摘要：目的分析国境口岸13蚊种的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因序列,为建立蚊种分子鉴定方法奠定基础。方法设计1对扩增COⅠ部分编码区的PCR引物,对广东、海南和云南等国境口岸采集的致倦库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊等成蚊进行PCR扩增和序列测定,分析COⅠ核苷酸的系统进化关系。结果 13种蚊种的COⅠ基因扩增片段长度均约为400 bp,A＋T含量为69.64%~72.78%。同源性比较表明,同一蚊种间核苷酸序列同源性〉95.6%;不同蚊种间COⅠ片段核苷酸序列同源性为79.1%~93.4%。COⅠ核苷酸系统进化关系显示,从种的水平上看,白纹伊蚊、致倦库蚊、中华按蚊等上述所有蚊种均聚集成簇,即同种之间呈明显的聚集,均与形态学鉴定结果相一致。结论建立的COⅠ核苷酸鉴别技术可应用于国境口岸范围内成蚊种的区分,基本上可正确反映蚊虫的系统发育关系。这可以弥补蚊虫形态特征信息量的不足等传统分类系统的缺点,为国境口岸范围内外来的或新发现的蚊种的鉴别提供分子水平的技术依据。

摘要：原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,设计特异性引物,采用PCR方法扩增RBD基因,扩增产物经双酶切(EcoRⅠ/XhoⅠ)后定向克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒pET-30a(+)-GP-RBD,转化BL21(DE3)感受态表达宿主菌,在不同条件下(时间、IPTG浓度、温度)诱导表达目的蛋白,并用His-Band N+柱进行亲和层析纯化;以纯化的重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western blot和IFA鉴定重组蛋白的反应原性及免疫原性。结果显示:PCR扩增到长度为453bp的RBD基因片段;构建的重组质粒pET-30a(+)-GP-RBD经双酶切后得到与目的片段长度相同的特异性条带,测序结果显示没有突变;转化产物在培养7h、终浓度为0.4mmol/L IPTG和37℃条件下能够充分诱导目的蛋白表达,得到相对分子质量为25 000的重组蛋白,主要以包涵体形式存在,BCA试剂盒产量测定,每升诱导的重组菌可纯化约20mg纯度较高的目的蛋白;Western blot检测证实重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白能同时被抗His标签的单抗和兔源多抗识别并发生特异性反应,证明重组蛋白有良好的反应原性;IFA鉴定证实所制备的兔源多抗能够特异性识别表达MARV GP蛋白的重组杆状病毒rBacmid-GP-VP40,证明重组蛋白具有良好的免疫原性。结果表明:成功表达、纯化了MARV GP RBD蛋白,并完成了兔源多抗的制备,为MARV亚单位疫苗的制备和抗原、抗体检测方法的建立奠定基础。

摘要：[目的]研究不同剂量野山杏总黄酮对三黄肉鸡屠宰性能的影响。[方法]采用单因素试验设计,将96羽1日龄雌性三黄肉鸡随机分为4组,每组24羽。于14日龄开始,野山杏总黄酮低、中、高剂量组肉鸡分别灌服50、100、200 mg/(kg·BW·d)的野山杏总黄酮,对照组肉鸡灌服生理盐水,试验期42 d。28、35、42日龄时每组分别选取8羽肉鸡进行屠宰试验,测定并比较相同日龄下各组肉鸡的屠宰性能指标。[结果]高剂量野山杏总黄酮可显著或极显著(P<0.05或P<0.01)提高28、35、42日龄肉鸡宰前体重,中剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)提高35日龄肉鸡宰前体重。高剂量野山杏总黄酮分别显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)提高35日龄和42日龄肉鸡屠宰率。中、高剂量野山杏总黄酮极显著(P<0.01)提高28日龄肉鸡半净膛率。低剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)提高28日龄肉鸡全净膛率,显著(P<0.05)提高35日龄肉鸡全净膛率;中剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)提高35日龄肉鸡全净膛率;低、中、高剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)提高42日龄肉鸡全净膛率。低、中、高剂量野山杏总黄酮可显著或极显著(P<0.05或P<0.01)降低35、42日龄肉鸡皮下脂肪厚度。高剂量野山杏总黄酮可显著(P<0.05)降低28日龄肉鸡肌间脂肪宽度,极显著(P<0.01)降低35日龄肉鸡肌间脂肪宽度;低、中、高剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)降低42日龄肉鸡肌间脂肪宽度。低剂量野山杏总黄酮可显著(P<0.05)降低28、42日龄肉鸡腹脂率,中剂量野山杏总黄酮可显著(P<0.05)降低28、35、42日龄肉鸡腹脂率,高剂量野山杏总黄酮可极显著(P<0.01)降低42日龄肉鸡腹脂率。高剂量野山杏总黄酮可显著或极显著(P<0.05或P<0.01)提高35、42日龄肉鸡胸肌率,可显著或极显著(P<0.05或P<0.01)提高28、35、42日龄肉鸡腿肌率。[结论]灌服不同剂量的野山杏总黄酮能够明显改善三黄肉鸡的屠宰性能。

