摘要：目的构建人钙整合素结合蛋白1(calcium-and integrin-binding protein 1,CIB1)基因RNA干扰慢病毒载体,获得稳定下调CIB1表达的慢病毒。方法根据CIB1的序列,设计siRNA序列,克隆入慢病毒核心质粒pGV112中,并与辅助质粒一起转染293T细胞进行病毒包装,用慢病毒感染293T细胞并测定病毒滴度。以CIB1干扰慢病毒感染人胶质瘤细胞SHG44后,应用Western blotting方法检测CIB1的表达。结果成功构建CIB1干扰慢病毒载体,包装后获得慢病毒颗粒,病毒滴度检测可达6×108pfu/ml,感染细胞CIB1蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论成功构建人CIB1基因RNA干扰慢病毒,为后续CIB1生物学功能研究奠定基础。

摘要：目的探讨全面两孩政策下育龄妇女的二孩生育意愿现状及影响因素。方法采用横断面调查研究设计,于2017年5月至2018年6月基于中国五省市(北京市、陕西省、甘肃省、四川省、福建省)采用分层随机抽样调查,共纳入976名20~40岁育龄妇女为研究对象。调查内容主要包括人口学特征,政策实施前后二孩生育意愿、性别倾向等生育意愿特征变量。采用非条件Logistic回归分析两孩政策实施后育龄妇女生育意愿的影响因素。结果全面两孩政策实施前后整体二孩生育意愿上升了20.59%(31.76%vs 52.35%)。77.25%的育龄妇女理想子女数为两个;62.26%的育龄妇女表示对二孩的性别没有倾向;50.09%育龄妇女预期的二孩生育间隔为3~5年。生育意愿亚组分析显示居住地和婚育状态是全面两孩政策实施前后生育意愿转变显著的影响因素(χ~2值分别为7.95和9.18,均P<0.05)。全面两孩政策实施后,25~29岁及30~34岁年龄组育龄妇女的二孩生育意愿显著高于20~24岁年龄组(OR:1.71,95%CI:1.11~2.62;OR:2.15,95%CI:1.37~3.60);城市和郊区育龄妇女的二孩生育意愿显著低于农村地区(OR:0.28,95%CI:0.18~0.44;OR:0.41,95%CI:0.24~0.70);随着教育水平和家庭月收入的增高,二孩生育意愿显著降低,其中大学及以上教育水平OR值为0.45,95%CI:0.22~0.90,月收入≥12 000元OR值为0.61,95%CI:0.34~0.96;职业为农民和家庭主妇的二孩生育意愿显著较高(OR:3.28,95%CI:1.88~5.73;OR:1.77,95%CI:1.02~3.09)。结论全面两孩政策的实施后,政策效应已初步显现;其中25~34岁、农村居民、中低收入水平、中低教育水平育龄妇女可能为二孩生育的主要人群。

摘要：目的:评价中医内外合治综合方案治疗小儿病毒性肺炎风热闭肺证和痰热闭肺证的临床疗效和安全性。方法:采用多中心、分层区组、随机对照的临床试验设计方法,分6个中心,将450例病毒性肺炎住院患儿以2∶1比例随机分为治疗组和对照组。治疗组予喜炎平注射液静脉滴注,风热闭肺证予小儿清肺合剂加止咳散口服,痰热闭肺证予小儿清肺合剂加化痰散口服,两证型患儿背部均外用敷胸散,对照组予利巴韦林注射液静脉滴注,愈酚甲麻那敏糖浆口服。疗程均10d。观察两组患儿治疗后中医证候总体疗效及每日疾病积分、风热闭肺证及痰热闭肺证患儿每日证候积分及安全性评价。结果:合格病例421例,其中,治疗组290例,对照组131例。治疗后,治疗组中医证候总体疗效优于对照组(P<0.05),第3、4天治疗组疾病积分变化与对照组比较,显著降低(P<0.05)。痰热闭肺证在第3、4、5天的证候积分改善情况优于对照组(P<0.05),而风热闭肺证患儿每日证候积分变化与对照组比较差异无统计学意义。两组均未发现不良反应。结论:中医内外合治综合方案治疗小儿病毒性肺炎痰热闭肺证具有一定的临床疗效和较高的安全性。

摘要：为研发具有自主知识产权的锡林郭勒盟牛源性检测试剂盒。以8种动物的线粒体全基因组序列为基础,通过比对分析筛选出牛特异的引物和探针组合进行荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)。以所设计的引物和探针为基础的牛源性成分检测具有高度的特异性(仅对牛源性样品有典型扩增曲线,对其他动物来源的样品无扩增曲线)。检测灵敏度试验表明,利用此引物和探针的检测方法具有高度的灵敏度,可以检测到1 pg级的模板DNA。牛肉加工制品中牛源性定量检测试验表明,所研发的引物和探针具有较好的定量检测能力。以上研究结果表明此引物和探针组合适用于牛源性成分的定性和定量检测。

摘要：根据GenBank中猪链球菌鸟氨酸氨甲酰转移酶基因(oct)序列(GenBank登录号:NZ_CP007497)设计引物,克隆猪链球菌ZY05719株的oct基因,构建p ET-28a-oct原核表达质粒并在大肠杆菌Rosetta中诱导表达,重组OCT蛋白即鸟氨酸氨甲酰转移酶用镍亲和层析柱纯化后,研究它对猪链球菌生物被膜形成的影响及介导猪链球菌黏附PK-15细胞的作用。结果显示,克隆出1 014 bp的oct基因,并检测出纯化的40 ku OCT融合蛋白具有良好的反应原性,且能提高猪链球菌形成生物被膜的能力及降低黏附PK-15细胞的作用。本研究成功克隆并表达了ZY05719株的oct基因,初步揭示了其生物学功能,为深入研究鸟氨酸氨甲酰转移酶在猪链球菌致病机制中的作用奠定了基础。

