摘要：目的基于多重聚合酶链反应(PCR)建立一种快速方便的检测副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的方法。方法结合副溶血弧菌"大流行菌群"的群特异鉴定方法 GS-PCR,与副溶血弧菌致病相关的耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热直接溶血素相关溶血素基因(trh)序列设计引物,建立并优化多重PCR检测方法。用已知的大流行菌株和非大流行临床分离株,对其进行特异性、灵敏度等性能的评价。并对224株食品分离株和3株临床分离株副溶血弧菌进行了再鉴定。结果副溶血弧菌"大流行菌群"有群特异PCR标识基因和tdh扩增条带。而其他细菌扩增结果呈阴性。检测灵敏度可达到105CFU/ml。对实验室保存的224株食品分离株和3株临床分离株进行再鉴定表明,其中5株为副溶血弧菌"大流行菌群",其中3株为tdh阳性、trh阴性,2株tdh、trh均阴性。结论本研究所建立的多重PCR方法特异性好、灵敏度高。为副溶血弧菌"大流行菌群"及其毒力基因的快速大规模检测提供良好的技术支持。

摘要：目的了解广东省三级甲等综合医院消毒供应中心(CSSD)护士岗位胜任力情况及其影响因素。方法采用普查法,自行设计电子问卷量表对广东省内51家三级甲等综合医院CSSD护士进行调查,并采用多重线性回归分析其影响因素。结果共回收441份问卷,有效问卷435份,有效回收率为98.6%。广东省三级甲等综合医院CSSD护士岗位胜任力平均得分为(4.33±0.39)分。多重线性回归分析显示,CSSD护士岗位胜任力的影响因素有岗位级别、岗位绩效、参与培训情况、初始学历和本专业工作年限。结论广东省三级甲等综合医院CSSD护士岗位胜任力处于良好水平,岗位胜任力水平受岗位级别、岗位绩效、培训情况、初始学历和本专业工作年限的影响。

摘要：工程建设逐渐成为上海近年来新的地面沉降制约因素。本文选择 4个典型的高层建筑及多层建筑密集区段 ,分析了建筑密度与地面沉降的关系 ,探讨了其时空变化特征。建筑规模及其增长速度直接导致工程性地面沉降同步增长 ,集中建设较分散建设、新区建设较旧城改造、高层建筑较多层建筑地面沉降效应明显。建筑密度越大 ,建筑容积率越高 ,地面沉降越显著。城市规划宜选择低密度、低容积率的建设模式 ,降低建筑高度、扩大建筑间距。提出了沉降控制条件下适宜的建筑容积率应在 0 9～ 1 2之间 ,从而为城市规划提供了决策性技术指标。

摘要：以副溶血性弧菌的tlh基因为目的片段设计特异性引物,成功建立了恒温条件下快速检测副溶血性弧菌的依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA)的检测法,进行了特异性和灵敏度实验,并与普通PCR方法进行了比较。该HDA检测方法最低检测限为19.9ng·mL-1,与普通PCR方法相当。副溶血性弧菌的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,用普通水浴槽即可进行反应。

摘要：目的建立LC-MS/MS法测定氨溴索血药浓度,研究口服氨溴特罗颗粒剂与氨溴特罗口服液中氨溴索在人体内的生物等效性。方法采用双周期随机交叉试验设计,研究了18名健康男性受试者单剂量口服氨溴特罗颗粒(受试制剂)与氨溴特罗口服液(参比制剂)的药动学。采用LC-MS/MS法测定血浆中氨溴索的浓度。评价两制剂中氨溴索在人体内的生物等效性。结果单次给予受试制剂或参比制剂(含盐酸氨溴索60 mg)后氨溴索的主要药物动力学参数分别为:Cmax为(183.86±108.22)、(216.68±198.50)μg.L-1;tmax为(2.1±0.8)、(2.2±1.0)h;AUC0-96为(2 274.13±1 159.02)、(2 016.97±928.48)μg.h.L-1;AUC0-∞为(2 307.42±1 203.33)、(2 056.64±961.25)μg.h.L-1;t1/2为(14.4±4.6)、(17.2±6.9)h。与参比制剂相比,受试制剂的相对生物利用度为(111.3±18.0)%。结论受试制剂与参比制剂中氨溴索的主要药动学参数之间无明显差异,非参数检验未发现两制剂的tmax有显著性差异。双单侧t检验结果表明两制剂为生物等效制剂。