摘要：目的探讨“滑动骨瓣”术式应用于儿童开颅手术的可行性。方法术前精确设计骨瓣大小及切口形状,术中使用线锯切下骨瓣,切面呈斜形,不再咬大骨窗。关颅前分离骨窗周边的帽状腱膜下与颅骨骨膜之间隙,将骨瓣埋置于骨窗边帽状腱膜下,在骨瓣相应位置钻2枚小孔,穿入10号丝线,从皮肤切口处引出备牵拉用。缝合头皮,术后5￣7d高颅压消退不需要骨窗减压时,牵拉骨瓣至骨窗处,使之完全复位。结果29例病人均一次复位成功,无一例感染,无并发牵拉部位血肿,骨瓣复位良好,术后半年以上者出现骨性愈合。结论“滑动骨瓣”术式用于儿童开颅手术是安全、有效的,可免去骨瓣减压术后二期颅骨成形术。

摘要：目的:建立检测人RORγt(retinoid-related orphan receptor gammat)mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:根据人RORγt mRNA的保守序列设计特异性引物,提取经PMA和离子霉素刺激的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)总RNA,并逆转录成cDNA,与pMD-18T载体连接构建质粒标准品。采用qRT-PCR方法检测RORγt mRNA水平,并评价该方法的线性、特异性及重复性。应用该方法检测Graves病(Graves′disease,GD)患者外周血中RORγt mRNA的相对表达。结果:该方法标准曲线的相关系数为0.998,融解曲线分析显示单个峰,pMD18T-RORγt质粒标准品高、低拷贝数的批内、批间变异系数分别为6.5%,8.4%和9.6%,11.2%。初步研究表明GD患者组RORγt mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(t=-3.72,P<0.01)。结论:建立的检测人RORγt mRNA的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法灵敏、特异且重复性好,为临床应用提供了实验基础。

摘要：研究了水泥浆、偏高岭土地聚物、掺粉煤灰偏高岭土地聚物、水泥浆-偏高岭土地聚物增强处理再生骨料对混凝土抗压强度的影响。结果表明:四种增强材料处理的再生骨料对混凝土抗压强度的影响顺序大小为水泥浆-偏高岭土地聚物>偏高岭土地聚物>水泥浆>掺粉煤灰偏高岭土地聚物。

摘要：目的探讨用反求工程(RE)方法实现残冠和(或)残根数字模型三维重建的方法,为个体化桩核的CAD设计与制作奠定基础。方法 (1)选取牙体硬组织完整的离体牙10颗,按桩核预备标准预备后分别用螺旋CT机和Mi-CT机进行扫描,所获得数据以DICOM格式文件进行存储;(2)应用Mimics软件将螺旋CT机和Mi-CT机扫描获得的数据分别进行处理,获得牙齿标本的数字模型,Geomagic 9.0软件进行三维测量,同时生成STL格式文件;(3)用游标卡尺对牙齿标本进行测量,并与软件测量所获得的数据进行比较,采用配对比较t检验进行统计学分析。结果 (1)用反求工程方法对离体牙标本实现了三维重建,获得其数字模型。Mi-CT数据源三维数字模型较螺旋CT数据源三维数字模型而言,模型边缘轮廓更为锐利、清晰;(2)应用螺旋CT机和Mi-CT机扫描获得的数字模型,经软件测量,与牙齿标本测量结果相比均无统计学意义(P>0.05)。结论用反求工程方法能准确、快速地实现残冠和(或)残根模型的三维重建。

