摘要：目的建立树鼩角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)体外分离、培养及纯化的稳定技术,为人类眼科角膜疾病提供新的实验材料。方法通过比较揭膜法、双酶消化法及揭膜-消化两步法,确定每种树鼩原代CECs取材方法的优劣性。分别使用DMEM/F12,M199,Ham’s F12/M199三种培养液以确定树鼩CECs原代细胞最适培养液。使用TGF-β抑制剂、低血清培养法及梯度消化法来探讨树鼩CECs纯化的可行性。苏木精-伊红染色观察细胞形态,根据树鼩神经元烯醇化酶(NES)设计并筛选特异性引物,使用PCR方法检测细胞NES表达情况并用NES抗体进行细胞免疫荧光染色鉴定。结果揭膜法可以快速、有效得到高纯度的树鼩CECs细胞。Ham’s F12/M199培养液是树鼩CECs的最适培养液。使用TGF-β抑制剂可以达到CECs的纯化目的。结论优化的树鼩CECs细胞培养纯化方法对树鼩CECs的体外培养更适宜,优化条件下分离培养的细胞符合CECs的一般特征。

摘要：目的探讨湖北省武汉市小学低年级儿童阅读相关认知能力的动态变化趋势,揭示儿童汉语阅读能力发展的时间特征和认知特点。方法采用队列研究设计整群抽取武汉市某小学一二年级全体学生389人,进行阅读相关6项认知能力和1项智力测试。1年后再次测试,比较1年前后各项认知能力的发展情况。结果一年级儿童通过一年的发展,语音意识[1年前(15.12±5.90)分,1年后(20.39±5.19)分]、语素意识[1年前(11.95±2.69)分,1年后(13.42±2.18)分]、正字法意识[1年前(44.48±7.30)分,1年后(50.58±5.95)分]、快速命名[1年前(1.83±0.47)分,1年后(2.28±0.44)分]和语音短时记忆广度[1年前(5.90±1.05)分,1年后(6.28±1.06)分]均较一年级时有显著提高(P<0.01);二年级儿童的快速命名[1年前(2.38±0.53)分,1年后(2.53±0.47)分]和语音短时记忆广度[1年前(5.99±1.12)分,1年后(6.58±1.24)分]也比1年前有所发展,差异有统计学意义(P<0.01)。结论小学低年级儿童的语音意识、语素意识和快速命名能力发展较早,且随着年级的增长逐渐提高,其他相关能力发展稍缓。

摘要：目的比较对直肠癌术前患者应用固定野调强(fixed-field intensity-modulated radiotherapy,FF-IMRT)和容积调强(volumetric modulated arc therapy,VMAT)两种计划方式进行术前放射治疗的剂量学差异。方法选择15例直肠癌术前进行调强放疗的患者行CT模拟定位,勾画靶区及危及器官,对同一CT图像设计FF-IMRT计划和VMAT计划。评估靶区及危及器官的剂量分布。结果 VMAT计划组和FF-IMRT计划组靶区覆盖度均能满足处方剂量要求。与FF-IMRT计划组相比,VMAT计划组计划靶区(planning target volume,PTV)105%覆盖度、Dmean及Dmax均增加(P=0.011,P=0.017,P=0.006),适形度指数减低(P=0.008),而均匀性指数差异无统计学意义(P=0.193)。与FF-IMRT计划组相比,VMAT计划组膀胱V50增加约15%(P=0.009),Dmax平均值增加0.7 Gy(P=0.003);小肠V30降低10%(P=0.004),Dmax平均值增加0.9 Gy(P=0.000);骨髓V10、V30、V40分别降低2%、10%、10%(P=0.000,P=0.000,P=0.000),Dmean平均值降低1.7 Gy(P=0.000);左右股骨头D5分别降低3.2 Gy、2.4 Gy(P=0.000,P=0.000);全身V10、V20、V30、V40也明显降低(P=0.003,P=0.000,P=0.000,P=0.004)。VMAT计划组较FF-IMRT计划组机器跳数(monitor units,MU)平均值减少50%(P=0.000)。结论直肠癌术前患者采用VMAT技术,可以获得等同于或优于FF-IMRT计划的剂量分布,患者治疗时间明显缩短,MU明显降低。

