摘要：目的运用热对流PCR技术检测乳品中布鲁杆菌。方法根据布鲁杆菌保守基因序列,设计合成引物和探针,通过优化反应体系,配合商品化核酸提取试剂盒,建立检测乳品中布鲁杆菌的热对流PCR方法,并与常规荧光定量PCR方法的敏感性与特异性比较,以验证该检测方法的可靠性。结果热对流PCR检测敏感性与常规荧光定量PCR检测敏感性基本一致,差异无统计学意义(t=85.500,P>0.05),且该布鲁杆菌热对流PCR方法能检测出的乳品样本中布鲁杆菌含量最低浓度为10 cfu/ml;含有大肠杆菌、溶血性链球菌、克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的乳液经扩增,均为阴性结果;只有含布鲁杆菌乳液的阳性对照,经热对流PCR仪扩增后结果显示为阳性;热对流PCR方法(22.3%)与常规荧光定量PCR方法(24.1%)阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.250,P>0.05)。结论热对流PCR方法检测乳品中布鲁杆菌可靠性高、扩增反应时间短、方便快捷、仪器成本低廉,适用于基层现场检测病原。

摘要：为揭示铜和叶酸对奶公牛消化率和血液代谢的影响,试验将12月龄、体重(401±2.9)kg的8头荷斯坦奶公牛,随机分为4组,采用2(4 mg/kg日粮干物质的叶酸或过瘤胃叶酸)×2(10 mg/kg日粮干物质的硫酸铜或过瘤胃硫酸铜)因子的4×4拉丁方设计。结果显示,过瘤胃叶酸提高了干物质、有机物、粗蛋白质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的消化率(P<0.05),但过瘤胃硫酸铜相反(P<0.05)。过瘤胃叶酸较叶酸降低了粪氮、尿氮和总排泄氮以及血清中甘油三酯、乙酰乙酸和同型半胱氨酸浓度(P<0.05),增加了沉积氮和沉积氮/消化氮以及血清中葡萄糖、白蛋白、总蛋白质、游离脂肪酸和叶酸浓度(P<0.05)。过瘤胃硫酸铜较硫酸铜提高了粪氮和总排泄氮以及血清中游离脂肪酸和甘油三酯浓度(P<0.05),降低了尿氮/总排泄氮以及血清中白蛋白、总蛋白质和总胆固醇浓度(P<0.05)。两者对白蛋白、总胆固醇和乙酰乙酸存在交互作用(P<0.05)。结果表明,过瘤胃叶酸和过瘤胃硫酸铜在蛋白质和脂质代谢中存在交互作用。过瘤胃叶酸的添加效果优于叶酸,而过瘤胃硫酸铜在本试验条件下可能造成了铜的过量摄入。

摘要：摩擦磨损实验机的耐磨机夹具多采用双侧卡扣式夹具,在摩擦实验过程中容易松动,卡扣螺纹容易失效,导致夹具使用寿命缩短,影响实验结果的准确性。本文设计了一种新型销钉式夹具,在夹具的整体式主体部分的卡槽左侧直接切削加工“L”型沟槽,夹具右侧的活动“L”型挡片采用单侧销钉固定。新型销钉式夹具夹持安装工件更加方便,延长了夹具的使用寿命,增强了实验过程的稳定性,防止了因摩擦等受力产生摩擦角造成实验误差,有较好的推广应用价值。