摘要：目的探讨上颈段哑铃形肿瘤的外科治疗策略及预后。方法回顾2000年1月至2009年12月收治的46例上颈段哑铃形肿瘤患者,分析其临床特点、外科分期、手术入路、切除方法、内固定重建技术及疗效。肿瘤性质包括神经鞘瘤33例,神经纤维瘤9例,恶性神经鞘瘤4例。依据前期设计的颈椎管哑铃形肿瘤的外科分期方法,Ⅰ期8例,Ⅱ期24例,Ⅲ期9例,Ⅳ期3例,Ⅴ期2例。经后外侧入路行肿瘤切除36例,前后联合入路行肿瘤切除10例。39例采用颈椎后路钉棒内固定系统重建,3例采用前后联合固定,4例未行内固定。结果 1例术中发生椎动脉损伤,压迫止血。术后发生脑脊液漏19例,2例继发颅内感染,经相关处理后痊愈。术后随访6～125个月,2例恶性神经鞘瘤患者于术后8个月、14个月出现局部复发,再次行手术治疗,分别于术后21个月、38个月因肺部转移导致全身衰竭死亡。其余患者未见复发,随访仍在持续进行中。结论上颈段哑铃形肿瘤的外科治疗具有相当的难度与风险,外科分期系统有助于合理制定手术方案。经后外侧入路或联合前方入路可实现肿瘤切除与重建,应注意相关并发症的处理与预防,以提高疗效。

摘要：目的了解闵行区娱乐场所从业人员艾滋病自愿咨询检测的现况及相关知识、态度及行为,为在该人群中进一步推广艾滋病自愿咨询检测提供依据。方法使用自行设计的问卷,由经过统一培训的调查员进行面对面的询问调查。调查内容包括社会人口学特征、流动情况、艾滋病自愿咨询检测现况及相关信息。结果219名调查对象中女性占89.0%,平均年龄为(25.6±6.7)岁,初中文化程度者为62.1%,34.2%的被调查者在上海娱乐场所从业时间超过1a。调查对象对血液传播、性传播和母婴传播这3种传播途径的正确回答率分别为94.5%、94.1%和81.7%。80%以上的人认为自己不可能感染HIV。51.6%的被调查者听说过免费的艾滋病自愿咨询检测。85.8%的被调查者表示愿意接受免费VCT。4.6%的人自述曾经做过HIV检测。结论闵行区娱乐场所从业人员艾滋病自愿咨询检测知晓率不高,艾滋病自愿咨询检测意愿较高,但是实际接受VCT的并不多,因此有必要制订更有效的干预策略在娱乐场所从业人员中推广艾滋病自愿咨询检测以对该人群进行行为干预及疾病监测。

摘要：【目的】研究花穗修剪与多效唑处理对妃子笑荔枝花穗生长的影响,为解决荔枝花而不实、坐果率低的问题提供依据。【方法】以15年生妃子笑荔枝为试材,设计花穗不经过处理(CK)、人工短截、机械短截、多效唑处理、多效唑处理+机械短截、多效唑处理+人工短截6个处理。盛花期、收获时分别调查各处理花穗生长情况、每穗果数及单株产量,并进行经济效益分析。【结果】在正常管理水平下,妃子笑荔枝花穗不经过处理和仅用多效唑处理的单穗坐果率及产量均较低;而经过短截修剪的荔枝单穗坐果率、产量及经济效益均较高。其中以多效唑处理+人工短截的产量和经济效益最高,但其人工支出大、工效低,仅适宜小面积应用;而采用机械短截花穗所需人工较少、效率高,适宜大面积推广应用。【结论】通过花穗修剪和多效唑处理可以调节荔枝的坐果率,只要运用得当,可以获得较高的产量和经济效益。