摘要：【目的】呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus, RsV)是婴幼儿急性呼吸道感染的最常见原因。基于RT-ERACRIsPR/Cas12a技术,建立一种RsV快速特异性的检测方法。【方法】针对RsV N基因保守区域设计合成特异性crRNA及酶促重组等温扩增(ERA)引物,筛选最佳扩增引物-crRNA组合建立检测体系;通过荧光法检测RsV核酸,确定检测方法的灵敏度及特异性。【结果】根据Cas12a的激活原理,针对A型及B型RsV分别设计合成RsV-crRNA1及RsV-crRNA2,二者混合加入检测体系,可同时检测到A型及B型RsV,并具有协同作用;实验筛选出一组最佳引物组合(RsV-F+RsV-R3J),最低检出限为5×10^(2) copies/mL,可在39℃恒温条件下,35 min内完成检测;该方法与其他核酸测试样本无交叉反应,只能检测出RsV核酸,具有较高的特异性。【结论】基于RT-ERA-CRIsPR/Cas12a技术,成功建立了一种灵敏度高、特异性强、快速、低成本的RsV核酸检测方法,该方法不依赖复杂的检测仪器,任何能够提供恒温环境和检测荧光信号功能的仪器均可适用。因此,该方法适用于RsV即时检测,还可能应用于其他病原体感染的检测。