摘要：目的制备含有7种血清型肉毒毒素切割位点(SNAP25-VAMP)的特异性绿色荧光融合蛋白,在***中诱导表达,纯化后用于肉毒毒素活性测定。方法根据SNARE蛋白复合物中SNAPE25和VAMP基因序列及各血清型肉毒毒素(Bo NTs)的切割位点,设计合成含有SNAREs中突触小体(SNAP25)和突触小泡膜蛋白(VAMP)的Bam HⅠ-HIS6-SNAP62-Eco RⅠ-VAMP57C-TAA-HindⅢ(以下简称为SV)基因,连接至p ET-28a-GFP载体上,构建重组质粒p ET-28a-GFP-SV,转化感受态*** BL21(DE3),IPTG诱导表达后,经DEAE阴离子交换层析、Cu2+金属螯合层析、Q阴离子交换层析3步纯化,BCA法测定纯化产物的蛋白浓度,ELISA法检测B型肉毒毒素轻链蛋白(Bo NT/BL)活性。结果构建的质粒p ET-28a-GFP-SV经双酶切及测序鉴定证明构建正确,表达的GFP-SV融合蛋白相对分子量约40 000,主要以可溶形式存在,蛋白浓度为18.4μg/μl,纯度可达70%以上。利用该融合蛋白的荧光强弱变化可测定Bo NT/BL活性大小,同时也可测定其抗体中和活性大小。结论制备的含有SV的特异性绿色荧光融合蛋白在***中获得了高效表达,为后续各型肉毒毒素活性检测及抗体中和毒素活性检测奠定了基础。

摘要：[背景]农药暴露可能会影响接受辅助生殖技术(ART)治疗女性的生殖健康,然而,目前我国有关ART女性农药暴露水平的数据缺乏且探讨其影响因素的研究较少。[目的]了解ART女性孕前农药的暴露水平及其影响因素。[方法]本研究采用横断面设计的调查方法,于2017年7月至2018年12月在上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院生殖门诊招募了508名接受ART治疗的女性作为研究对象。采用气相/液相色谱-串联质谱法检测ART女性尿液中有机磷类农药(OPs)、拟除虫菊酯类农药(PYRs)以及新烟碱类农药(NEOs)的代谢产物浓度,并分别计算三类农药代谢产物的摩尔浓度总和(∑2OPs、∑2PYRs、∑2NEOs)以评估农药暴露水平。使用问卷调查ART女性的人口学特征、饮食频率以及行为习惯信息。采用多因素线性回归分析人口学特征、饮食频率以及行为习惯与ART女性尿液中农药代谢产物浓度的关系。[结果]本研究人群中∑2OPs、∑2PYRs、∑2NEOs经尿肌酐校正后的中位浓度分别为419.77、2.95、20.36 nmol·g^(−1)。多因素线性回归结果显示:每天摄入蔬菜的ART女性尿液中∑2OPs浓度比蔬菜摄入频率≤3 d·周^(−1)的ART女性高42.88%(P<0.05)。每天摄入水果的ART女性尿液中∑2PYRs浓度比水果摄入频率≤3 d·周−1的ART女性高37.24%(P<0.01)。每天摄入水果和每周有4~6 d摄入水果的ART女性尿液中∑2NEOs浓度比水果摄入频率≤3 d·周^(−1)的ART女性分别高24.51%和29.30%(P<0.05)。此外,本研究还发现∑2PYRs浓度与ART女性体重指数(BMI)呈负相关(P<0.05);而∑2NEOs的浓度不仅与ART女性年龄呈正相关(P<0.05),还与宠物饲养情况以及不孕原因具有关联。备孕后仍在饲养宠物的ART女性尿液∑2NEOs浓度比从不饲养宠物的ART女性高30.11%(P<0.05);由于女性原因导致不孕而接受ART治疗的女性尿液中∑2NEOs浓度比由男性原因导致不孕而接受ART治疗的女性低24.10%(P<0.05)。[结论]上海地区ART女性存在农药广泛暴露。年龄、BMI、蔬菜水果摄入频率、宠物饲养情况以及不孕原因可能与ART女性农药暴露水平有关,但仍需要更多的人群数据验证本研究结果。

