摘要：目的:观察针对绿色荧光蛋白(GFP)基因的发夹结构RNA(smallhairpinRNA,shRNA)表达载体(SHipU6GFP)对SGC7901胃癌细胞中GFP的抑制作用。方法:设计针对GFP基因的shRNA序列,构建SHipU6GFP质粒。采用质粒pCXGFP(5510bp)和含有鼠U6启动子pU6(3.3kb)质粒,应用LipofectamineTM2000将pCXGFP质粒和SHipU6GFP质粒转染SGC7901细胞。荧光显微镜观察转染效果和不同时间的转染效率。结果:质粒SHipU6GFP经酶切电泳后,出现3.3kb和约350bp条带,与实验设计的针对GFP的shRNA长度相符。说明本实验已成功构建了针对绿色荧光蛋白GFP基因的SHipU6GFP质粒。SGC7901细胞中观察到转染pCXEGFP质粒和SHipU6GFP质粒前后发绿色荧光的细胞数目明显减少。结论:shRNA可以有效地抑制SGC7901细胞中GFP基因的表达。

摘要：为探索千岛湖森林公园大气颗粒物浓度变化特征,选择游客游览高峰期5月、10月晴朗天,对3类游憩地12个监测点的大气颗粒物(TSP、PM10、PM2.5、PM1.0)浓度、气象因子等数据进行采集分析。研究了园内大气颗粒物浓度日变化规律、不同类型游憩地变化规律及大气颗粒物浓度变化与气象因子、游客游览行为的相关性。结果表明:1)5月、10月千岛湖国家森林公园均达到国家空气质量二级标准,大粒径颗粒物浓度呈早晚高,中午低的"V"字型,小粒径大气颗粒物浓度(PM2.5和PM1.0)呈"L"字形;2)以3类游憩地划分,大气颗粒物浓度从低到高的区域依次为游憩林地、临水休憩地、观景台;3)海拔、温度、气压、湿度对不同粒径的颗粒物影响较大;4)千岛湖森林公园内大气颗粒物浓度与游客游览活动关系密切,特别是对大粒径(TSP和PM10)颗粒物的增加最为明显。

摘要：通过实例 ,利用优化设计理论并从施工的角度详尽地分析了内支撑支护在汉口软土地基中的实际应用 。

摘要：全程机械化生产技术是西南地区马铃薯生产发展趋势,在调查研究和试验示范的基础上,总结提出了西南地区马铃薯主要种植制度、种植模式、机械化生产现状及存在的问题,提出了马铃薯机械化生产建议,为西南地区马铃薯机械化生产应用推广提供参考。

摘要：目的:构建高滴度大鼠carabin腺病毒干扰载体(Ad-carabin-shRNA)。方法:设计3对carabin-shRNA寡核苷酸序列,分别构建3个ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA腺病毒穿梭质粒,将构建好的ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA和pHBAd-BHG质粒共转染293A细胞,以包装Ad-carabin-shRNA,采用微量全细胞病变法检测病毒滴度。Ad-carabin-shRNA感染H9C2心肌细胞,实时荧光定量PCR和Western blotting检测carabin mRNA及蛋白表达。结果:3个ADV4-U6-CMV-carabin-shRNA干扰质粒构建成功,相对应的Ad-carabin-shRNA包装顺利,病毒滴度均为9×108 TU/mL。感染H9C2心肌细胞后,Ad-carabin-shRNA-1和Ad-carabin-shRNA-2均有显著干扰效果,carabin mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.01)。结论:Ad-carabin-shRNA构建成功,在心肌细胞中具有干扰carabin的效应。

摘要：从广西玉林博自某猪场采集的发病仔猪大脑和内脏病料中分离到一株病毒。病毒接种家兔后引起典型的奇痒、神经症状，接种PK-15细胞出现典型的细胞病变，病毒效价（TCID50）为10^-7.22／0．1ml。设计扩增PRVgE胞外区基因的引物，能扩增出约947bp的特异性片段，将扩增出的目的片段进行克隆、测序，并与国内外不同PRV毒株进行分析比较，发现该毒株与国内MinA株、Ea株、SH株、LA株、GXB株、GXW株核苷酸同源性在98．7％～99．4％之间，氨基酸同源性在98．1％～99．1％之间，上述结果证实该分离毒株为伪狂犬病病毒，命名为GXBB株。GXBB株与国内流行毒株同源性很高，说明目前广西PRV流行株变异不大。这为下一步广西伪狂犬病的预防和净化工作提供科学的理论基础。

