摘要：目的对2002年分离自广州登革热患者的1型登革病毒GZ2002株进行全基因组序列测定及分析,为探讨其来源和基因组特征提供依据。方法利用C6/36细胞增殖GZ2002株,出现典型细胞病变后收集感染细胞及病毒液提取R NA。根据5株登革病毒1型标准株AY145123、FJ176780、FJ176779、DVU88536、EF025110全序列设计6对相互覆盖的引物。采用R T-PCR法扩增覆盖GZ2002株基因组全长的6个cDNA片段,并将其分别克隆到pMD-18T载体上,通过序列测定和重叠序列拼接获得全基因组序列。结果 GZ2002株基因组全长10 735 nt,单一阅读框长10 176 nt,推测编码3 392个氨基酸,5'及3'-UTR分别为94 nt和462 nt,无显著的密码子偏嗜性。GenBank登录号:JN205310。系统进化分析显示GZ2002株属于DENV-1型基因IV型。比较不同致病性的DENV-1型毒株发现,随DENV毒株致病力的增强,编码区氨基酸突变位点明显增多。GZ2002株、泰国16007株、柬埔寨株及印度尼西亚98901530株的5'-UTR二级结构高度保守,3'-UTR分析显示强毒力泰国16007株与柬埔寨株均存在高突变区。结论 GZ2002株属于DENV-1型基因IV型,可能与1998年印度尼西亚DENV-1流行株相关,编码区株特有氨基酸变异位点及3'-UTR高突变区的生物学意义值得进一步探讨。

摘要：【目的】本文探明了根区内不同施肥空间对植烟土壤有效磷含量和烤烟磷素吸收、利用的影响。【方法】试验在田间条件下,设置T1(对照)、T2(直径15 cm)、T3(直径20 cm)、T4(直径25 cm) 4个处理,烤烟品种为云烟87,小区试验设计,3次重复。【结果】土壤有效磷含量T2、T3和T4处理在耕层5 cm处有效磷的含量低,随施肥距离增加到10～15 cm时而显著提高,而T1处理土壤有效磷含量分布较均匀,不同的空间施肥处理的效果要高于对照处理,说明不同空间施肥明显改善了磷素养分的供应状态;烟株根部磷含量在烤烟成熟期,T4处理的空间施肥会显著提高烤烟根部的积累量,其他烤烟生长发育时期,不同空间施肥对烤烟根部磷积累无明显的影响;地上烤烟磷积累量,移栽后第13～17周,各处理磷积累量T4> T2> T1> T3,方差结果显示T4处理与其他处理差异显著,说明T4处理的空间施肥可以显著提高烤烟总磷积累量。【结论】综合土壤有效磷积累量,地上、地下磷积累量可知,T4空间施肥是提高磷素积累的最适处理。

摘要：生长习性是影响花生种植密度的重要因子,与株型育种及产量高度相关。花生突变体A38来自匍匐型高油酸品种SunOleic 97R的EMS诱变,其株型直立,且高抗花生晚斑病。本研究以该突变体A38与其野生型SunOleic 97R杂交构建的F 1、F2群体为材料,开展了A38的表型鉴定及其生长习性的遗传分析。与匍匐型的SunOleic 97R相比,突变体A38的生长习性为直立型,所有F 1植株表现半匍匐表型,F2分离群体中直立、半匍匐和匍匐的分离比例比符合1∶2∶1。表明A38的直立突变表型受单隐性核基因控制,匍匐对直立为不完全显性。研究结果将为下一步控制花生生长习性基因的克隆、株型的分子设计育种改良奠定基础。

摘要：目的异源表达幽门螺杆菌HpPrtC胶原蛋白酶,并检测其对胶原蛋白的降解活性。方法根据幽门螺杆菌基因组信息中编号hp0169基因的序列设计引物,PCR扩增HpPrtC基因的核苷酸序列,经NdeI和XhoI酶切后构建原核表达载体pET-22b(+)-HpPrtC,转化至*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达后采用亲和层析法纯化重组蛋白,通过检测重组酶处理胶原蛋白后L-亮氨酸的产生量表征其胶原蛋白降解活性。结果 HpPrtC基因编码422个氨基酸,与已知PrtC家族蛋白酶氨基酸序列比对最高相似性<40%。克隆HpPrtC基因连接入表达质粒pET-22b(+),将测序正确的表达质粒pET-22b(+)-HpPrtC转化至感受态细胞BL21(DE3),经IPTG诱导表达相对分子质量约为47×103的可溶性蛋白,与预期相符。经亲和层析纯化后的重组蛋白酶降解热变性I型胶原蛋白(可溶、不可溶)和天然I型胶原蛋白的活性分别为922.2±36.2、1168.8±65.6和674.0±13.4,与幽门螺杆菌培养液中胶原蛋白酶对可溶热变性I型胶原蛋白、不可溶热变性I型胶原蛋白和天然I型胶原蛋白活性分别为205.6±21.5、228.4±19.3和123.2±14.5一致。结论幽门螺杆菌定植因子HpPrtC为胶原蛋白酶。通过大肠埃希菌异源表达的重组HpPrtC蛋白具有胶原蛋白酶解活性,为探索该酶在幽门螺杆菌感染定植中的作用机制奠定了基础。

摘要：评估档案的规范化建设与管理是开展高校教学评估的重要基础和依据,为了更好地发挥评估档案在评估中的重要作用,必须转换观念.利用网络信息技术,使评估档案管理信息化、规范化、自动化.本文将介绍基于.NET环境下高校本科教学评估档案管理系统的设计方案与思路.