摘要：目的探讨卒中登记方法、了解卒中患者基本特征和功能结局。方法前瞻性、连续性登记自2002年3月1日起在四川大学华西医院神经内科住院的卒中患者。由统一培训的专科医师填写卒中登记表，登记患者临床特点、住院诊治情况，并随访各时点结局（发病后7d，1、3、6和12个月末的死亡和残疾）。结果纳入自2002年3月1日至2006年8月31日连续性登记的卒中患者共3123例。其中65．5％来自城区，34．5％来自农村。年龄14～98（63．05±17．98）岁，男性占60．3％，住院期间完成头颅CT和（或）MRI者占97％（3028／3123）。2002年3月至2004年9月纳入各类卒中患者共1804例。其中缺血性卒中62．1％（1120／1804），脑出血28．4％（513／1804），蛛网膜下腔出血4．0％（72／1804），TIA5．5％（99／1804）。2004年10月后未纳入蛛网膜下腔出血和TIA患者。入院时中位NIHSS评分脑出血患者8（3—15）分，脑梗死5（2～10）分。糖尿病（OR=2．427，95％CI1．811～3．253，P=0．000）、房颤（OR=6．121，95％CI3．535～10．60，P=0．000）、冠心病（OR=4．144，95％CI 2．944—5．832，P=0．000）、TIA史（OR=4．342，95％CI 1．726—10．92，P=0．001）发生比例脑梗死组高于脑出血组，而饮酒史脑梗死组低于脑出血组（OR=0．740，95％C10．611—0．896，P=0．002）。缺血性卒中患者溶栓占0．9％（20例），抗血小板治疗83．0％，甘露醇23．5％，神经保护剂（胞二磷胆碱）68．1％，中成药89．7％。7d和1个月病死率脑出血组分别为10．7％和13．9％，脑梗死组分别为3．0％和5．2％。3、6及12个月死亡或残疾率脑出血组分别为40．4％、40．3％和38．9％；脑梗死组分别为37．1％、35．0％和33．4％。结论本研究是国内目前报告的最大样本、最长时间的前瞻性连续性单中心卒中登记项目，提供了深入研究卒中临床特点的重要平台；本组患者病情偏轻，近期病死率及远期病死或残疾率低于国外，中国卒中防治的干预性临床试验设计廊注意考虑这些特点。

摘要：苦荞是有潜力的硒生物强化作物,而芦丁是苦荞中重要的生物活性物质,研究外源硒对苦荞籽粒芦丁含量的影响具有重要意义。为了探讨施硒浓度、品种、施硒时期、施硒方式对不同生态区苦荞籽粒芦丁含量的影响,采用正交试验设计在晋中和晋西北生态区开展大田试验,对晋中生态区供试品种黑丰1号和晋荞2号分别于分枝期和开花期以及晋西北生态区供试品种黑丰1号和晋荞6号分别于开花初期和盛花期土施和叶面喷施不同浓度(0、1.37、2.74、5.48、8.22、12.33、18.495、27.7425 g/hm^(2))的亚硒酸钠,通过直观分析、方差分析以及回归建模,研究各因素(施硒浓度、品种、施硒时期、施硒方式)对苦荞籽粒芦丁含量的影响。结果表明,苦荞籽粒芦丁含量随施硒浓度的升高呈先增加后降低的趋势;施硒浓度和品种对晋中生态区苦荞籽粒芦丁含量的影响显著,施硒浓度、品种和施硒时期对晋西北生态区苦荞籽粒芦丁含量的影响显著。晋中生态区晋荞2号分枝期土施12.33 g/hm^(2)的亚硒酸钠以及晋西北生态区晋荞6号开花初期土施或叶面喷施12.33 g/hm^(2)的亚硒酸钠,能获得较高的芦丁含量。

摘要：目的研究口服软粪液和小肠液的寒地獭兔肠道内拟杆菌、梭菌属、韦荣球菌和大肠埃希菌数量的变化,揭示软粪液和小肠液对肠道菌群定植的影响。方法 90只仔兔分为I、II和III组,分别口服1mL的软粪液、小肠液和纯净水。无菌刮取32和46日龄仔兔的十二指肠、空肠、回肠和盲肠肠壁内容物,提取内容物细菌基因组DNA。根据拟杆菌、梭菌属、韦荣球菌和大肠埃希菌的16SrDNA V3可变区基因序列设计特异性引物,进行实时荧光定量PCR反应,定量不同细菌。结果口服软粪液(I组)的32和46日龄仔兔其空肠中的拟杆菌浓度显著高于对照组(5.77E-9>3.58E-10、1.10E-9>3.39E-10)(t值为8.20、2.16,P3.58E-7、7.41E-6>1.43E-6、1.57E-5>1.33E-6、7.99E-6>1.80E-6)(t值为3.07、4.24、5.87、6.28,P4.87E-8、6.88E-6>3.58E-7)(t值为3.42、2.95,P1.80E-6)(t值为2.03,P<0.05)。结论软粪液和小肠液对拟杆菌、梭菌属、韦荣球菌的定植有促进作用,对大肠埃希菌的定植影响较小。