摘要：目的监测2005年我国不同地区15家教学医院分离的医院获得革兰阴性病原菌的耐药性。方法按设计方案收集非重复的1927株院内获得革兰阴性病原菌。菌株经中心实验室复核后,采用琼脂稀释法测定6类18种抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC),数据输入 WHONET 5.4软件进行耐药性分析。结果不产超广谱β内酰胺酶(ESBEs)的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌对被测β内酰胺类药物的敏感性均较高,而对于产 ESBLs 的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌,敏感率大于80%的药物只有美罗培南、亚胺培南和哌拉西林-三唑巴坦。不产 ESBLs 大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的敏感性很低(34.8%～36.1%),产 ESBLs 大肠埃希菌的敏感性则更低(13.4%～17.1%)。对于易产头孢菌素酶(AmpC)的菌株(包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、枸橼酸杆菌属、沙雷菌属、普通变形杆菌),敏感率均大于80%的抗生素有美罗培南、亚胺培南、哌拉西林-三唑巴坦,另外,敏感性较高的抗菌药物还包括头孢吡肟(67.3%～100%)、阿米卡星(67.3%～95.2%)、头孢他啶(52.9%～100%)和头孢哌酮-舒巴坦(51.9%～100%),氟喹诺酮类药物的敏感率为52.5%～86.2%。铜绿假单胞菌对多黏菌素 B 的敏感性最高(95.6%),敏感率在70%～80%之间的药物有美罗培南、亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林-三唑巴坦。鲍曼不动杆菌对多黏菌素 B 的敏感率达98.3%,继之为亚胺培南(80.8%)、美罗培南(76.2%)和米诺环素(67.4%),其他药物的敏感率低于60%。对嗜麦芽窄食单胞菌,敏感性较高的抗菌药物有米诺环素(85.0%)、左氧氟沙星(82.5%)和甲氧苄啶-磺胺甲噁唑(77.5%)。对洋葱伯克霍尔德菌,敏感性相对较高的抗菌药物有米诺环素(77.2%)和美罗培南(61.4%)。结论碳青酶烯类、哌拉西林-三唑巴坦、阿米卡星和头孢吡肟对医院分离的肠杆菌科菌保持了较高的抗菌活性,而非发酵革兰阴性杆菌对临床常用药物的敏感性较以往监测有所降低。

摘要：药物性肝损伤是临床常见且严重的药物不良反应之一,对乙酰氨基酚是临床常用的解热镇痛药,是引起药物性肝损伤的常见因素.肝微粒体酶细胞色素P4502E1(CYP2E1)在对乙酰氨基酚诱导的肝细胞损伤中发挥了重要作用.由于体外培养的肝细胞系几乎不表达微粒体酶CYP2E1,采用CYP2E1-慢病毒转染人肝癌细胞系HepG2构建了稳定高表达CYP2E1基因的肝细胞系,利用该细胞系建立了对乙酰氨基酚诱导的肝细胞损伤体外筛选模型,并对实验室从中药香附中提取得到24个天然产物进行了活性筛选,发现了8个具有潜在体外抗药物性肝损伤活性的天然化合物.本研究为药物性肝损伤提供了合适的体外筛选模型,活性筛选结果也为传统中药香附的研究与开发提供了理论依据.

摘要：本文研究了不同梯度盐浓度条件下圆根萝卜的盐渍工艺,结果表明,采用一次盐渍工艺,5%盐浓度盐渍萝卜保质期长达8个月且可以直接食用,8%盐浓度盐渍萝卜保质期长达1年以上且风味好,较传统盐渍工艺食盐使用量得到大幅度的减少,且工序简单,有利于泡菜生产的低盐化。

摘要：为提高甘南州青稞大田产量,增强青稞抗倒伏性,降低田间倒伏率,选用2种不同植物生长延缓剂,采用二因素随机区组试验设计,分别对黄青1号、甘青4号和甘青5号3个不同青稞品种喷施50%矮壮素和15%多效唑可湿性粉剂,以喷施清水为对照,对比2种植物生长延缓剂对大田条件下青稞的矮化效应及其对产量和品质的影响。结果表明,2种药剂处理后,青稞株高、倒伏率较对照相比呈显著下降,其中,3个品种倒伏率均有下降,最大降幅达40%,甘青4号在15%多效唑处理后没有倒伏;青稞经药剂处理后的千粒质量、整齐度及大田产量与对照相比均显著提高,2种药剂对青稞的品质影响不明显。50%矮壮素和15%多效唑可湿性粉剂可显著提高青稞的抗倒伏性,且具明显的增产效果。

摘要：以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,通过PCR扩增UL6全长基因,将PCR产物克隆于pMD18-T载体,并采用双脱氧终止法进行序列测定。序列分析显示UL6全长1 938 bp,可编码646个氨基酸。将该基因克隆到插入原核表达载体pET28a的6×His下游,获得原核表达质粒pET28a-UL6,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导在大肠埃希菌中成功表达获得分子质量约70 ku的融合表达蛋白6×His-UL6,Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生特异性反应。根据测定的序列,设计一对能扩增UL6基因完整编码区的引物,PCR扩增UL6基因并将其插入真核表达载体pEGFP-C2中EGFP基因的3′端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL6,转染Hela细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染48 h,融合蛋白EGFP-UL6主要定位在胞浆,为进一步研究伪狂犬病病毒Ea株UL6基因的结构和功能奠定了基础。