摘要：在现代城市规划研究中,聚焦人的信息的深度分析至关重要.采用有效的视频分析技术处理和分析监控视频可以极大地扩充行人信息的基础数据,对城市量化研究具有重大意义.该研究方法通过拍摄一段时期同一街道视频进行相应的处理.采用基于前向传播卷积神经网络模型的深度学习方式检测视频中指定监测区域的行人.为确保行人信息的准确性,故对检测到的行人进行跟踪处理,同时添加跟踪目标丢失判断及相应处理.最后量化行人数量、运动方向、滞留时间以及运动速度等信息数据,进行相应的数据分析.实验结果表明该研究方法能有效的实现量化行人信息数据,为城市定量化研究提供准确有效的数据支撑.

摘要：目的建立小鼠骨髓源树突状细胞的体外扩增方法并研究树突状细胞的相关特征。方法根据不同时期树突状细胞的粘附性质不同,设计简便的树突状细胞的体外扩增和纯化方法,并利用瑞氏染色和流式细胞仪(FACS)鉴定其生物学特征。结果体外培养24 h后,可见增殖性细胞集落,3 d后集落增多明显,体外培养7 d,收集悬浮细胞即为DC。光镜显示细胞表面不规则,呈树突状突起,瑞氏染色嗜碱性。流式细胞鉴定为髓系DC,高表达MHCⅡ类分子及共刺激分子(CD40、CD80、CD83、CD86)。结论此简便方法制备的树突状细胞具有髓系树突状细胞的生物学特性,及较高的纯度,可广泛的应用于临床及实验研究。

摘要：为了对当前爆发流行的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒建立快速准确的检测方法,根据该类病毒在Nsp2基因1594-1680处缺失87个碱基的特点,设计了一对特异性引物和一个Taqman探针,通过对反应条件的优化,建立了荧光定量PCR检测方法。该方法特异性强,灵敏度高,能很好地区分高致病性猪繁殖与呼吸系统综合症病毒和其它病毒,没有发现假阳性和假阴性现象,检测病毒滴度达到1TCID50。用该法对38份疑似样本进行检测,阳性率60.5%,与常规PCR检测法符合率100%。

摘要：为研究海南霉素钠预混剂在鸡体内的药代动力学特征和生物利用度,将16只健康AA鸡随机分成2组,每组8只,采用平行试验设计对两组鸡分别进行单剂量口服给药和静脉注射给药药动学研究,给药量均为1.5 mg/kg bw(相当于7.5 mg/kg混饲给药)。按预定时间点采集血样,血样中海南霉素的含量采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定,流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(90:10,V/V)。实测血药浓度-时间数据使用Winnonlin 5.2药动学分析软件拟合药动学参数。鸡口服给药的药动学参数如下:平均消除半衰期为(T1/2β)约为30.44 h,平均滞留时间(MRT)约为36.40 h,在血浆中的达峰时间(Tmax)约为0.5 h,达峰浓度(Cmax)约为68.87 ng/mL,平均药时曲线下面积(AUC)约为654.95 ng·h/mL,平均生物利用度(F)约为32.82%。鸡静脉注射给药的药动学参数如下:平均消除半衰期约为(T1/2β)为46.40 h,平均滞留时间(MRT)约为30.91 h,平均血浆清除率(CL)约为1.59 L/(kg·h),平均表观分布容积(Vd)约为116.05 L/kg。结果表明海南霉素进入鸡体后分布广泛,消除缓慢,半衰期长;口服海南霉素钠预混剂吸收迅速,但吸收不完全。

摘要：研究了铁尾矿砂、浮石、粉煤灰陶粒对轻骨料混凝土抗压强度、劈裂抗拉强度、弹性模量和干表观密度的影响,并利用Design-Expert软件对配合比进行了优化。结果表明:随着粉煤灰陶粒相对掺量的增加,轻骨料混凝土的力学性能提高,干表观密度增大;随着浮石相对掺量的增加,轻骨料混凝土的力学性能降低,干表观密度减小;随着砂率的增大,轻骨料混凝土的干表观密度增大,且当砂率为40%时,轻骨料混凝土的力学性能达到最佳;Design-Expert软件优化结果表明,当粉煤灰陶粒与浮石的质量比为3.13、砂率为36%时,可制备出力学性能较优且干表观密度较低的轻骨料混凝土。