摘要：目的建立过表达人干细胞因子(stem cell factor,SCF)受体c-kit基因突变小鼠红白血病HCD57细胞株,以应用于抗癌小分子药物筛选。方法以带有人c-kit-D816V基因突变质粒为模板,设计并合成引物,PCR扩增c-kit基因,逆转录病毒载体用限制性内切酶EcoRⅠ进行单酶切,采用同源重组法构建pMSCV-c-kit-D816V表达载体。采用酶切和基因测序对重组质粒进行鉴定。利用Lipofectamine 3000将重组质粒和辅助质粒共转染GP2-293细胞进行病毒包装。在荧光显微镜下观察转染效果,收集、浓缩病毒上清液。将制备好的逆转录病毒感染HCD57细胞,采用甲基纤维素半固体培养基筛选单克隆稳定转染细胞株,采用流式细胞术鉴定c-kit基因表达。采用CCK-8法进行小分子靶向药物筛选实验。结果酶切鉴定结果显示,电泳后重组质粒单酶切后可见约为693、2250和6488 bp大小的3条DNA条带,与载体及c-kit基因片段大小相符;DNA测序结果显示,c-kit基因成功插入到逆转录病毒表达载体中。流式细胞术检测结果显示,感染后的HCD57单克隆细胞株高表达C-kit蛋白。CCK-8细胞增殖实验显示,伊马替尼对HCD57-c-kit-D816V细胞的生长无明显抑制作用,帕博西尼、达沙替尼、艾德拉尼均对HCD57-c-kit-D816V细胞抑制作用明显。结论逆转录病毒载体介导C-kit蛋白稳定表达的HCD57细胞系构建成功,药物初筛实验成功,可用于抗癌小分子药物筛选实验。

摘要：目的利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR定性检验鼠疫样本材料,分析实验结果的差异。方法选取鼠疫菌质粒上的毒力基因caf1及染色体上的标识序列YP-LC为靶序列设计引物,利用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术定性检测鼠疫样本,通过统计软件SPSS 21.0分析不同引物、不同浓度的模板DNA,Ct值的差异。结果SYBR GreenⅠ荧光定量PCR定性检测感染不同浓度的鼠疫耶尔森菌的脏器材料,感染浓度越大,Ct值越小(t=26.817、27.782,P=0.003、0.005,均0.05),但以caf1为引物对应的Ct值较以YP-LC为引物对应的Ct值重现性好,数据稳定。结论不同脏器之间,肝脏的Ct值较脾脏的Ct值数据稳定,重现性好。不同引物之间,以fra为引物的Ct值较以YP-LC为引物的Ct值重现性好,数据稳定。

摘要：目的:克隆树鼩白细胞介素6(IL-6)基因,在大肠杆菌中高效表达、纯化,并鉴定免疫原性。方法:根据GenBank预测的树鼩IL-6基因序列设计引物并扩增基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建的重组表达质粒pET-30a(+)-IL-6转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经Ni柱纯化后,Western印迹和ELISA检测其免疫原性,并检测不同组织中IL-6的分布情况。结果:酶切及测序证实重组表达质粒pET-30a(+)-IL-6构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为29×10~3,纯化后复性的重组蛋白纯度可达95%以上,免疫兔子后Western印迹和ELISA鉴定其具有免疫原性,在气管、心、脾、肾中能检测到IL-6。结论:在大肠杆菌中高效表达了重组树鼩IL-6,纯化复性后具有良好的免疫原性。

摘要：研究香蕉皮单宁对大肠杆菌的抑菌机理,为香蕉皮的高效利用以及新型食品生物抑菌剂的开发提供理论基础。采用二倍稀释涂布平板法测定香蕉皮单宁对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。通过测定菌液中碱性磷酸酶(AKP)、核酸和葡萄糖等含量变化,反映菌体细胞壁完整性、细胞膜完整性、消耗糖量变化,以此为指标对抑菌机理做出初步分析。香蕉皮单宁对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为2.5mg/m L。菌液中碱性磷酸酶(AKP)前后含量无明显变化;菌液中核酸存在明显差异,1MIC实验组是对照的两倍。香蕉皮单宁通过破坏细胞膜的完整性发挥抑菌作用。