摘要：目的探索基于医案的PBL教学法对中医皮肤病学教学效果的影响。方法同一年级本科学生随机分为2组,试验组采用基于医案的PBL教学法,教师遴选医案、梳理知识点、设计问题、针对问题开展教学,对照组采用传统教学法,2组均采用考试成绩和问卷调查评估教学效果。结果试验组学生"辨证分析"和"用药"部分测试成绩及综合成绩高于对照组;相对于对照组,试验组学生学习主动性、教学参与度和知识掌握度有所提高,逻辑分析和沟通交流能力有所增强。结论基于医案的PBL教学法有助于提高学生辨证论治皮肤病的水平和分析解决问题的能力。

摘要：采用文献法、调查法、统计法、逻辑法等研究方法,以参加2013—2015年福建省基础教育万名骨干教师培训中的190名中小学体育骨干教师为调查对象,对教师基本情况和教师专业发展的认识、态度、知识、能力、继续教育等现状进行调查,在此基础上对教师专业发展现状进行分析,总结出我省中小学体育骨干教师专业发展的特点及存在的问题,并提出相应的建议,给我省中小学体育教师培训机构的改革提供依据,同时为我省中小学体育教师专业发展提供参考与借鉴,为进一步深化我省中小学体育教育改革提供人才保障。结果表明:1)目前,福建省中小学体育骨干教师以年富力强者居多,年龄、职称结构较合理;教师专业发展意识强,学历层次由大专逐步向本科、硕士过度,但硕士比例小;2)教师专业发展态度端正,职业的稳定性和责任感强烈,但部分年轻教师缺乏专业发展的自主性;3)教师对专业知识的掌握比较扎实,主要通过互联网、图书资料、专家报告或讲座等方法来获取专业知识;4)专业能力水平方面,教师在体育教学、课外指导、体育保健、现代教育技术运用等方面能力比较强,而创新教育和科研两方面能力相对比较薄弱;5)当下,我省中小学体育骨干教师最需要强化的培训是课题申报技能、论文写作能力、专题讲座能力、教育科研方法、提高学历层次、教学设计能力,其中提高科研能力和水平是教师们最迫切的愿望。

摘要：本研究旨在通过向日粮中添加一种离子型饲料添加剂(别名为巴尔吡尔)研究在热应激条件下对奶牛生产性能的影响。试验选择健康泌乳中期荷斯坦牛200头,采用随机区组试验设计分为对照组(饲喂常规TMR)和试验组(TMR中添加50m L/头·d巴尔吡尔),每组各100头,试验期为60d。试验结果表明:试验期牛舍THI值大于72,处于热应激环境下;日粮中添加巴尔吡尔可降低奶牛直肠温度,奶牛平均采食量提高6.46%;群体每日产奶量和单头平均产奶量分别升高9.18%和8.19%;饲喂巴尔吡尔还可降低奶牛乳房炎发病率,但乳蛋白、乳脂、乳糖和非脂乳固体含量分别较对照组低1.75%、7.18%、1.94%和1.82%。综上所述,日粮中添加巴尔吡尔可提高在奶牛热应激环境下的采食量和产奶量,有助于缓解热应激对奶牛生产性能的影响。

摘要：根据GenBank中猪链球菌鸟氨酸氨甲酰转移酶基因(oct)序列(GenBank登录号:NZ_CP007497)设计引物,克隆猪链球菌ZY05719株的oct基因,构建p ET-28a-oct原核表达质粒并在大肠杆菌Rosetta中诱导表达,重组OCT蛋白即鸟氨酸氨甲酰转移酶用镍亲和层析柱纯化后,研究它对猪链球菌生物被膜形成的影响及介导猪链球菌黏附PK-15细胞的作用。结果显示,克隆出1 014 bp的oct基因,并检测出纯化的40 ku OCT融合蛋白具有良好的反应原性,且能提高猪链球菌形成生物被膜的能力及降低黏附PK-15细胞的作用。本研究成功克隆并表达了ZY05719株的oct基因,初步揭示了其生物学功能,为深入研究鸟氨酸氨甲酰转移酶在猪链球菌致病机制中的作用奠定了基础。