摘要：目的提供理想的休克期液体复苏方案,使烧伤患者减轻水肿,平稳度过休克期。方法根据经湿性医疗技术治疗的烧伤患者休克期液体和蛋白质平衡的数学模型,利用系统控制的计算机模拟技术,对实验组的31例烧伤患者进行液体复苏治疗,并与采用传统经验补液公式复苏的对照组29例患者复苏情况进行比较、分析。结果采用新方案进行治疗的患者,补液总量比传统方案治疗者减少约15%～20%,患者尿量满意,水肿(净体重增加)较轻,更易平稳度过休克期,且平均住院时间、医疗费用及感染并发症也较少(P<0.05)。结论计算机模拟设计的湿性医疗技术休克期液体复苏方案能更好地满足采用湿性医疗技术治疗的患者休克期复苏需要,比传统经验公式更科学、合理,既能使烧伤患者平稳度过休克期,又可减轻水肿,减少并发症。

摘要：目的 阐明西替利嗪伪麻黄碱缓释胶囊中的伪麻黄碱是否具有缓释特征。方法 采用双周期随机交叉试验设计，分别给予12名男性健康受试者试验制剂西替利嗪伪麻黄碱缓释胶囊1粒（含盐酸伪麻黄碱120mg·粒^-1）或参比制剂氨酚伪麻4粒（含盐酸伪麻黄碱30nag·粒^-1），采用LC／MS／MS法测定伪麻黄碱的血药浓度。结果 参比制剂氨酚伪麻片和试验制剂西替利嗪伪麻黄碱缓释胶囊的主要药物动力学参数AUC0-24、AUC0-∞、Cmax、MRT、t1/2α、t1／2β和tmax均数±标准差）分别为：（2545．0±779．5）和（2687．4±643．2）ng·h·mL^-1；（2684．4±765．2）和（2844．7±663．8）ng·h·mL^-1；（418．5±130．5）和（276．2±79．4）ng·mL^-1；（6．6±0．7）和（8．0±0．7）h；（0．2±0．2）和（4．9±1．2）h；（10．2±1．1）和（9．8±1．O）h；（1．4±0．5）和（4．9±1．2）h。方差分析表明试验制剂的改‰、MRT均〉参比制剂（P〈0．05）。非参检验结果表明参比制剂中伪麻黄碱的tmax显著短于试验制剂（U=4．199，P〈0．001）。结论 江苏豪森药业股份有限公司生产的西替利嗪伪麻黄碱缓释胶囊中伪麻黄碱具有缓释特征。

摘要：目的研制安全有效的肠道病毒71型(enterovirus 71,EV-A71)灭活疫苗,预防EV-A71感染所致疾病.方法通过比较不同临床EV-A71分离毒株免疫家兔后的免疫原性和细胞传代适应性,筛选EV-A71灭活疫苗生产毒株;建立多步层析纯化工艺,获得高纯度、高比活EV-A71抗原;采用随机双盲、多中心、试验疫苗与安慰剂对照优效性设计方案,在6~35月龄健康婴幼儿中接种2剂、3个批次EV-A71疫苗,观察对照组和疫苗组EV-A71及其他肠道病毒感染所致疾病发生病例数,计算疫苗保护效果.分析疫苗免疫原性、批间一致性和交叉免疫原性.结果依据中和抗体水平将087株确定为疫苗生产株.经超滤浓缩、柱层析纯化后,疫苗抗原目的蛋白纯度达95%以上、比活达800U/μg以上.第一年内疫苗对EV-A71所致住院/重症病例保护率为100.00%、对EV-A71所致手足口病保护率为90.93%、对EV-A71感染所致疾病保护率为81.85%;两年内对EV-A71感染所致手足口样疾病、手足口病的保护率达到95.00%,对EV-A71感染所致疱疹性咽峡炎、疱疹性口腔炎保护率达100.00%,对EV-A71感染所致住院/重症病例保护率达100.00%;但对CV-A16及除EV-A71、CV-A16外其他肠道病毒所致疾病未显现出明显的交叉保护作用.免疫前中和抗体阴性人群,EV-A71疫苗免疫后第56天,EV-A71中和抗体阳转率达到91.7%以上,中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)达到325.3.3批次试验疫苗接种人群间首针免疫后第56天GMT比值的95%可信区间均在等效区间0.67~1.5内,提示3个批次试验疫苗具有较好的一致性.结论EV-A71疫苗对EV-A71感染所致疾病具有较好的保护效果.

摘要：为了观察与猪流行性腹泻病毒(PEDV)NSP12互作蛋白乳酸脱氢酶B(LDHB)的体外表达情况和小RNA干扰效果,构建了真核表达载体pcDNA4.0-LDHB-3*Flag,并在Vero细胞中过表达LDHB,发现在37 kDa处有大小相符的明显条带。设计的2条小干扰RNA能降低LLC-PK1细胞中LDHB的mRNA和蛋白质水平,经one-way ANOVA检验证明干扰实验组2-ΔΔct的平均值显著低于对照组(P<0.05)。该结果为研究LDHB在PEDV感染LLC-PK1和Vero细胞过程中的作用提供了基础数据。

