摘要：目的了解临床师资对全科医师规范化临床培训基地建设的满意度,并探讨其影响因素。方法于2015年9—12月,以云南省全部6家全科医师规范化临床培训基地的共235例教师为研究对象。以《住院医师规范化培训基地认定标准(试行)》全科专业基地认定细则为依据,自行设计调查问卷,主要内容包括教师的基本情况、参加培训情况、基地对教师的遴选制度和福利待遇、对临床培训基地建设的满意度评价,其中教师对临床培训基地建设的满意度评价包括教学设施、临床技能培训中心、基地管理制度、教学管理制度4个维度。采用多元线性回归分析探讨教师对临床培训基地建设满意度的影响因素。结果共回收有效问卷225份,问卷有效回收率为95.7%。教师对临床培训基地建设的总体满意率为19.1%(43/225),对教学设施、临床技能培训中心、基地管理制度、教学管理制度的满意率分别为20.4%(46/225)、22.2%(50/225)、22.7%(51/225)、8.4%(19/225)。不同年龄、职称、从事全科医师培训教学工作时间,是否参加过培训、是否参加过管理相关培训、是否参加过全科医学相关培训,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜、是否为教师提供带教津贴、是否为教师提供全科相关培训机会的教师对临床培训基地建设的总体满意度得分比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同职称、从事全科医师培训教学工作时间,是否参加过培训、是否参加过管理相关培训、是否参加过全科医学相关培训的教师对教学设施的满意度得分比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同职称、从事全科医师培训教学工作时间,是否参加过培训、是否参加过管理相关培训、是否参加过全科医学相关培训,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜、是否为教师提供带教津贴、是否为教师提供全科相关培训机会的教师对临床技能培训中心的满意度得分比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、从事全科医师培训教学工作时间,是否参加过培训、是否参加过全科医学相关培训,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜、是否为教师提供带教津贴、是否为教师提供全科相关培训机会的教师对基地管理制度的满意度得分比较,差异有统计学意义(P<0.05);是否参加过培训、是否参加过管理相关培训、是否参加过全科医学相关培训,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜、是否为教师提供带教津贴、是否为教师提供全科相关培训机会的教师对教学管理制度的满意度得分比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示:职称、从事全科医师培训教学工作时间,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜是教师对临床培训基地建设总体满意度得分的影响因素(P<0.05);职称是教师对教学设施满意度得分的影响因素(P<0.05);职称、所在基地是否对教师职称晋升等有政策倾斜是教师对临床技能培训中心满意度得分的影响因素(P<0.05);年龄、从事全科医师培训教学工作时间,所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜是教师对基地管理制度满意度得分的影响因素(P<0.05);所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜是教师对教学管理制度满意度得分的影响因素(P<0.05)。教师对教学设施(X11)、临床技能培训中心(X12)、基地管理制度(X13)、教学管理制度(X14)的满意度对总体满意度(Y)影响的回归方程为:Y=21.887+8.128X11+11.763X12+10.730X13+13.412X14。结论临床师资对全科医师规范化临床培训基地建设的满意度偏低,尤其是对教学管理制度;教师的职称、从事全科医师培训教学工作时间,以及所在基地是否有对教师的遴选制度和标准、是否对教师职称晋升等有政策倾斜是其影响因素。建议严格按照国家出台的相关政策,积极推进临床培训基地建设的规范性和完整性。

摘要：自噬是细胞固有的一种降解机制,在生物体的生长、发育以及感染免疫、衰老、死亡等过程中发挥重要作用。进行家蚕细胞自噬相关蛋白基因的克隆和重组蛋白表达,分析细胞自噬相关蛋白在5龄幼虫不同组织的表达水平和同一组织中随5龄发育时间的表达变化,有助于从分子水平了解家蚕细胞自噬的功能。根据GenBank登录的家蚕细胞自噬相关蛋白基因Atg8（BmAtg8）的序列设计引物,以家蚕5龄幼虫中肠cDNA为模板克隆了BmAtg8的354 bp编码区序列,并成功将其连入pET32a（＋）质粒中。将重组质粒转化*** Rosseta菌株继而诱导表达重组BmATG8蛋白,将该蛋白质纯化后强化免疫新西兰大白兔3次,获得效价达1∶512 000的多克隆抗血清。以此多克隆抗体杂交家蚕组织总蛋白,检测到BmATG8及其与磷脂酰乙醇胺偶联的BmATG8-PE 2条免疫印迹条带。Western杂交表明BmATG8蛋白在家蚕5龄第2天幼虫丝腺、中肠和脂肪体中的表达水平较高,其中在5龄第1～2天和第7～8天丝腺组织的表达水平较高,说明家蚕5龄幼虫这3个组织尤其是这2个时间段的丝腺组织中细胞自噬活性极高,反映出家蚕变态发育前这些组织器官细胞内的代谢活动旺盛。