摘要：基于天麻转录组数据,设计特异引物,克隆天麻DRP1E(dynamin-related protein 1E)基因,命名为GeDRP1E(GenBase登录号为C_AA018577.1),借助ExPASy、ClustalW、MEGA等软件对基因进行生物信息学分析利用拟南芥、马铃薯遗传转化体系获得转基因植株,并对转基因拟南芥株高、结实率,转基因马铃薯微型薯的块茎长、宽、重量和淀粉含量等农艺性状进行检测和分析,初步解析GeDRP1E基因的功能。结果显示,GeDRP1E基因ORF全长1899 bp、编码632个氨基酸残基,相对分子质量为69.90 kDa,分子式为C3079H4973N883O933S19;理论等电点为7.27,不稳定系数为43.34,亲水性平均指数为-0.259,预测属于不稳定亲水性蛋白。GeDRP1E不存在跨膜结构,无信号肽,定位于细胞质。系统进化树显示,GeDRP1E与其他种类植物DRP1E蛋白之间具有较高的同源性,其中与铁皮石斛DcDRP1E(XP_020689662.1)同源性最高,为90.05%。运用双酶切法构建植物表达载体pCambia1300-35Spro-GeDRP1E,并通过农杆菌介导转化法获得了GeDRP1E基因的拟南芥互补突变体、马铃薯过表达株系。与拟南芥AtDRP1E基因突变体相比,GeDRP1E基因互补突变体株高、结实率表型得以恢复。与野生型马铃薯相比GeDRP1E基因过表达株系微型薯体积、重量显著增大,淀粉含量显著增高。初步推测GeDRP1E很可能参与调节线粒体的形态,从而影响拟南芥植株、马铃薯微型薯的生长发育。上述研究结果为深入阐明天麻块茎生长发育的分子机制奠定了基础。

摘要：针对石油库公路下装发油作业油气回收气相鹤管在气体压力变化及下装接头密封不严的情况下,相邻未进行装卸作业的气相鹤管会出现油气逆流逸散的问题,提出了在气相管接口部位加装夹片式止回阀的解决方案,为解决石油库公路发油下装气相鹤管油气逆流逸散问题提供了参考。

摘要：目的:分析计算机辅助设计与制造(Computer aided design/Computer aided manufacturing,CAD/CAM)树脂暂时冠修复乳前牙大面积缺损的疗效。方法:选取2018年2月-2023年6月于笔者医院进行治疗的108例乳前牙大面积缺损患儿为研究对象,依据入院先后顺序将其分为两组。对照组给予光固化复合树脂充填(n=54),观察组给予CAD/CAM树脂暂时冠修复(n=54),观察两组患儿的修复效果。结果:修复后3个月,两组缺损乳前牙修复体表面情况、色泽协调性、边缘密合度、继发龋比较差异均无统计学意义(P>0.05),修复后6个月,观察组缺损乳前牙修复体表面、色泽协调性、边缘密合度、继发龋有效率均高于对照组(P0.05)。结论:CAD/CAM树脂暂时冠在乳前牙大面积缺损修复中的效果较好,较光固化复合树脂充填更能够改善患儿远期预后。

摘要：目的:描述通辽市社区居民老年期痴呆流行病学调查的抽样设计、权重计算、调查工具、现场执行及质量控制方案。方法:采用三阶段不等概率抽样设计在内蒙古自治区通辽市调查65岁及以上的常住居民,采用10/66老年期痴呆系列研究(10/66 Dementia Research Group,10/66 DRG)评估工具获得老年期痴呆的疾病诊断,以计算机辅助个人访谈模式开展调查,并实施调查全程及时质量控制措施。结果:在通辽市9个旗/县/市/区的166个嘎查/村/居中共调查老人4345人,应答率为96.2%。计算抽样设计权数、无应答调整权数和事后分层调整权数后,将上述权数相乘并进行极值调整和标化调整,从而获得最终权数。171名访员接受培训,考核合格后开展入户调查,并采用计算机数据核查、录音核查和电话核查等质量控制措施,保证调查的真实性。结论:本调查采用严格的抽样设计和质量控制措施实施调查,并采用国际效度和信度满意的10/66DRG评估工具作为调查工具,具有国际跨文化可比性,可以为国内其他地区开展老年期痴呆流行病学调查提供方法学参考。

