摘要：目的建立志贺氏菌实时荧光定量PCR快速方法，探讨在志贺氏菌感染检测和食源性污染监测中的应用价值。方法根据志贺氏菌ipaH基因设计引物和探针，建立实时荧光定量PCR检测志贺氏菌的诊断方法；通过特异度、敏感度、稳定性和重复性，以验证方法的可行性。结果成功构建了志贺氏菌重组质粒标准品，为方法学建立奠定基础；通过特异度、敏感度、稳定性和重复性验证，结果表明具有较好的特异度，最低检测限为10^3 copies／ml，相当于100cfu／ml的菌细胞，并具有良好的稳定性和重复性。结论利用实时荧光定量PCR方法检测志贺氏菌，可直接用于临床粪便中沙门氏菌的快速检测，也可用于分离菌株的鉴定，以及食品、乳品等的检测．对志贺氏菌感染诊断，提高食（乳）品安全的卫生监督检测具有重要的意义。

摘要：参照Digby发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列,设计一对引物,应用RT-PCR技术,从ConA诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性地扩增出大小约为500bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序,结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100%。将该基因插入原核表达载体pGEX-4T-1中构建成重组表达载体pGEX-CHIFN-γ,并将其导入大肠杆菌BL21中,诱导表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,分子量约为43ku,表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核细胞中得到了表达。

摘要：以牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的保守基因5＇-非编码区为参考,设计、优化一对特异的荧光定量PCR引物,应用Smart CycleⅡ分析系统,结合Eva Green荧光染料结合原理,建立一种快速、定量检测牛病毒性腹泻病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为101~106copies/μL,相关系数为R2=0.997,扩增效率为E=0.78。灵敏性比常规PCR高102倍。该方法具有良好的特异性,检测变异系数低于1%。应用本实验建立的方法检测25份不同地区采集的临床症状疑似BVDV感染的牛粪样品,阳性检出率为72%（18/25）,与病毒分离培养和电检观察相比,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,为实验室快速、准确检测BVDV奠定了基础。

摘要：以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为试验菌株,采用酶标比浊法测定双乙酸钠、脱氢醋酸钠、乳酸钠、亚硝酸钠、山梨酸钾、乳酸链球菌素(Nisin)和葡萄糖酸-δ-内酯对2种菌的抑菌效果。在单因素试验的基础上,采用L16(45)正交试验设计确定各因素水平的最佳配比。结果表明:2种腐败菌对不同抑菌剂的敏感程度不同,应复配使用。在双乙酸钠0.9g/L、乳酸钠1.5g/L、Nisin 0.05g/L、山梨酸钾0.020g/L、葡萄糖酸-δ-内酯2.0g/L的条件下对大肠杆菌的抑制效果最好,在双乙酸钠0.9g/L、乳酸钠2.0g/L、Nisin 0.1g/L、山梨酸钾0.015g/L、葡萄糖酸-δ-内酯1.5g/L的条件下对金黄色葡萄球菌的抑制效果最好。

摘要：结合长江河漫滩软土工程特性,通过分析真空联合堆载预压的加固过程,从现场监测数据、原位十字板剪切试验和室内土工试验3个角度,对南京北站迁建工程某施工区域进行了全面的加固效果分析。具体到监测数据方面,地表沉降及孔压数据均表明单真空预压至固结趋稳后再进行堆载可进一步提升土体加固效果;十字板剪切试验结果表明,加固效果随深度递减,与孔压随深度变化规律分析结论一致;室内土工试验数据说明土体物理力学性质在加固后有明显改善。综上所述,真空联合堆载预压对长江河漫滩软土地基加固效果良好,加固效率高,6个月工后固结度可达94.47%,土体强度显著提高。为验证结论的准确性,分别对孔压数据与十字板剪切试验数据、十字板剪切试验数据与室内土工试验数据进行了相互验证,验证结果显示数据较为可靠,加固效果评价的准确度较高。

