摘要：采用乙醇溶液浸提法提取核桃青皮色素,以浸提温度、料液比、乙醇浓度为考察因子进行单因素试验,讨论各单因素对色素提取率的影响;再设计响应面法优化试验,使用Design-Expert 12 Trial软件进行优化,并进行数据的处理和分析。结果表明,优化的色素提取工艺为:浸提温度62℃,料液比1:25(g/mL),乙醇浓度33%;各因素的主次顺序为:乙醇浓度>浸提温度>料液比。按照最佳的工艺条件进行重复试验,经过试验验证得出色素提取率为39.998%。

摘要：目的引入世界卫生组织推广的新生儿早期基本保健技术,探讨适合我国的新生儿早期基本保健服务模式,降低新生儿死亡率、提高母乳喂养率、促进新生儿健康。方法采用临床非随机对照试验设计方法,实验组按照新生儿早期基本保健技术对2000例新生儿进行护理和保健,对照组采用传统新生儿保健模式对2000例新生儿进行护理和保健,观察新生儿Apgar评分、母乳喂养、脐带炎症及脱落时间等指标,比较两组的差异。结果新生儿早期基本保健组与传统保健组相比,新生儿Apgar低评分率、脐带感染率更低,脐带脱落时间更短,新生儿第一次母乳喂养成功率更高,且差异均具有统计学意义(P <0. 05)。结论新生儿早期基本保健模式操作方便简单,值得在其他地区推广。

摘要：为建立通用型和O型口蹄疫病毒(FMDV)二重荧光定量RT-PCR检测方法,本试验根据GenBank已登录的不同亚型FMDV通用序列和O型FMDV序列设计了2对特异性引物和2条Taqman MGB探针,经过反应条件和体系优化,建立了通用型(T型)和O型FMDV的二重荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验;对15份临床疑似样品进行了应用检测。结果表明,成功建立通用型和O型FMDV二重FQ-PCR检测方法,该方法可特异性地扩增经灭活的O型、A型与AsiaⅠ型口蹄疫病毒标准株细胞培养物混合物,但对BHK-21细胞和PEDV、TGEV、SVV等病原对照不出现特异性扩增曲线,特异性好;检测模板最低极限为1.0×101拷贝/μL,敏感性高,重复性好;自15份临床疑似FMDV感染样品中检出9份FMDV-T阳性,7份FMDV-O阳性,检测结果与测序结果完全一致,且与国家口蹄疫参考实验室复核结果一致。本试验成功建立了通用型和O型FMDV二重FQ-PCR检测方法,为FMDV的快速检测及O型FMDV的分型诊断提供了特异、敏感、快速的方法。

摘要：为构建牛环形泰勒虫Ama1(TaAma1)截短基因原核、真核表达载体,对其编码的蛋白进行生物信息学分析,以牛环形泰勒虫阳性DNA为模板,在牛环形泰勒虫Ama1基因的开放性阅读框内设计特异性引物,采用PCR扩增Ama1基因,构建其原核表达质粒pET28a-Ama1及真核表达质粒pEGFP-Ama1。通过生物信息学在线软件分析TaAma1基因的系统进化树及该蛋白的理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、抗原表位及二级结构,构建该重组蛋白系统发育进化树。结果显示,TaAma1基因PCR扩增产物大小为828 bp,与预期片段一致,构建的重组质粒经双酶切鉴定表明目的基因插入正确,测序结果与GenBank已收录的牛环形泰勒虫Ama1基因序列(KX231677.1)同源性为99.72%,同源性及系统进化树分析发现与小泰勒虫氨基酸序列同源性最大为69.9%,生物信息学分析发现TaAma1基因编码蛋白含276个氨基酸,分子式为C_(1331)H_(2134)N_(398)O_(413)S_(4),分子质量为30.448 ku,理论等电点为9.94,有38个磷酸化修饰位点,无跨膜区及信号肽,亚细胞定位预测位于细胞核的比例为87%;B细胞抗原表位分析发现该蛋白含有9个潜在抗原表位;TaAma1蛋白的二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲和延伸链分别占23.91%、7.61%、49.64%和18.84%。成功构建重组原核表达质粒pET28a-Ama1及真核表达质粒pEGFP-Ama1并进行生物信息学分析,为牛环形泰勒虫Ama1蛋白生物学功能及入侵机制研究奠定了基础。

摘要：目的研究注射用炎琥宁(脱水穿心莲内酯双琥珀酸半酯钠钾盐)的稳定性,分析其降解产物的化学组成,以在体实验考察极端条件获得降解物的毒性作用,为临床应用出现的不良反应分析提供借鉴。方法建立HPLC分析条件,分析炎琥宁分别在酸、碱条件下、常规生理盐水、葡萄注射液配制条件下的化学稳定性和成分变化情况,以LC-TOF-MS/MS法分析产物化学组成;采用HE染色法观察炎琥宁酸处理产物对实验动物对血管刺激性,对心、肝、肾等脏器的损伤程度,检测血清中的尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、谷丙转氨酶(GPT)、和谷草转氨酶(GOT)的含量来评价转化炎琥宁对实验动物的肝、肾损伤程度。结果炎琥宁/生理盐水注射液在日间24hr内稳定性良好;在pH5-8的溶液环境下相对稳定,在pH8的条件下降解程度加大。毒性实验结果表明,与正常小鼠相比,炎琥宁酸处理产物组血清中的BUN显著降低(P<0.01),CRE、GOT、和GPT显著升高(P<0.01),而常规注射用炎琥宁组血清中的CRE也显著升高(P<0.01)。常规炎琥宁组对肾脏均有不同程度的损伤,对血管刺激所导致的损伤能够随着时间恢复正常。结论本结果为临床应用注射用炎琥宁提供实验依据。

