摘要：为了获得高纯度的白细胞介素-4(IL-4)蛋白,对分离得到的水貂外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导后,提取淋巴细胞总RNA,根据GenBank中登录的雪貂IL-4基因序列,设计并合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得了水貂IL-4基因序列全长399bp,编码132个氨基酸,与雪貂氨基酸序列同源性高达99.2%,与熊猫、犬同源性均为90.0%。将编码成熟蛋白基因构建到原核表达载体pProEX-HTb,IPTG诱导后,SDS-PAGE及Western blotting结果显示,IL-4表达产物为15ku的包涵体蛋白。通过His-Trap HP亲和层析预装柱变性、复性洗脱可获得高纯度的重组IL-4蛋白。本试验为水貂IL-4基因的进一步研究奠定了基础。

摘要：通过分析化学元素对盘条焊接性能的影响,设计了大线能量焊接用盘条的化学成分,测定了该钢种的连续冷却转变(CCT)曲线,制定了冶炼过程关键控制参数,采用二火成材工艺进行了工业试制。结果表明,为提高焊接能量输入量,Ti含量要控制再0.15%以上;冶炼过程较好地控制了钢中的TiN非金属夹杂物,保证连铸工艺浇注顺行;冷却速度控制在1℃/s左右最佳,得到的显微组织为铁素体+珠光体+少量的贝氏体;盘条各项性能检验结果完全满足技术协议要求,经用户拉拔使用后,焊接性能良好,未发生焊接冷裂纹问题。

摘要：目的了解山东省某三甲医院呼吸内科门急诊患者对流感基本认知、行为的掌握程度和流感疫苗接种情况。方法自行设计问卷,采取横断面研究,于2017、2018年选取在呼吸内科就诊并配合调查的患者进行调查。结果调查386例患者,回收有效问卷382份,应答率为98.96%。382例中男性198例(51.83%)、女性184例(48.17%);年龄为5～80(39.55±40.45)岁。有79.04%(264例)知道流感,流感症状知晓率前3位依次为:发热(268例、80.24%)、咳嗽(210例、62.87%)、流涕(182例、54.49%);流感传播途径知晓率前3位依次为:咳嗽、打喷嚏(173例、51.8%)、面对面交谈(78例、23.35%)、接触空气(57例、17.07%)。每天洗手4～9次占比最多,为42.93%(164例)。10次洗手时使用肥皂4～9次为34.55%(132例)。咳嗽或打喷嚏时遮掩口鼻,10次的占57.33%(219例)。近1个月,到公共场所次数≥10次占51.31%(196例)。去公共场所戴口罩从不戴的占57.59%(220例)。疫苗接种率为28.80%(110例),其中女性占60.00%(66例),不同性别差异有统计学意义(P0.05)。未接种流感疫苗原因前3位依次为:身体好不需要接种者(114例、29.84%),周围人不接种者(98例、24.65%),担心疫苗不良反应(72例、18.85%)。结论患者对流感症状知识认知需要加强,对传播途径认知存在误区,流感自我保护意识薄弱。流感疫苗接种率低。

摘要：现浇磷石膏墙体的混合干物料由磷石膏、磷渣微粉、熟石灰和水泥组成,添加外加剂后加水搅拌得到灌浆料,为分析主要组分对抗压强度的影响,在前期改性研究和施工配比的基础上,进行组分的交叉分析后设计了9组配比,共制作了42块边长为100 mm的立方体试件进行抗压强度试验。结果表明,现浇磷石膏的强度主要由二水硫酸钙晶体提供;磷渣微粉的作用主要在于增加浆体的流动性、提高现浇磷石膏的耐水性;水泥用量对本文采用的磷石膏抗压强度不起决定性作用,而缓凝剂掺量对现浇磷石膏强度影响较大。对于取自瓮福磷业集团的磷石膏,建议缓凝剂配比控制在0.2%-0.3%,水泥配比控制在2%-5%.

