5周和第17周时的肿瘤完全缓解（CR）率，在全分析集（ITT集）分别为65．63％、87．50％和90．63％，在符合方案集（PP集）分别为67．21％、90．16％和93．44％，均显著高于单放组。联合治疗组治疗后第17周时，在ITT集和PP集的有效率均为100．00％，均显著高于单放组（90．91％和92．31％）。治疗前后两组间Karnofsky评分差异无统计学意义，联合治疗组患者体重恢复情况明显好于单放组。与h-R3相关的主要不良反应是发热（4．28％）、血压下降（2．86％）、恶心（1．43％）、头晕（2．86％）、皮疹（1．43％）。h-R3对血常规和生化指标无显著影响，并且未增加放疗的副作用。结论 h-R3联合放疗可显著提高晚期鼻咽鳞癌患者的疗效，药物不良反应轻微，对治疗晚期鼻咽癌有很高的临床应用价值。

摘要：目的探讨逆转录病毒介导RNA干扰(RNAi)稳定抑制αv整合素表达的有效性,并建立稳定抑制αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。方法设计并合成3对针对αv整合素基因的短发夹RNA(shRNA)序列,构建逆转录病毒质粒;脂质体转染逆转录病毒质粒至结肠癌细胞株HT-29;G418筛选,局部消化法挑选阳性克隆;Western blotting检测蛋白表达水平。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示,构建成功的逆转录病毒载体被HindⅢ限制性内切酶切为两个分别长1950bp与5800bp片段。测序结果显示,针对αv整合素基因的3对shRNA序列皆成功插入逆转录病毒质粒;转染逆转录病毒载体的HT-29细胞持续表达绿色荧光蛋白,并对G418具抗性;Western blotting结果显示逆转录病毒介导的shRNA能有效地抑制αv整合素表达。结论逆转录病毒介导的shRNA能够高效、稳定地抑制αv整合素表达,进而可以建立稳定干扰αv整合素表达的结肠癌HT-29细胞系。

摘要：对气相色谱测定固态酿造基质中四甲基吡嗪的前处理方法进行了优化,水溶液浸提pH为5,液液萃取的萃取剂为乙酸乙酯,萃取时间为15min。高温大曲和堆积糟醅中四甲基吡嗪测定的精密度分别为2.71%和9.59%,加标回收率分别在84.64%~93.11%和83.33%~101.04%。