摘要：【目的】探索适宜当前形势下昭通烟区的烤烟施肥技术,在同一地块连续3年开展田间试验。【方法】采用单因素随机区组试验设计不同的施肥配比,在昭阳烟区连作地块开展田间小区试验,通过对比不同处理烤烟的农艺性状、经济性状和烟叶品质,确定烤烟最佳的施氮量和最适的氮磷配比。【结果】在连续3年的同田试验中,随着种植年限的延长,各处理烤烟农艺性状指标整体表现呈下降的趋势,病害发生率呈上升的趋势;产量略微上升,但上等烟比例、烤后烟叶外观质量以及烟叶化学成分协调性呈下降的趋势。在不同处理的对比中,施氮量与烟叶的成熟有一定关系,为保证烟叶的适时落黄,需合理控制氮肥施用量;随着施氮量的增加,烟株的叶色由浅绿到深绿逐渐加深,烤烟农艺性状的表现呈递增的趋势,在施氮量相同的情况下,施磷较多的处理烟株更高、有效叶数更多;不施肥处理的病害发生程度高于其它处理,施肥处理之间病害的发生情况差别不大;施氮量为97.5和120 kg/hm^(2)的处理其经济性状和烟叶化学成分的协调性均好于施氮量为75 kg/hm^(2)的处理,其中又以施氮量97.5 kg/hm^(2)的处理表现较好;在施氮量相同的情况下,氮磷比为1∶1.8的处理其经济性状和烟叶化学成分协调性整体优于1∶1.2的处理。【结论】在昭通烟区的连作地块,当施氮量为97.5 kg/hm^(2),且m(N)∶m(P_(2)O_(5))∶m(K_(2)O)=1∶1.8∶3时,烟叶能够适时落黄,烤烟农艺性状、经济性状以及烟叶化学成分的协调性均较好,可达到适产优质的效果。

摘要：目的:根据下颌骨缺损类型,设计个体化内置式圆弧牵引器,通过三焦点牵引成骨技术修复下颌骨缺损畸形。方法:对患成釉细胞瘤行下颌骨部分切除的患者,确定手术切除范围及修复后下颌骨形态,在快速原型模型上设计个体化内置式圆弧形牵引器,应用三焦点转移盘牵引方式,在肿瘤切除同期行牵引成骨手术,牵引前间歇期7d,牵引参数为0.4 mm/次,2次/d,固定期6个月。拆除牵引器后,二期行牙列修复。结果:牵引器植入后牵引过程顺利,固定6个月后X线片显示新骨形成均良好,但2个转移盘间见纤维愈合,拆除牵引器时需行钛板内固定。牙列修复前,发现下颌骨形态略小、矢状向后缩,再次行双侧下颌支矢状劈开前移下颌骨,到达设计位置并稳定后,行覆盖义齿修复。结论:个体化内置式圆弧牵引器可以有效修复下颌骨大型缺损,避免传统骨移植手术造成的供区创伤,但在前期设计时,需要适当矫枉过正。

摘要：采用单因素随机区组试验设计,设置6个施氮水平,在基穗肥比为1︰2的条件下,研究了施氮量对苏玉10号产量形成的作用。苏玉10号的施氮量试验结果表明:在适宜密度基础上,产量(Y)与施氮量(X)的关系为Y=-0.066 9x2+37.476x+5 454.3(R2=0.873 5**),最佳施氮量为280.1 ***-2。

