摘要：为建立鉴别检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪轮状病毒(PRoV)的方法,本研究分别针对PEDVN基因、TGEVM基因、PDCoVM基因和PRoVVP6基因设计特异性引物和TaqMan探针,经过优化反应条件,建立了同时检测4种病毒的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法仅特异性扩增PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV,与猪其它主要病毒无交叉反应,特异性较强;对PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV的质粒标准品的最低检出限分别为2.06×10^2拷贝/μL、2.06×10^2拷贝/μL、2.06×10^1拷贝/μL、2.06×10^3拷贝/μL,具有较高敏感性;组内与组间变异系数均小于1.1%,具有良好的重复性。应用该方法和普通多重RT-PCR检测临床采集的243份腹泻病料样品,两者的符合率为96.71%。本研究建立的方法为临床PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的鉴别检测及流行病学调查提供了一种快速、特异、敏感、高效的技术手段。

摘要：利用CRISPR/Cpf1基因编辑技术构建DDX21基因稳定敲除的细胞株,并检测其生物学功能。设计、构建靶向DDX21基因向导RNA表达载体,与Cpf1表达载体共转染HEK293细胞,通过流式筛选、基因测序、Western blot和细胞增殖能力检测鉴定细胞株;荧光定量PCR检测病毒感染后模式识别受体(TLR-3、TLR-7、MDA-5)、Ⅰ型干扰素、IL-6以及抗病毒蛋白OAS mRNA水平表达情况。结果显示:成功筛选到2株DDX21基因敲除的细胞株,蛋白免疫印迹显示DDX21蛋白不表达;与野生型(wild type,WT)相比敲除株形成细胞单层的时间明显延长(P<0.01);H9N2亚型禽流感病毒感染试验表明,模式识别受体TLR-3、MDA-5的mRNA表达水平上调,TLR-7表达水平无明显差异,IFN-α、IFN-β、IL-6及抗病毒蛋白OAS的mRNA表达水平下调,表明DDX21基因敲除阻断了DDX21-TRIF-MyD88信号通路;TCID50测定结果显示,差异最高可达到WT的3.01倍,表明DDX21基因敲除后流感病毒复制增加。本研究利用CRISPR/Cpf1系统获得2株DDX21基因稳定敲除的HEK293细胞株,为深入研究DDX21基因功能、病毒感染的天然免疫应答和调控研究奠定理论基础。

摘要：在分析轮胎/道路噪声发声机理的基础上,建立了轮胎/道路噪声各主要噪声源的发声模型,并将轮胎和道路的噪声波合成得到总的时域波形,通过离散傅立叶变换得到轮胎/道路噪声的频谱,得出了时域耦合因子行阵和频域耦合因子行阵,为低噪声轮胎花纹和低噪声路面的研究和设计提供了理论依据和技术路线。

摘要：利用HyperXtrude有限元模拟软件,分析了铝型材多孔模具不同焊合室结构对型材流速、温度及焊合质量的影响。研究发现,采用共焊合室时,型材焊缝质量较好,而分焊合室能平衡金属流动,型材出口流速和温度分布更均匀,且焊合室内金属的流动应力较小。经试模的料头分析,采用分焊合室结构可以顺利地实现挤压。

摘要：探讨了通过优化某厂UCM轧机各项工艺参数,可实现稳定批量化生产高强系列用钢,利用CSP(薄板坯连铸连轧)+TCM(冷连扎)机组生产抗拉强度超过540 MPa的高强冷硬钢带的可行性,采用新设计的轧制规程和工艺制度可实现稳定生产高强度冷硬钢带。

摘要：为了获得高纯度的白细胞介素-4(IL-4)蛋白,对分离得到的水貂外周血淋巴细胞经植物血凝素(PHA)诱导后,提取淋巴细胞总RNA,根据GenBank中登录的雪貂IL-4基因序列,设计并合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得了水貂IL-4基因序列全长399bp,编码132个氨基酸,与雪貂氨基酸序列同源性高达99.2%,与熊猫、犬同源性均为90.0%。将编码成熟蛋白基因构建到原核表达载体pProEX-HTb,IPTG诱导后,SDS-PAGE及Western blotting结果显示,IL-4表达产物为15ku的包涵体蛋白。通过His-Trap HP亲和层析预装柱变性、复性洗脱可获得高纯度的重组IL-4蛋白。本试验为水貂IL-4基因的进一步研究奠定了基础。

摘要：无人机边缘计算将无人机的移动性和边缘计算的源端处理优势相结合,可以在基础设施薄弱区域中提供计算、传输和存储服务,近两年得到了广泛关注。然而,无人机平台的计算、能量和存储容量有限,面对不断增长的内容服务请求,无人机边缘节点只能缓存部分流行度较高的内容。此外,为了保证服务的连续性,无人机之间往往需要接替提供缓存服务。现有的边缘缓存算法大多根据内容的请求历史来预测流行度,使得接替无人机上对新请求的内容服务启动缓慢,缓存命中率较低,限制了边缘计算缓存的性能。在此背景下,充分考虑无人机的移动性和内容请求的动态性,设计了一种针对接替无人机的动态缓存架构,并综合考虑接替无人机上缓存内容的流行度、相似性以及接替距离,提出了一种相似度感知缓存算法(Similarity-Aware Caching,SAC)。仿真结果表明,该缓存算法可以有效提升无人机接替场景中的缓存命中率和接替成功率。

摘要：背景随着我国帕金森患者人数的不断上升,帕金森病的防御和治疗已成为社会各界热切关注的焦点。目的设计一套基于穿戴式的惯性传感器网络系统,来评价帕金森患者的运动功能。方法采用Zig Bee技术组建短距离无线人体传感器网络,使用惯性传感器采集帕金森患者完成特定实验范式动作时的加速度和角速度数据,进而分析计算评估指标,评价患者的运动功能。结果实验结果表明,本文开发的系统性能稳定,设计的实验范式动作具有很好的代表性,能够满足系统评价患者运动功能的要求。

摘要：通过台架试验,完成了后处理镎提取工艺技术研究,获得了价态调整、镎纯化及镎尾端的操作参数和工艺参数。试验结果表明:系统收率和净化系数等技术指标满足设计要求,关键设备及辅助系统运行稳定,最终制备出合格的二氧化镎样品,这标志我国掌握了后处理镎提取工艺技术。

摘要：目的探讨并建立卒中后抑郁小鼠动物模型。方法先利用结扎颈总动脉造成小鼠不完性全脑缺血再灌注病理损伤,利用悬尾和强迫游泳方法诱导小鼠抑郁模型,利用正交试验设计全面考察其影响因素,确定最佳造模条件。结果以缺血5 min,再灌10 min,再缺血5 min所诱导抑郁模型最为明显,且死亡率较低。结论利用此方法所造卒中后抑郁模型具有操作简便、成功率较高且经济的特点,适用于该类药物筛选。