摘要：为建立鉴别检测鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)及鸭圆环病毒(DuCV)的方法,本研究分别针对GPV、MDPV NS基因与DuCV Rep基因,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时鉴别检测GPV、MDPV及DuCV的TaqMan荧光定量PCR方法。利用该方法检测GPV、MDPV、DuCV及禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、减蛋综合征病毒、鸭坦布苏病毒、番鸭呼肠孤病毒等主要水禽源病毒,结果显示,该方法仅能扩增出GPV、MDPV及DuCV,与其他主要水禽源病毒均无交叉反应,特异性强;利用该方法检测等体积混合后的GPV、MDPV及DuCV质粒标准品混合物,结果显示,该方法对3种质粒标准品的检测限均为7.5×10^(1)拷贝/μL,普通单一PCR对上述3种质粒标准品混合物的检测限均为7.5×10^(3)拷贝/μL,表明本研究建立方法的敏感性高于普通PCR;该方法组内与组间重复性试验的变异系数均小于2.0%,重复性好。利用该方法与MDPV和GPV双重荧光定量PCR方法及DuCV荧光定量PCR方法同时检测96份临床发病鸭的组织样品,该方法检测结果显示,共检出58份阳性样品,其中GPV检出率为18.75%(18/96),MDPV检出率为4.17%(4/96),DuCV检出率为37.50%(36/96),GPV与DuCV混合感染率为8.33%(8/96),阴性样品38份。与GPV和MDPV双重荧光定量PCR及DuCV荧光定量PCR方法的检测结果均一致,三者的符合率达100%。本研究建立的GPV、MDPV及DuCV多重TaqMan荧光定量PCR方法为临床鉴别检测该3种病原及其流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。

摘要：传统气缸因复杂的摩擦特性难以实现高精度控制,基于振动减摩原理,开发了一款新型高频纵振减摩气缸。在保证密封性能的前提下,凭经验在活塞上设计了6种不同槽口夹角和槽宽的密封槽,并根据实际PID运动轨迹跟踪控制的精度情况,选取其中最优的密封槽。通过模态分析、谐响应分析和阻抗测试,确定了所开发新型气缸的一阶纵振共振频率为6328 Hz。摩擦力测试结果表明:高频振动确实可以减小气缸的摩擦,且激励电压越大减摩效果越好;最大静摩擦力最大减少了约64.46%,动摩擦力最大减少了约63.62%。

摘要：罗非鱼湖病毒Tilv是一种新发RNA病毒,对罗非鱼养殖业造成巨大威胁。为明确罗非鱼(Oreochromis niloticus)多聚免疫球蛋白受体基因(OnpIgR)的序列和结构特征及其对Tilv增殖的影响,本研究首先对PCR扩增获得的OnpIgR完整的ORF,进行了结构域预测、三维结构预测以及遗传进化树分析,然后采用荧光定量PCR方法分析了罗非鱼感染Tilv后该基因在各组织的表达模式,最后构建了OnpIgR过表达质粒,初步研究了OnpIgR对Tilv增殖的影响。结果表明,PCR扩增获得了完整的OnpIgR ORF序列,长度为1023 bp,该ORF序列具有一个信号肽,两个Ig样结构域,同源建模结果显示,pIgR蛋白整体呈扭曲的“L”型,主要由反平行β片层和无规卷曲组成;系统发育树显示OnpIgR与大口黑鲈(Micropterus salmoides)以及斜带石斑鱼(Epinephelu coioides)的pIgR聚为一支;感染Tilv后,罗非鱼皮肤、脾脏以及肾脏中pIgR均呈现先上升后下降的趋势;成功构建了pEGFP-OnpIgR并在TiB细胞中过表达OnpIgR后感染Tilv,发现Tilv的S8和S10节段mRNA相对表达量显著增多,Tilv拷贝数也显著增多,初步表明OnpIgR对Tilv的增殖具有促进作用。