摘要：分离和克隆了亚麻纤维素合成酶基因(CesA)及其类蛋白D基因家族(CSLD)的部分序列,并对其进行生物信息学分析。纤维素合成酶类蛋白(CSL)作为一种重要的膜蛋白与纤维素合成酶具有相似的蛋白结构,都含有D,D,D,QXXRW保守区。利用其它物种中CesA基因的保守序列设计简并引物,采用RT-PCR方法扩增基因片段,经多次重复测序,获得了6个CesA基因片段和5个CSL基因片段。应用ClustalW和NCBI数据库对获得的基因片段进行序列分析,它们分别属于CesA基因家族和CSLD基因家族,6个CesA基因片段之间核酸和蛋白的相似性分别在67%～88%和71%～98%之间,5个CSLD基因片段之间核酸和蛋白的相似性分别在68%～83%和76%～94%之间。推测LusiCesA1与LusiCesA3,LusiCesA4与LusiCesA5及LusiCSLD1与LusiCSLD2的亲缘关系较近。

摘要：目的:应用单光子发射计算机断层扫描观察家兔通过皮下、皮内、静脉3种不同途径注射核素钼锝“风门”穴的皮部腧穴通路,分析腧穴与皮肤感受器的关系。方法:实验于2005-10/11在徐州医学院附属连云港医院肿瘤生物实验室完成。将6只家兔分为皮下注射组,皮内注射组和静脉注射组3组,每组2只,皮下注射组在已确定的家兔胃伤害性刺激的皮肤牵涉区,取双侧“风门”穴,左侧皮内、右侧皮下注射核素钼锝(99TcmO4-,99Tcm)为示踪剂,皮内注射组取双侧″风门″穴,双侧皮内注射99Tcm,静脉注射组经静脉注射99Tcm。各组均应用单光子发射计算机断层扫描成像,分别从兔冠状面和矢状面收集示踪剂图像,示踪剂选择绿色成像,示踪剂集中区呈白色。每次连续收集图象16幅,成像时间为7min,开始每隔15min连续收集图像1次,1h后每隔30min连续收集图像1次,3h后每隔60min连续收集图像1次,6h后每隔120min连续收集图像1次,观察至注射核素后12～14h。结果:①实验家兔6只均成功按设计方案进行了示踪剂的注射,3组实验共获单光子发射计算机断层扫描图像1280幅。②皮下、皮内、静脉3种不同途径注射核素钼锝通过SPECT观察不同的形态学变化:“风门”穴皮内注射的99Tcm沿纵向行走,延长约2～5倍,注射12～14h后仍清晰可见;“风门”穴皮下注射的99Tcm逐渐缩小,8～10h消失;静脉注射的99Tcm,8～10h大部分经肾脏排泄。结论:①家兔皮内注药有两条吸收途径,即血液和神经末梢感受器吸收途径。②皮下注射主要通过血液吸收。③腧穴部位皮内示踪剂沿纵向行走,有可能与皮内神经末梢感受器的逆行吸收有关,与交感感受器关系有可能更密切,皮部腧穴有可能是皮内感受器的密集点或片,皮部经络有可能是皮内感受器密集点的有序排列。

摘要：目的：构建靶向结肠癌细胞的人端粒酶逆转录酶HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒并对该表达体系进行鉴定。方法：根据GenBank中的HTERT启动子（HTERTp）序列设计引物，以人胚肾293细胞提取基因组DNA为模板，PCR扩增HTERTp，并将HTERTp序列克隆入pDC312质粒中，构建成HTERTp调控的腺病毒质粒pSG—HTERTp；NK4 cDNA酶切并回收克隆至pSG—HTERTp载体中，构建成pSG—HTERTp／pA—NK4穿梭质粒，脂质体法在293细胞中包装重组腺病毒；噬斑分析法筛选单克隆重组腺病毒；RT-PCR检测NK4基因的转录；Western Blot检测NK4蛋白的表达。结果：成功构建出成功构建出HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒，滴度为4．5×10^9空斑形成单位（pfu）／mL，且PCR扩增及western bolt电泳均呈阳性表达。结论：成功构建出HTERT启动子调控的NK4基因重组腺病毒，为进一步研究NK4基因的作用机制打下实验基础。

