摘要：本文探讨了HACCP质量管理体系(Hazard Analysis and Critical Control Point,危害分析与关键控制点)在郫县豆瓣生产及储运环节中的应用,对郫县豆瓣生产及储运过程中可能产生影响产品质量与安全的危害进行分析,确定相应的关键控制点,并制定相应纠偏措施,以保证郫县豆瓣的质量与安全。

摘要：背景:人角质化细胞生长因子2具有广泛的生理功能,在胚胎发育、组织的修复、神经的再生、血管的生成和肿瘤发展中具有重要作用。目的:克隆人角质化细胞生长因子2基因,于大肠杆菌中表达,并检测其生物学活性,为进一步开发提供实验依据。设计:开放性实验。单位:中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。材料:实验于2000-09/2002-05在中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室完成。pBV220温控表达载体为病毒基因工程国家重点实验室构建,EcoRⅠ、BamHⅠ、T4DNA连接酶(Promega公司);人角质化细胞生长因子2特异性聚合酶链反应引物(上海博亚生物技术有限公司合成);肝素-SepharoseCL-6B(Pharmacia公司);快速聚合酶链反应产物纯化试剂盒、总RNA提取Trizol试剂盒、反转录-聚合酶链反应试剂盒(GIBCO公司);质粒DNA快速提取试剂盒(博大公司);BL-21-codonpluscompentcells(Stratagene公司)。方法:用高表达菌株BL-21-codonpluscompententcells表达重组人角质化细胞生长因子2蛋白并初步纯化和检测其活性。通过反转录-聚合酶链反应从自然流产胎儿肺组织中钓取人角质化细胞生长因子2cDNA,将其克隆入pBV220载体质粒。在大肠杆菌BL-21-codonpluscompentcells中表达人角质化细胞生长因子2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化,以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。主要观察指标:人角质化细胞生长因子2cDNA的片段长度和序列,人角质化细胞生长因子2基因在大肠杆菌中的表达,纯化人角质化细胞生长因子2的活性。结果:人角质化细胞生长因子2cDNA片段大小约500bp,人角质化细胞生长因子2蛋白在BL-21中得到高效表达,于上清中可溶性表达,SDS-PAGE显示相对分子质量约20000;人角质化细胞生长因子2蛋白对NIH3T3细胞具有显著的促有丝分裂活性,1,5,10μg/L人角质化细胞生长因子2A值(490nm)高于空白对照组,差异有非常显著性意义(分别为0.174±0.022,0.220±0.029,0.306±0.050,0.066±0.004,P<0.001)。结论:成功克隆人角质化细胞生长因子2基因,并于大肠杆菌BL-21中得到高效表达;纯化的人角质化细胞生长因子2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖,具有显著的促有丝分裂活性。

摘要：目的:用于负链RNA病毒的重组技术称为反向遗传技术,其核心需要构建一个具有双向启动子的反向遗传通用载体,可以分别正向转录翻译病毒复制所需酶系和负向转录病毒负链RNA。为此,构建负链RNA病毒反向遗传通用的载体。方法:为提高转染和表达效率,首先改造pcDNA3载体,通过酶切删除pcDNA3载体中非必需序列,在保留Amp抗性的前提下,通过酶切去除pcDNA3载体中非必需的Kan抗性表达盒与CMV启动子前区。利用长引物合成含有反向poli启动子与多克隆位点的基因片段。将合成后的片段酶切、补平粘端、连接,反向插入至经改造后的pcDNA3载体中,构建反向遗传通用表达载体。采用PCR检测、酶切鉴定以及DNA测序进行验证。结果:PCR检测、酶切鉴定以及DNA测序结果表明,载体构建正确,合成及插入序列与预期设计完全一致。结论:成功构建具有CMV与poli双向启动子的反向遗传通用载体,为建立负链RNA病毒反向遗传平台提供了研究基础。

摘要：为观察微小隐孢子虫P23基因真核重组质粒在He La细胞中的表达及免疫小鼠血清抗体产生情况,通过设计特异性引物,利用PCR技术,对微小隐孢子虫卵囊基因组DNA进行P23基因扩增;将扩增产物插入真核表达载体p VAX-1中,构建重组真核表达质粒p VAX1-P23,转染He La细胞,运用间接免疫荧光法及Western-blot技术,验证重组质粒在He La细胞中的表达情况;将重组质粒p VAX1-P23免疫小鼠,用间接EliSA检测小鼠血清特异性抗体产生情况。结果显示,成功地扩增了长度约为336 bp的微小隐孢子虫P23基因;双酶切和序列测定结果显示,构建的真核重组表达质粒p VAX1-P23中外源基因序列和插入位置正确;间接免疫荧光法及Western-blot分析显示,p VAX1-P23真核重组表达质粒在He La细胞中被成功表达;小鼠免疫重组质粒2周后,即可检测到抗体产生,直至第8周试验结束。结果表明成功地构建了真核重组表达质粒p VAX1-P23,该重组质粒能在He La细胞和小鼠体内表达,并诱导小鼠产生显著的体液免疫反应,为进一步开展隐孢子虫P23蛋白特性研究、研制抗隐孢子虫病核酸疫苗奠定了基础。