摘要：目的设计制造自动控制的长期间断低氧大鼠饲养舱,以建立符合睡眠呼吸暂停综合征(SAS)特征的大鼠模型。方法①由单片机自动控制,通过电磁阀控制供应各气体的流量,使饲养舱内的氧浓度能够在9%～21%的范围内快速地变化。②50只SD大鼠均分为五组,即间断低氧2周组(2H)和4周组(4H)、空气对照2周组(2C)和4周组(4C)及正常对照组(NC)。间断低氧组在密闭的舱中间断性地呼吸低氧气体,90s一次循环,每天8h,每周7d。对照组呼吸空气。结果通过单片机能自动调节医用氮气与氧气的输入,使舱内低氧时氧浓度在9.0%±1.5%,复氧时氧浓度在21.0%±0.5%。大鼠平均肺动脉压:2H组较2C组高18.71%,4H组较4C组高16.87%(P均0.05)。结论该大鼠饲养舱能自动、精确控制舱内氧浓度、循环时间,能复制出比较符合SAS病理生理变化特征的动物模型。

摘要：前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增pre-miR-29b并克隆至慢病毒载体pLL3.7。将阳性质粒pLL3.7-pre-miR-29b与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装慢病毒并测定慢病毒滴度,同时包装pLL3.7空质粒的慢病毒作为阴性对照。将4~5周龄BALB/c小鼠随机分成5组,每组6只,连续2次尾静脉注射2.5×107 IU慢病毒悬液pLL3.7-pre-miR-29b或pLL3.7,并于慢病毒注射后96 h通过滴鼻途径攻毒BVDV毒株NADL(1.68×105 TICD50/只),于攻毒后不同时间(0,2,4,10,15 d)处死BALB/c小鼠,采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、小肠和血液,提取总RNA,使用荧光定量RT-PCR检测不同组织中BVDV拷贝数;同时制备病理组织切片观察各组织病变情况。结果显示,成功构建pLL3.7-pre-miR-29b质粒;成功包装pLL3.7-pre-miR-29b和pLL3.7慢病毒;使用荧光定量RT-PCR检测发现,pLL3.7-pre-miR-29b感染能显著性降低BVDV拷贝数;与pLL3.7-pre-miR-29b感染的处理组相比较,pLL3.7感染的对照组中各组织病变情况较为严重。结果表明,BALB/c小鼠体内过表达miR-29b能明显抑制BVDV的复制,减轻BVDV感染造成的病变,为以后研发抗BVDV的有效策略和方法提供了理论依据。

摘要：克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础.

摘要：根据GenBank中登录的猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)3D基因序列特征设计特异性引物,采用RT-PCR方法从福建省某猪场采集腹泻粪便样品和小肠组织混合物中扩增猪嵴病毒3D基因,将扩增后的目的片段克隆后进行序列测定。结果表明,所扩增的目的片段编码有完整的3D开放阅读框,全长为1 407bp,编码有468个氨基酸。运用生物信息学软件,将获得3D基因序列和GenBank的猪嵴病毒株3D基因序列进行分析比较,该毒株的3D基因序列和SH-W-CHN/2010/China毒株的核苷酸同源性最高,为93.6%,与WH1株核苷酸同源性最低,为92%。从遗传进化上看,猪嵴病毒和其他中国株在遗传进化上处在一个同一分支,匈牙利分离株处在另一分支,表明猪嵴病毒可能在欧亚大陆上各自独立进化。

摘要：使用COM技术开发的应用程序具有高扩展性等优点。以使用COM技术开发铁路站场图绘制辅助系统的过程为例,研究了在VC++6.0环境中使用ATL编写COM组件涉及的一些技术。

摘要：目的对河北省早、中孕期妇女进行问卷调查,从地域、年龄、文化程度三个层面进行分析,评估其和孕育状态相关的环境因素指标,为加强孕前、孕期一级预防措施提供科学依据,从而进一步降低出生缺陷发生,提高出生人口素质。方法采用横断面研究设计,分别抽取城市和农村调查点各4个,选取门诊就诊的早、中孕期妇女,就受教育程度、生活习惯、孕产史、疾病史、用药史等环境因素进行问卷调查,并测定血红蛋白数值。结果城市妇女受教育程度高于农村妇女。不良生活习惯中以久坐、豢养宠物、熬夜、偏食所占比例较高。其中,豢养宠物、久坐、偏食、饮用浓茶/咖啡等城市显著高于农村,≤34岁年龄组孕妇的不良生活习惯所占比例显著高于≥35岁年龄组孕妇,但饮用浓茶/咖啡的习惯≥35岁年龄组孕妇明显高于≤34岁年龄组,初中及以下学历孕妇中豢养宠物、久坐的不良习惯显著高于其余两个学历组。≥35岁年龄组孕妇的不良孕产史发生率显著高于≤34岁年龄组。23.22%的妊娠期妇女有服药史,其中保胎药和甲状腺素药物的服药史比例城市显著高于农村。≤34岁年龄组孕妇抗菌素的应用比例显著高于≥35岁年龄组,本科及以上学历孕妇服用保胎药物的比例显著高于其余两组。各种疾病史中便秘和痔疮的发生率最高,甲状腺疾病患病率城市显著高于农村,≥35岁年龄组孕妇的痔疮、口腔疾病、子宫肌瘤、乙肝、盆腔炎、糖尿病、便秘、肺结核等发生率均显著高于≤34岁年龄组孕妇。8.71%的孕妇发生了贫血,其中,≥35岁年龄组孕妇贫血发生率显著高于≤34岁年龄组。结论地域、年龄和文化程度不同,妇女的生活和工作环境也不一样。因此,在环境因素构成上也存在差异,提示在加强出生缺陷一级预防措施中应结合地域、年龄、文化程度的不同各有侧重。