摘要：当今世界大约90%的能量供应都是由燃烧生成的。在燃烧场中,火焰的温度影响着场中各种组分链式反应的途径和浓度,获取燃烧场温度信息可以为提高燃料燃烧效率,改进燃烧装置的设计提供重要的支撑依据。随着我国在航空、航天和航海这类高端制造业领域的不断发展,各种大型燃气轮机和超声速发动机的研发进入加速期,此类燃烧装置产生的火焰具有高温、高压、湍流超声速和持续时间短等特点。传统的接触式测温法难以对这类湍流燃烧场进行温度测量,近年以激光光谱法为代表的非接触式测温技术逐渐走向成熟,并获得了广泛地应用。与超短脉冲相结合的飞秒相干反斯托克斯拉曼散射光谱测温技术凭借可提供高时间分辨率(每秒可提供上千个测温数据)、高测温精度和高测温灵敏度等优势而被应用到各种高温、湍流等复杂燃烧场景温度诊断中。文章概述了飞秒相干反斯托克斯拉曼散射测温技术的基本原理,综述了该技术在稳态火焰、加热气体、模拟燃气轮机等燃烧环境中测温工作的研究进展,简要介绍了飞秒时间分辨相干反斯托克斯拉曼光谱的研究和应用,着重介绍了可以实现毫秒量级时间分辨率的飞秒啁啾探测脉冲相干反斯托克斯拉曼散射测温技术和混合飞秒/皮秒相干反斯托克斯拉曼散射测温技术的基本原理和应用进展。指出了三种测温技术的优缺点,并提出飞秒相干反斯托克斯拉曼散射测温技术目前需要关注并解决的技术问题,主要为在高温高压湍流燃烧等极端条件下实现高精度CARS光谱高保真反演出温度信息,以及高温高压湍流燃烧场极端条件下如何获得高信噪比CARS信号的问题。展望了今后的发展趋势:通过高时间分辨的测量,获得湍流火焰中温度的瞬时演化规律,并建立各种复杂火焰的温度演化信息数据库,为研究各种发动机机理提供支撑。

摘要：在数字经济时代,如何抓住数字技术赋能职业教育变革的重要契机,增强产业结构变革的适应性,从而构建起职业教育新生态,是各国职业教育发展亟待破解的难题之一。瑞典政府为应对数字经济时代的新要求、产业转型升级对数字技能人才的迫切需求,采取了加强顶层设计、优化资源配置及调整育人模式等举措,以期能够在新一轮的信息技术革命中保持领先地位。基于以上分析,发现瑞典在推进职业教育数字化转型中呈现出以下特征:政府推动职业教育数字化作用突出、构建起多元协同的数字技能人才培养模式及注重提升校长和教师的数字素养。

摘要：苯系物来源广,在室内外空气中广泛存在,对人体健康具有巨大危害.吸附法由于成本低、操作简单而被广泛用于空气中挥发性有机污染物的去除.本文以4,4’-联苯二腈(DCBP)为单体,在ZnCl_(2)催化下合成了共价三嗪多孔材料CTF-DCBP,并采用SEM、BET、XRD、FTIR对其进行表征,研究了其对气态甲苯、氯苯和对二甲苯的吸附性能.结果表明,CTF-DCBP具有粗糙颗粒表面及层状堆积结构,主要为微孔和介孔的孔道分布.在25℃下,CTF-DCBP对气态甲苯、氯苯和对二甲苯的吸附在60 min即可达到平衡,其吸附等温过程符合微孔填充Dubinin-Astakhov(D-A)模型,最大饱和吸附量分别达到118.72、176.13、121.98 mg·g^(-1),并建立了吸附能与苯系物分子描述符之间的关系式,得到CTF-DCBP与苯系物的作用力主要是π-π共轭和氢键结合作用.CTF-DCBP对苯系物的吸附快且吸附量高,可为苯系物的新型吸附材料设计合成提供重要参考与借鉴.

摘要：随着我国城镇化的加速和农业劳动力的转移,农业现代化需求不断增加。为提高菠菜收割作业的现代化水平,解决现有菠菜收割机存在的问题,设计基于STM32的智能菠菜收割一体机。该设备集成了收割和收集功能,由收割部分、收集部分、机架部分及电控部分组成,具有结构简单、智能化、适应多地形等优点,有效提高了菠菜收割的效率和质量。