摘要：目的探索提高HIV感染者和AIDS患者发现能力的方法。方法2009年9月，采用统一设计的问卷对德宏州潞西市、盈江县、瑞丽市、陇川县和梁河县于2009年5—8月期间新发现报告的HIV感染者和AIDS患者进行面对面的问卷调查，获取与其存在AIDS传播所有可能的高危行为接触者的个人联系信息，并对高危行为接触者作进一步的逐级追踪，同时对调查对象进行HIV检测。结果2009年5—8月期间，德宏州5县（市）首次报告的HIV感染者（指示病例）共342例，其中经异性固定性伴感染者占47．1％（161／342）。本次调查共进行了三级溯源，共实际追踪到218名高危接触者，其中通过异性固定性伴追踪者占84．9％（185／218）。一、二级接触者中接受检测者的HIV检测阳性率分别为34．7％（60／173）、12．5％（1／8）。指示感染者及其高危接触者中，有异性固定性伴、非固定非商业异性性伴、异性商业性伴和男男性伴的比例分别为87．9％（492／560）、18．9％（106／560）、22．3％（125／560）和0．3％（1／318），与以上4类性伴发生性行为时从未使用安全套的比例分别为73．8％（363／492）、72．7％（77／106）、63．2％（79／125）和0．0％（0／1）。结论作为一种提高HIV感染者和AIDS患者发现能力的流行病学调查方法，溯源调查发现了较多数量的HIV感染者。

摘要：在温和、无模板条件下利用水热法合成了簇状钨酸铋,通过超声还原法将银纳米粒子负载在其表面,得到复合催化剂Ag/Bi_2WO_6。采用XRD、SEM、XPS、UV-vis DRS等技术对样品进行了表征与测试。选择对硝基苯酚还原生成对氨基苯酚为模型反应,探讨了Ag/Bi_2WO_6的催化活性。结果表明,Ag的负载量为5.0%的复合样品催化活性最高,17 min内可以将4-NP全部催化还原。这可能是由于Ag纳米颗粒分散在Bi_2WO_6表面,比表面积大,表面能高,反应活性强。另外,模拟太阳光下,复合样品Ag/Bi_2WO_6作催化剂,以有机染料结晶紫为污染物模型,进行了光催化反应,研究了合成样品的光催化活性。结果显示,负载量为5.0%Ag/Bi_2WO_6的光催化降解结晶紫的活性最高。本研究对设计高效复合催化剂提供了新的思路和借鉴。

摘要：在北部黑土区设计了不同的施肥处理,研究了氮磷钾不同配比对大豆耗水量和水分利用效率的影响及其相互关系。结果表明:施肥可显著提高大豆水分利用效率,在不同的肥料配比中,当满足大豆对磷钾的需求时,大豆的耗水量、水分利用效率随施氮量的增加而增加;当满足大豆对氮钾的需求时,随着施磷量的增加,大豆耗水量、水分利用效率则表现出抛物线型变化;而当满足大豆对氮磷的需求时,随着施钾量的增加,耗水量表现出抛物线型变化。耗水量与产量之间呈显著正相关关系,而水分利用效率则与产量呈极显著正相关关系。

摘要：目的研究健康人口服苯扎贝特片后的药动学和生物等效性。方法20名健康受试者采用随机分组自身交叉对照试验设计,口服苯扎贝特片400mg后用HPLC法测定血浆中苯扎贝特浓度,以DAS软件计算其药动学参数和评价生物等效性。结果在选定的色谱条件下苯扎贝特与内标及血浆杂质分离良好,在0.1～20.0μ***-1范围内线性良好。相对回收率>92.47%,日内和日间RSD<11.1%。苯扎贝特片受试制剂(T)和参比制剂(R)的主要药动学参数:Tmax分别为(1.85±0.49)h和(1.65±0.46)h,Cmax分别为(11.107±3.184)μ***-1和(11.439±3.388)μ***-1;t1/2分别为(1.63±0.28)h和(1.57±0.42)h;AUC0→12分别为(38.9±9.6)μ***-1和(37.4±10.4)μ***-1;用面积法(AUC0→t)估算的苯扎贝特片相对生物利用度为(105.7±12.8)%。结论用HPLC法测定血浆中苯扎贝特浓度,杂质无干扰,定量限低,重复性好,准确度高。受试的苯扎贝特片与参比的苯扎贝特片(阿贝他)生物等效。