摘要：建立了武汉轻轨桥梁的三维有限元模型,对普通钢筋采用一种分层的等效方法,对预应力钢筋采用修正的等效载荷法.将结构要素都纳入到有限元模型中,计算了几种典型工况作用下轻轨桥梁的应力和变形,并对计算结果进行了详细的分析和对比.验证了该桥梁的安全性,提出了对于该桥梁设计及三维有限元方法应用于轻轨桥梁设计的一些建议.

摘要：目的初步建立树鼩生化与微卫星标记检测法.方法参考近交系小鼠、大鼠生化遗传标记检测方法,对树鼩某些同工酶进行活性测定.根据树鼩特异DNA序列,合成引物,扩增树鼩基因组DNA.结果树鼩Es-1,Trf,Akp-1,Ce-2四个生化位点呈遗传多态性,而Es-3生化位点无遗传多态性;所选的11个微卫星DNA位点中,有9个具有高度多态性,2个微卫星DNA多态性较差.结论初步建立了树鼩生化及微卫星标记的方法,为深入研究树鼩的遗传背景积累了基础资料.

摘要：本文概述了中国核动力研究设计院(以下简称"核动力院")进行"华龙一号"反应堆及一回路系统自主创新的历程,介绍了主要研发内容和设计方案,包括堆芯设计、一回路系统设计、主设备设计、事故预防和缓解措施、安全分析等,展示了"华龙一号"作为三代核电技术的安全性、经济性和先进性。

摘要：目的探讨树鼩的采血方法,提高树鼩实验的成功率。方法随机将50只树鼩分为五组（每组10只）,分别使用不同采血法,比较它们的成功率。眼眶后静脉丛的采血法,前腔静脉采血（靠近气管至锁骨窝处进针）,心脏穿刺采血法（倒数第4～5肋间刺入）,股动静脉采血法（在股动静脉处向心端1～3 mm处为最佳穿刺点）和尾尖采血方法。结果眼眶后静脉丛的采血30次,成功率100%;前腔静脉采血30次,成功29次,成功率98.7%;心脏穿刺采血30次,成功率98.7%;股动、静脉采血30次,成功23次,成功率76.7%;尾部采血30次,成功率100%。结论眼眶后静脉丛采血法适用于取血量大的实验,不易溶血,不损伤器官;股动、静脉采血不会出现因操作不当造成的气栓与瘀血,有利于病理组织学检查。几种方法各有优缺点,应根据不同的实验设计和要求来选择不同的采血方式。

摘要：小麦籽粒中高分子量麦谷蛋白的含量与小麦的品质密切相关。通过Blast检索和生物信息学分析设计小麦高分子量麦谷蛋白亚基基因Dx5的特异引物,以优质小麦济麦20基因组DNA为模板,通过PCR扩增后测序,获得长度为2 619 bp的序列。生物信息学分析表明其开放阅读框长度为2 520 bp,编码839个氨基酸残基,与GenBank数据库中的Dx5蛋白质一致性最高达到99%,且具有高分子量麦谷蛋白亚基结构域。该序列命名为JMDx5,提交GenBank数据库后被接收,登录号为KJ144185,为后续研究其表达机理及改良小麦品质奠定了基础。