摘要：基于国内外排污权交易的研究与实践,对照排污权交易制度运行的必要条件,结合河北省社会经济发展、环境保护实际情况以及相关制度等,对河北省实施COD排污权交易的可行性进行了分析,并针对河北省推进排污权交易的薄弱环节,提出了创新方向和解决方法,总体认为河北省COD排污权交易已具备了一定的试验条件,可进行排污权交易试点研究工作。

摘要：目的:构建PES1基因的慢病毒干扰载体,研究其对乳腺癌细胞ZR75-30生长的影响。方法:设计针对PES1基因的siRNA引物,克隆到pSIH1-H1-Puro载体,包装成慢病毒,测定病毒的滴度,感染人乳腺癌细胞ZR75-30,通过Real-time PCR和Western印迹检测干扰效果,并通过生长曲线研究敲低PES1对ZR75-30细胞生长的影响。结果和结论:构建了具有明显干扰效果的PES1基因的siRNA慢病毒载体,能够有效抑制ZR75-30细胞内源的PES1 mRNA和蛋白水平,敲低PES1能够抑制ZR75-30细胞的生长。

摘要：为建立优质野生宽叶黑果枸杞离体培养与快速繁殖技术新体系,该文以野生宽叶黑果枸杞的带芽茎段为外植体,筛选优化适宜的芽诱导培养基,芽增殖协同生根的一步成苗培养基,优化炼苗、移栽等配套技术体系。结果显示:以MS+1.5mg/L6-BA+0.3mg/L NAA+50mg/L ASA+10g/L PVA为芽诱导最佳培养基;以MS+1.0mg/L 6-BA+0.8mg/L NAA+150mg/L ASA+20g/L PVA为芽最佳增殖和生根培养基,可一次成苗,且成苗时间短、苗齐苗壮,成活率达到97.6%。

摘要：目的研制安全有效的肠道病毒71型(enterovirus 71,EV-A71)灭活疫苗,预防EV-A71感染所致疾病.方法通过比较不同临床EV-A71分离毒株免疫家兔后的免疫原性和细胞传代适应性,筛选EV-A71灭活疫苗生产毒株;建立多步层析纯化工艺,获得高纯度、高比活EV-A71抗原;采用随机双盲、多中心、试验疫苗与安慰剂对照优效性设计方案,在6~35月龄健康婴幼儿中接种2剂、3个批次EV-A71疫苗,观察对照组和疫苗组EV-A71及其他肠道病毒感染所致疾病发生病例数,计算疫苗保护效果.分析疫苗免疫原性、批间一致性和交叉免疫原性.结果依据中和抗体水平将087株确定为疫苗生产株.经超滤浓缩、柱层析纯化后,疫苗抗原目的蛋白纯度达95%以上、比活达800U/μg以上.第一年内疫苗对EV-A71所致住院/重症病例保护率为100.00%、对EV-A71所致手足口病保护率为90.93%、对EV-A71感染所致疾病保护率为81.85%;两年内对EV-A71感染所致手足口样疾病、手足口病的保护率达到95.00%,对EV-A71感染所致疱疹性咽峡炎、疱疹性口腔炎保护率达100.00%,对EV-A71感染所致住院/重症病例保护率达100.00%;但对CV-A16及除EV-A71、CV-A16外其他肠道病毒所致疾病未显现出明显的交叉保护作用.免疫前中和抗体阴性人群,EV-A71疫苗免疫后第56天,EV-A71中和抗体阳转率达到91.7%以上,中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)达到325.3.3批次试验疫苗接种人群间首针免疫后第56天GMT比值的95%可信区间均在等效区间0.67~1.5内,提示3个批次试验疫苗具有较好的一致性.结论EV-A71疫苗对EV-A71感染所致疾病具有较好的保护效果.