摘要：目的设计并合成罗氟司特中3,5-二氯-4-氨基吡啶引入的两个杂质3-(环丙甲氧基)-N-(3-氯-5-溴-4-吡啶基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺和3-(环丙甲氧基)-N-(3-氯-4-吡啶基)-4-(二氟甲氧基)苯甲酰胺。方法以4-二氟甲氧基-3-羟基苯甲醛为起始原料经过亲核取代、氧化、酰氯化和酰胺化合成了目标化合物。结果合成了目标化合物,并利用1H-NMR、13C-NMR和MS确证了结构;HPLC归一化法测得样品质量分数分别为98.8%、99.8%。并证明这两个杂质存在于罗氟司特中。结论这两种杂质的合成为罗氟司特中杂质的研究提供了依据。

摘要：为了鉴定分离自甘肃永靖的1株双芽巴贝斯虫Hsp20基因型为一新基因型,参考双芽巴贝斯虫Hsp20核苷酸序列,设计特异性引物。对其进行扩增,利用生物信息学方法对其进行比对分析。结果显示,扩增获得了700 bp的核苷酸片段。与GenBank中公布的18种不同物种的氨基酸序列构建遗传发育树,结果表明本实验获得的双芽巴贝斯虫与美国株和中国新疆株的亲缘关系最近。对其氨基酸序列进行比对分析,发现在第31～85位点存在冗余,与公布的Hsp20氨基酸序列存在明显的差异。通过同源建模分析,发现该冗余致使Hsp20蛋白在第7号位形成1个环形结构,从而引起了第3号位的拉伸。通过生物信息学分析得出,获得的双芽巴贝斯虫甘肃株的Hsp20基因是一新基因型。该基因型的存在为更加准确诊断双芽巴贝斯虫病提供了依据。

摘要：目的鉴定发热伴血小板减少综合征病毒的CD8^(+)T细胞表位,为了解抗病毒免疫机制和疫苗设计提供参考。方法基于生物信息学方法在SFTSV非结构蛋白中预测潜在表位,利用酶联免疫斑点吸附试验、胞内因子染色、四聚体染色验证表位的免疫原性,体外复性试验验证表位与人白细胞分化抗原的结合力。结果NS-3多肽能刺激特异性CD8^(+)T分泌多种细胞因子,且诱导CD107a表达水平升高。康复病例中检测到NS-3表位特异性CD8^(+)T细胞分群。NS-3与HLA-A*3001能稳定结合。结论从SFTSV的NS蛋白中鉴定到首个人源HLA-A*3001限制性CD8^(+)T细胞表位NS-3,为疫苗开发提供依据。

摘要：在关闭煤矿中除煤炭剩余外,还赋存丰富的煤层气、矿井水、地下空间、地热等资源,具有巨大的二次开发潜力。依据全国煤层气、矿井水、地热等资源赋存现状,梳理部分重点关闭煤矿资源的绿色开发与清洁高效利用发展趋势;通过系统介绍集钻探、物探、遥感、计算机等勘查技术于一体的综合勘探体系,总结了其在关闭煤矿资源有效开发利用的地质保障作用,并从资源、环境、技术体系及数据库等七个方面提出关闭煤矿资源开发利用地质保障工作建议。

摘要：目的快速了解职业中学学生对艾滋病核心知识了解情况,为开展艾滋病防治工作提供参考。方法使用网络问卷平台设计简要电子问卷,在现场健康专题讲座前,由同学们使用手机扫描二维码获取问卷进行回答。结果收回问卷94份,有效问卷93份。同学们对艾滋病的直观感受以恐惧、死亡、不治之症、恶心等负向感受为主,占51.76%(44/85);70.97%(44/62)的同学知道艾滋病的性传播途径,66.13%(41/62)的同学能够在性方面提出自己的预防办法,仍有32.26%(20/62)的同学在传播途径与预防办法上存在一定的错误认识;不同性别、不同年龄的同学在对艾滋病的正负向感受、是否知道性传播途径、是否针对性方面提出预防办法上差异均无统计学意义(P>0.05);个别同学提出的感染者的权利与义务、如何面对感染等需求可能是以往健康教育者所易忽视的内容。结论在青年学生中广泛开展规范的性与生殖健康教育及艾滋病专题健康教育必要而紧迫。