摘要：患者,男,50岁,因右侧三踝骨折内固定术后骨性愈合需取出内固定2021年3月20日就诊于广东省中医院珠海医院。入院后,在腰麻下行右外踝骨折术后钢板螺钉取出术并在3D打印体表导板下行右内踝空心螺钉取出术。步骤与过程如下:①在右内踝前后侧的体表贴3片环形的金属垫片(避开空心螺钉导孔),并标记其位置,然后带着体表垫片行CT扫描并三维重建。②利用CT数据及软件建立体表基底导板,并在3个垫片孔位置设计3个定位孔,再根据空心螺钉的方向和位置设计出2个内直径2.0 mm、外直径3.5 mm的导孔套筒,导孔套筒与空心螺钉方向完全一致,将导孔套筒和体表基底导板联合后建立最终导板,术前消毒备用。

摘要：目的 :优选桃花止泻冲剂中干姜的最佳提取工艺。方法 :通过正交设计试验 ,以挥发油提取量为考察指标 ,探讨干姜挥发油最佳提取工艺。结果 :最佳提取工艺条件为 :干姜粉碎度为 2 mm,0 .5kg药材加水 6L,提取 9h。结论

摘要：目的开发克拉霉素片的处方工艺。方法将pH 6.8磷酸盐缓冲液介质溶出曲线作为考察指标,利用全析因设计和单因素设计等试验方法,对克拉霉素片处方中原料粒径、辅料用量进行筛选研究,同时对制备工艺参数进行相关研究。结果利用筛选研究后的处方工艺制成片剂,根据体外溶出曲线测试表明,自制制剂与参比制剂在测试的各种介质中均溶出行为相似。结论筛选出了适宜的原料药粒径范围、崩解剂总比例和崩解剂内外加比例以改善克拉霉素片的溶出度,经过大量的处方和工艺筛选研究,确定了处方工艺稳定可控、适合商业化生产的制备方法。

摘要：目的评价七叶神安滴丸治疗气虚型失眠症的有效性和安全性。方法采用区组随机、双盲单模拟、安慰剂平行对照、多中心、优效性试验设计方法。将288例失眠患者以3∶1的比例随机分为试验组(216例)和对照组(72例)。试验组口服七叶神安滴丸,对照组口服安慰剂,6丸/次,3次/d。完成4周治疗后,通过失眠严重指数量表(ISI)治疗前后变化评价其有效性,通过生命体征、不良事件、实验室检查及体格检查评价药物安全性。结果治疗4周后,治疗后全分析集(FAS)中试验组的ISI评分显著低于对照组分(P<0.0001)。符合方案集(PPS)中试验组的ISI评分同样显著低于对照组(P<0.0001),PPS与FAS结果分析一致。治疗后试验组FAS集总有效率是85.64%,对照组是38.24%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。试验组PPS集总有效率为88.11%,对照组是38.71%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),PPS与FAS结果分析一致。试验组共发生17例次不良事件,对照组共发生3例次不良事件,经评定与药物无关。结论七叶神安滴丸治疗气虚型失眠症疗效确切,能够改善失眠患者的失眠严重程度,且安全性良好。

摘要：锦屏深地核天体物理(JUNA)实验项目将利用中国锦屏深地实验室(CJPL)的良好条件,在天体物理伽莫夫能量窗口开展核天体关键反应^(25)Mg(p,γ)^(26)Al、^(19)F(p,α)^(16)O、^(13)C(α,n)^(16)O和^(12)C(α,γ)^(16)O的直接测量,为理解恒星演化和元素起源提供新的数据。目前,已经在地面上对加速器装置、束流稳定性、靶、探测器以及电子学进行了系统的测试。地面实验内容包括高纯锗探测器效率刻度,^(25)Mg(p,γ)^(26)Al在304 keV的共振强度测量,^(19)F(p,δ)^(16)O的截面测量,聚乙烯作为慢化体的中子探测器的设计、加工和效率刻度,靶的设计和稳定性检测等。JUNA项目整体进展顺利,地面实验已取得一系列关键进展和初步成果。在不远的将来,JUNA项目将有序开展地下实验,完成设定目标,也将促进更广泛的国际合作,助力于天体演化中的若干重大科学问题的解决。