摘要：鉴于目前出现了多种亚型禽流感病毒共存的局面，研究多价流感疫苗具有重要意义。根据各表位的免疫学特性，结合分子生物学信息软件的模拟功能，以H3、H9亚型流感病毒的HA抗原表位、流感病毒的其他主要抗原（NP、NA、M）表位的基因为基础，再附以Kozak序列和适当的酶切位点，设计并合成大小为765bp的复合多表位基因盒-Epi。将Epi基因克隆入真核表达载体pIRES1neo中，构建DNA重组体pIR—Epi；将H7HA、Epi、H5HA基因以融合表达方式克隆到pIRES1neo中，构建了DNA重组体pIRE—H57一Epi。以上述构建的DNA重组体与鸡痘病毒重组株对BALB／c小鼠进行免疫接种后，检测体液与细胞免疫指标。研究结果表明，流感病毒复合多表位DNA重组体pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi免疫组小鼠均能产生针对H3亚型流感病毒的特异性抗体，抗体效价（1：1600～1：64003低于灭活疫苗免疫组（1：12800），但均高于其他对照免疫组（P〈0．01）。pIRE—H57-Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价分别为1：12800和1：6400，均高于其他免疫组（P〈0．05）。pIRE—Epi免疫组抗H5、H7HA抗体效价（1：200，1：100）较低，与其他对照免疫组差异不显著。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi免疫组抗H9亚型AIV的HA抗体效价（1：6400，1：3200）明显高于其他免疫组（P〈0．05）。与PBS对照组及空质粒pIRES1neo对照组比较，用所构建的重组体免疫的各试验组小鼠的T淋巴细胞亚类CD4^＋和CD8^＋的数量显著提高（P〈0．05）。pIRE—H57-Epi与pIRE—Epi试验组的CD4^＋与CD8^＋淋巴细胞的数量较灭活苗显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。此外，所有组的CD4^＋／CD8^＋比值均稳定在1．5～2．0，表明无异常免疫应答出现。ELISPOT检测小鼠脾淋巴细胞分泌IFN—γ斑点数实验结果表明，pIRE—H57-Epi、pIRE—Epi试验组的IFN—γ斑点数量（〉70）比灭活苗（〈40）显著增多（P〈0．05），而各重组体免疫组之间差异不显著。上述结果说明，所构建的DNA重组体有良好的免疫原性，为最终获得能同时预防多种亚型流感病毒的多价疫苗奠定了基础。

摘要：针对茶园害虫依靠人工识别方法存在效率低、需人工干预的局限,不利于茶叶植保过程中害虫的自动识别及精准施药的信息化、机械化的问题,提出采用机器视觉技术实现茶园害虫的智能识别。本文对其技术路线、处理流程、研究与实现平台和方法进行研究,采用HSV空间的阈值分割、SIFT特征提取、SVM分类等算法实现茶园害虫智能识别系统,并以茶尺蠖为例验证了该识别系统研究与实现方法的可行性和有效性。结果可为茶叶植保过程中的自动、精准施药提供依据,促进农业机械向着智能化方向发展。

摘要：为建立鉴别检测鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)及鸭圆环病毒(DuCV)的方法,本研究分别针对GPV、MDPV NS基因与DuCV Rep基因,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时鉴别检测GPV、MDPV及DuCV的TaqMan荧光定量PCR方法。利用该方法检测GPV、MDPV、DuCV及禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、减蛋综合征病毒、鸭坦布苏病毒、番鸭呼肠孤病毒等主要水禽源病毒,结果显示,该方法仅能扩增出GPV、MDPV及DuCV,与其他主要水禽源病毒均无交叉反应,特异性强;利用该方法检测等体积混合后的GPV、MDPV及DuCV质粒标准品混合物,结果显示,该方法对3种质粒标准品的检测限均为7.5×10^(1)拷贝/μL,普通单一PCR对上述3种质粒标准品混合物的检测限均为7.5×10^(3)拷贝/μL,表明本研究建立方法的敏感性高于普通PCR;该方法组内与组间重复性试验的变异系数均小于2.0%,重复性好。利用该方法与MDPV和GPV双重荧光定量PCR方法及DuCV荧光定量PCR方法同时检测96份临床发病鸭的组织样品,该方法检测结果显示,共检出58份阳性样品,其中GPV检出率为18.75%(18/96),MDPV检出率为4.17%(4/96),DuCV检出率为37.50%(36/96),GPV与DuCV混合感染率为8.33%(8/96),阴性样品38份。与GPV和MDPV双重荧光定量PCR及DuCV荧光定量PCR方法的检测结果均一致,三者的符合率达100%。本研究建立的GPV、MDPV及DuCV多重TaqMan荧光定量PCR方法为临床鉴别检测该3种病原及其流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。