摘要：甜菜M14品系是在二倍体栽培甜菜染色体组上附加野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系,具有耐盐性、无融合生殖等优良性状,是发掘优质基因资源的良好研究材料。实验室前期已利用i TRAQ串联LC-MS/MS技术获得0、200、400 m M Na Cl胁迫下叶中差异表达蛋白质76个;与利用Hiseq 2000高通量测序技术构建的Na Cl(0、200、400 m M)胁迫下甜菜M14品系转录组数据库相匹配,得到了3条参与抗氧化酶系统的Bv M14-APX、Bv M14-DHAR3及Bv M14-MDAR的Unigenes序列。对3条Unigenes序列进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR技术对0、200、400 m M Na Cl胁迫下叶和根中的3条基因进行组织特异性分析,探究3条基因在叶和根中的表达趋势,并比较了叶中3条基因在转录水平和蛋白水平的表达量变化是否一致,借以评估3条基因对Na Cl胁迫的响应。实时荧光定量PCR结果表明,Bv M14-APX基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调21.56、3.56倍;400 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调51.27、11.47倍。Bv M14-DHAR3基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调14.52、1.83倍;400m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调22.78、5.1倍。Bv M14-MDAR基因在200 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调29.04、1.33倍;400 m M Na Cl胁迫下叶和根中分别上调59.3、3.81倍。3条基因在响应Na Cl胁迫过程中,叶中的表达量变化均显著于根,同时叶中转录水平与蛋白表达水平的变化具有一致性,说明这3条基因在抗氧化酶系统中起到了重要的作用,这也为进一步探究Bv M14-APX、Bv M14-DHAR3及Bv M14-MDAR基因间互作关系奠定了基础。

摘要：目的通过优化工艺制备出合格的冻干型红景天提取物口崩片。方法以口崩片的外观性状和崩解时间为主要评价指标,设置综合评分表,采用单因素考察和星点设计-响应面法对口崩片的处方进行优化研究。结果红景天提取物口崩片最佳处方条件为:红景天提取物50.00 mg/片、普鲁兰多糖14.88 mg/片、甘露醇17.69 mg/片、黄原胶0.48 mg/片。所得口崩片片形饱满、表面光洁、颜色均匀、崩解迅速。结论红景天提取物口崩片制备工艺简单,稳定可靠,可用于大规模生产。

摘要：采用目的抽样法,通过电子问卷从一般情况、客观评价指标、主观感受评价指标、改进意见建议4个方面对全国15个省市(自治区)的690名使用过医用一次性防护服的人员进行了线上调查,指出了医用一次性防护服在散热性、透气性、型号样式适体性及身份识别等方面满意度不佳,提出了增加风冷降温、设计多型号医用防护服、增加身份识别标识等建议,为进一步研发集安全性、舒适性、高效性和人性化于一体的一次性医用防护服提供了客观依据。

摘要：目的评价2种匹伐他汀钙片在中国健康受试者中的生物等效性和安全性。方法采用单次给药、随机、开放、两周期、双交叉设计,空腹入组36例健康受试者,餐后入组48例健康受试者,随机交叉单次口服匹伐他汀钙受试制剂和参比制剂各2 mg,采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测人血浆中匹伐他汀的浓度,用Phoenix WinNonlin8.1软件计算药代动力学参数,并进行两种制剂的生物等效性评价。结果受试者服用受试制剂和参比制剂后,空腹血浆中匹伐他汀主要药代动力学参数如下:Cmax分别为(41.90±16.53),(41.75±21.05)ng·mL-1,AUC0-t分别为(119.62±39.52),(115.29±44.80)ng·h·mL-1,AUC0-∞分别为(127.78±43.46),(122.95±48.59)ng·h·mL-1。餐后组血浆中匹伐他汀主要药代动力学参数如下:受试制剂和参比制剂的Cmax分别为(35.75±16.63),(39.78±23.93)ng·mL-1,AUC0-t分别为(120.16±46.74),(121.80±51.16)ng·h·mL-1,AUC0-∞分别为(126.24±49.91),(127.99±54.65)ng·h·mL-1。2种制剂的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞经对数转换后90%置信区间分别为空腹状态下96.95%~109.37%,101.70%~109.43%,101.79%~109.64%;餐后状态下83.06%~101.84%,94.59%~103.45%和94.59%~103.58%。结论2种匹伐他汀钙片在中国健康受试者中具有生物等效性,安全性良好。

摘要：航道通航宽度直接影响船舶进出港的航行安全,而对于类似连云港港的大型船舶浅滩深挖槽航道,航道基建投资、维护成本对航道通航宽度更为敏感。我国现行规范航道通航宽度计算公式是根据7.4万t以下船舶实船航迹观测后推导的经验公式,缺少大型船舶的实船航行数据作为支撑。本研究通过观测连云港港15万吨级航道内15万吨级船舶实船航行数据,并引入航道宽度保证率的概念,提出不同保证率对应的船舶漂移倍数以及不同条件下航道船舶漂移倍数取值,优化了开敞海域大型船舶浅滩深挖槽航道通航宽度计算参数,完善了计算方法,解决了规范公式及参数缺乏大型实船航行数据支撑和缺乏保证率概念的问题,为规范修编提供技术依据。