摘要：为了探讨CD40抗体与CD40结合对B细胞应答小分子半抗原的增强作用,利用TRIzol法提取BALB/c小鼠脾脏总RNA,并反转录成cDNA;根据CD40的胞外段CDS设计引物,通过PCR扩增目的基因,构建pGEX4T-1-CD40表达载体,进行原核表达及多克隆抗体制备。结果表明,成功扩增了522 bp的目的基因,表达并纯化获得了45 ku的CD40重组蛋白,多克隆抗体抗体不但可与重组蛋白结合,与小鼠脾脏天然CD40蛋白也可以特异性结合。说明CD40重组蛋白表达成功,且制备的抗体有望模拟CD40L为B细胞活化提供第二信号。

摘要：利用PCV2鄂州株的基因序列设计特异性引物,分别在上、下游引物中加入Sac I和Hind III酶切位点,扩增出PCV2鄂州株的ORF2基因;将该片段克隆至p ET-28a原核表达载体,经PCR、酶切鉴定,成功构建了阳性重组表达质粒p ET-ORF2。将其转入大肠杆菌Rosetta中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析确定重组蛋白大小为34.5 k D,主要以包涵体的形式表达。优化后确定最佳诱导条件为:37℃,至OD值0.4~0.6时加入终浓度为1 mmol/L的IPTG,诱导5 h。表达产物经His-tag镍柱纯化后进行Western-blot分析,结果表明表达的重组蛋白能够与PCV2标准阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。

摘要：在对深圳断裂带构造活动性演化分析的基础上 ,配合现今构造应力场平面和三维数值模拟 ,定量计算输水隧洞不同地段轴向与最大水平主压应力方向的夹角、深圳断裂带与隧洞交汇部位的现今活动量级范围以及深埋隧洞地段现今构造应力状态 。

摘要：采用不完全正交设计方法,研究了庆安县水稻主产区黑土和草甸黑土水稻高产优质适宜的氮磷钾用量。试验结果表明,在中低产条件下,庆安县水稻氮磷钾适宜用量为：N 100～150 kg·hm^-2、P2O560～90 kg·hm^-2、K2O 75～125 kg·hm^-2,氮磷钾适宜比例为1.7∶1∶1.3。在高产条件下,水稻氮磷钾适宜用量为：N100～200 kg·hm^-2、P2O560～90 kg·hm^-2、K2O 75～125 kg·hm^-2,氮磷钾适宜比例为2.5∶1∶1.3。从产量和品质两个方面综合考虑,庆安县水稻施肥氮、磷、钾的适宜用量为N 100～150 kg·hm^-2,P2O560～90 kg·hm^-2,K2O 75～125 kg·hm^-2为宜,过高或过低对产量和品质均有显著的负效应。

摘要：目的探讨涂阳肺结核患者并发糖尿病的影响因素，为制定肺结核并发糖尿病相关策略提供参考依据。方法选取2008年10月至2010年12月期间上海市、广东省、天津市、河北省、河南省、重庆市、广西壮族自治区及云南省等8个地区共49个实施单位确诊的1879例涂阳肺结核患者作为研究对象。采用前瞻性研究方法，通过统一设计的调查问卷，问卷的效度和信度分别为9．62及0．89，共发出调查问卷2142份，回收有效问卷1879份，收集患者基本特征、吸烟、饮酒及治疗类型信息，分析肺结核并发糖尿病的危险因素。结果在1879例患者中，单纯性肺结核患者1696例，占90．26％（1696／1879），肺结核并发糖尿病者183例，占9．74％（183／1879）。男性、45～64岁、65岁及以上、体质量指数〈18．5及就职于企事业单位者在单纯肺结核组中分别占70．81％（1201／1696）、27．48％（466／1696）、10．55％（179／1696）、39．50％（670／1696）、5．90％（100／1696）；肺结核并发糖尿病组中分别占82．51％（151／183）、61．75％（113／183）、16．94％（31／183）、21．86％（40／183）、8．74％（16／183）。多因素非条件logistic分析结果表明，男性（对比女性）、45-64岁（对比≤24岁者）、65岁及以上（对比≤24岁者）、BMI〈18．5（对比BMI为18．5～24．0者）及就职于企事业单位（对比农民及外来务工者）是肺结核并发糖尿病的危险因素，OR（95％CI）值分别为1．56（1．01～2.41）、27．45（7．44～101．22）、18．23（7．21～94．47）、2．24（1．34～3．75）及2．91（1．49～5．67）。结论男性、中老年、体质量低及就职于企事业单位的涂阳肺结核患者更易并发糖尿病。