摘要：目的评价昆明当地耐药谱抗生素与国外社区获得性肺炎(CAP)诊治指南推荐备选方案治疗CAP患者的抗菌疗效.方法采用前瞻性、随机、单盲、阳性药平行对照设计.以无基础疾病的门诊和入院<48 h的CAP患者为研究对象,试验组给予当地耐药谱中的敏感抗生素:莫西沙星片,400 mg,每日1次;对照组给予2007年版IDSA/ATS颁布的成人CAP诊治指南备选方案中的首选抗生素:阿奇霉素片,每次500 mg,每日1次.结果共收集CAP患者106例,完成治疗方案77例,试验组39例,对照组38例.2组临床有效率分别为89.7%和68.4%,2组临床疗效差异有统计学意义(P<0.01);2组细菌清除率分别为87.9%和54.5%(P<0.05).结论昆明地区耐药谱敏感抗生素治疗当地无基础疾病的社区获得性肺炎的临床疗效优于IDSA/ATS指南推荐方案抗生素.临床医师在学习和参考国外的指南时,应注重我国CAP常见病原菌的耐药特征和构成状况,并结合当地耐药监测资料的变化加以修正和调整,不宜简单照搬国外指南所推荐的治疗方案.

摘要：目的:构建含结核分枝杆菌38kD蛋白基因的真核表达载体并转染HEK293T细胞,高效表达分泌性38kD蛋白。方法:设计合成的结核分枝杆菌38kD基因被克隆到T载体,然后亚克隆到真核表达载体pcDNA3.0,经酶切鉴定正确后,PEI转染法导入293T细胞,换不含血清的DMEM培养基培养3 d后收集细胞及上清,采用Western印迹检测38kD蛋白的表达。结果:酶切结果显示,获得正确的含38kD基因的重组表达载体;Western印迹结果显示表达载体导入293T细胞中后能在细胞及上清中检测到38kD蛋白表达。结论:构建了含重组结核分枝杆菌38kD蛋白基因的真核表达载体pcDNA3.0-38kD,该载体可在哺乳动物细胞HEK293T中高效分泌性表达38kD蛋白,为结核病诊断试剂盒研发奠定了基础。

摘要：目的建立针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J163品系特异性实时荧光(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测方法。方法利用Taq Man实时荧光PCR(real-time PCR)技术,根据转基因苜蓿草品系J163 5’端外源插入片段P-e FMV与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物和探针,建立了转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度及可重复性进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J163成分检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为15 pg,相当于9拷贝转基因苜蓿草J163基因组DNA,重复性试验显示,其标准偏差(Standard deviation,SD)和相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均在可接受范围内。结论本研究建立的转基因苜蓿草J163品系特异性实时荧光PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草J163成分进行检测分析。

摘要：为制备恙虫病东方体SJ_(2)株基因重组抗原和恙虫病血清学诊断备选抗原,根据恙虫病东方体56 kDa外膜蛋白基因序列设计特异性引物,经PCR扩增东方体SJ_(2)株56 kDa型蛋白羧基端部分基因,序列测定并用软件Bioedit与我国主要东方体流行株56kDa蛋白进行氨基酸序列比对分析。然后克隆至载体pET-28a并在BL21菌体中诱导表达,通过His镍柱纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western-blot鉴定分析。结果显示,成功扩增出恙虫病东方体SJ_(2)株56 kDa蛋白708 bp基因片段,氨基酸序列比对显示,该截短蛋白含2个保守区和1个可变区。经IPTG诱导表达后,蛋白电泳在27 kDa处出现明显目标条带。Western-blot结果显示,该蛋白与恙虫病病人血清有特异性免疫反应,与正常人血清不反应。结果表明,诱导表达的重组56 kDa蛋白具有良好的免疫原性,可能备选为恙虫病诊断抗原用于恙虫病血清学检测。