摘要：背景:椎弓根螺钉技术是目前脊柱固定融合最常用的方法。为减少螺钉松动和拔出等并发症,研究人员在螺钉设计等方面进行了不断探索。目的目的:比较单螺纹和双螺纹椎弓根螺钉应用于腰椎内固定术时的螺钉抗拔出力。方法方法:78例行腰椎椎弓根螺钉固定术的患者随机分为两组,所有患者术前均测量髋部骨密度和腰椎骨密度。一组在术中植入单螺纹椎弓根螺钉,另一组则植入双螺纹椎弓根螺钉,测量拧入每枚螺钉时的最大扭矩(以下简称"螺钉扭矩"),比较两组患者的骨密度和螺钉扭矩。结果结果:单螺纹螺钉组患者40例,术前髋部骨密度T值-1.82±0.57,腰椎骨密度T值-2.17±0.77,术中共植入单螺纹椎弓根螺钉150枚,螺钉扭矩(1.03±0.39)Nm。双螺纹螺钉组患者38例,术前髋部骨密度T值-1.90±0.62,腰椎骨密度T值-2.34±0.81,共植入双螺纹椎弓根螺钉150枚,螺钉扭矩(1.45±0.39)Nm。两组患者术前骨密度无明显差异(P>0.05),双螺纹螺钉组的螺钉扭矩显著高于单螺纹螺钉组(P<0.001)。结论结论:相较于单螺纹椎弓根螺钉,双螺纹椎弓根螺钉应用于腰椎内固定术可增加螺钉的抗拔出力。

摘要：对直投式功能菌剂发酵蔬菜技术进行了研究。研究表明,采用直投式功能菌剂生产发酵蔬菜发酵周期短,发酵效果好。葡萄糖为直投式菌粉发酵蔬菜的碳源,葡萄糖添加量为3%;直投式功能菌剂的添加量为0.2%;发酵温度为30℃,食盐浓度为6%,产酸达0.63%,发酵蔬菜发酵时间为4d。

摘要：对某矿区铜镍贫矿堆场矿样进行选矿试验研究,试验先采用选矿厂生产流程,乙基黄药、丁铵黑药作为浮选药剂,碳酸钠作为调整剂;试验指标为:原矿镍品位0.91%、原矿铜品位0.51%,精矿镍品位5.09%、精矿镍回收率72.23%;精矿铜品位2.71%、精矿铜回收率69.00%。然后对浮选药剂进行了优化试验,乙基黄药、Y89混合药剂与丁铵黑药作为浮选药剂;磨矿添加了碳酸钠、硫酸铜、硫化钠,试验指标为:原矿镍品位0.91%、原矿铜品位0.55%,精矿镍品位5.61%、精矿镍回收率73.91%;精矿铜品位3.38%、精矿铜回收率74.25%。

摘要：秦山核电厂330 MW级核电机组设计寿命30年,机组1991年12月并网发电。2018年,为配合核电机组延寿工作,秦山核电厂开展了发电机增容改造工作。原双水内冷发电机铭牌功率为330 MW,经过改造提升至350 MW。文章从发电机定、转子两方面分析,介绍发电机改造中的定转子改造工艺,最终通过改造后的发电机运行效果来证明改造的成功性。

摘要：为建立一种快速、敏感检测迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda）的方法,本研究根据***的促旋酶B亚单位基因（gyr B）保守区设计特异性引物和Taq Man探针,并优化检测反应条件,建立了***的Taq Man实时荧光PCR检测方法。结果显示,该方法仅对***的靶基因扩增呈阳性,而对创伤弧菌、福氏志贺氏菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、单核增生性李斯特菌、肠炎沙门菌、溶藻弧菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157、温和气单胞菌、嗜水气单胞菌、霍乱弧菌等相关致病菌检测结果均为阴性,特异性良好;该方法对***检测的灵敏度为20 CFU/m L;重复性试验表明,该方法的变异系数在0.95%~2.44%之间,具有良好的重复性。本研究结果表明,建立的*** Taq Man实时荧光PCR方法灵敏、快速、特异性强、重复性好,适用于***检疫、疫情监测及流行病学调查。

摘要：研究了直投式菌剂在发酵不同泡菜品种时,泡菜水中总酸、pH值、亚硝酸盐、氨基酸含量的动态变化,结果表明:直投式菌剂在30℃条件下发酵萝卜、豇豆、白菜、青菜,其发酵周期仅为3d-4d,酸度可达0.6g/100mL～0.9g/100mL,pH值3～4,氨基酸含量4mg/mL～7mg/mL,亚硝酸盐含量显著低于泡渍液发酵对照组,最高峰在7mg/Kg～16mg/Kg之间,产品感官质量优良。