摘要：【目的】构建用于解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)pyr R基因敲除的温敏型敲除载体,为研究pyr R蛋白缺失对胞苷合成的影响奠定基础。【方法】设计并合成含有限制性内切酶酶切位点的引物,以解淀粉芽孢杆菌基因组DNA为模板,利用PCR分别扩增pyr R基因的上游同源序列和下游同源序列,再定向克隆至含卡那抗性基因的p KS1温敏型载体上,构建敲除载体p KS1-pyr R。【结果】经特异性引物对pyr R-S1/pyr R-A1和pyr R-S2/pyr R-A2扩增,获得解淀粉芽孢杆菌目的DNA片段pyr R-up和pyr R-down,大小约500 bp;目的片段经克隆载体p MD19-T连接、Trans1-T1转化,获得的重组质粒分别以Kpn I/Hind III、Pst I/Not I双酶切鉴定和测序后,可获得大小约500 bp的上、下游克隆载体T-pyr R-up和T-pyr R-down。上游克隆载体T-pyr R-up经Kpn I与Hind III双酶切及T4 DNA连接、Trans1-T1转化后,进行重组载体检测和质粒双酶切鉴定,得到大小分别为433、5064 bp的片段,与连接长度一致,构建获得带标记基因的重组载体p KS1-pyr R-up。采用Pst I和Not I对T-pyr R-down和p KS1-pyr R-up同时进行双酶切,经连接、转化、双酶切鉴定后,得到两条长度分别为446和5497 bp的片段,与连接前长度一致,证明pyr R的上、下游同源臂已正确插入到p KS1载体中,获得敲除载体p KS1-pyr R。【结论】构建的解淀粉芽孢杆菌pyr R基因敲除载体p KS1-pyr R可用于研究敲除pyr R基因及pyr R蛋白缺失对胞苷过量合成的影响。

摘要：目的利用慢病毒载体构建长链非编码RNA lnc-GCLC-1沉默的稳转L02肝细胞株,为研究lnc-GCLC-1功能提供基础。方法以lnc-GCLC-1为靶点,设计并合成4组双链发卡结构,分别与慢病毒载体psi-LVRH1GP连接构成重组质粒;转化感受态细胞获取大量重组质粒后电泳、测序鉴定;通过瞬时转染筛选出2个有效的短发卡RNA(sh RNA);将重组质粒转染293T细胞后,收集病毒液并感染L02细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株。利用荧光显微镜观察细胞绿色荧光情况以检测转染效果,采用Real-time PCR鉴定转染细胞株,并检测lnc-GCLC-1沉默对GCLC m RNA表达的影响。结果电泳及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;sh RNA-2和sh RNA-4是有效的sh RNA;用0.5μg/ml嘌呤霉素成功筛选出稳定低表达L02细胞株;在sh RNA-2和sh RNA-4稳定转染L02细胞株中,lnc-GCLC-1的表达水平均低于阴性载体组(P<0.05),沉默效率分别为21.3%和64.82%;sh RNA-2组和sh RNA-4组GCLC的m RNA表达量均低于阴性载体组(P<0.01)。结论本研究成功构建了lnc-GCLC-1沉默稳转L02细胞株。

摘要：目的建立敏感、科学、实用的消化内科护理质量敏感性指标评价体系,为消化内科护理质量评价提供参考依据。方法通过文献查阅法和专家访谈法,在循证基础上初步建立消化内科专科护理质量敏感性指标体系草案,并且设计专家函询问卷表。通过德尔菲专家咨询法(Delphi法)以电子邮件或见面的形式向专家发放函询问卷表,收取第1轮函询问卷表后,根据专家的意见及指标筛检标准对部分条目进行删除、扩展和修改,形成第2轮函询问卷表,经过2轮专家函询,对数据进行统计分析,最终确定消化内科专科护理质量敏感性指标评价体系。结果 2轮函询中,问卷回收率分别为93%、100%,权威系数分别为0.854、0.866,第2轮函询后全部指标重要性评分、可操作性评分及计算公式合理性评分均数均>4,变异系数为0.10~0.18,专家认同度均≥90%,构建了24项消化内科护理质量敏感性评价指标体系。结论构建的消化内科护理质量敏感指标评价体系具有较高的科学性和可靠性,为护理管理者进行消化内科护理质量评价提供客观、可量化的依据。