摘要：大坂隧洞工程为国家大型调水工程,灌溉面积上百万亩,但建设和设计之困难程度国内外罕见,也无先例。采用国内外先进的双护盾TBM掘进技术,使掘进顺利进行,该工程已完成主体工程量的95%以上。为国内外长距离、高埋深软硬岩调水工程的输水方法优化及设计与施工提供借鉴及管理成功的实例。

摘要：目的为了研制Daxx-C抗体并观察其在宫颈癌细胞中的应用效果,构建原核表达载体pET28a/DM626-740,将其在大肠杆菌中进行诱导表达,纯化表达产物,鉴定其抗原性。方法用PRIMER5.0软件设计Daxx-C基因片段(氨基酸626-740)特异性引物,引入BamHI和SalI酶切位点,PCR扩增目的基因。将PCR产物连入载体pMD18-T,构建pMD18-T/DM626-740;然后,将BamHI和SalI酶切产物连入载体pET28a,经酶切鉴定及DNA序列分析后,构建原核表达载体pET28a/DM626-740。将其转化*** BL21,IPTG诱导表达,利用Ni琼脂糖凝胶层析柱纯化表达产物,Western-blot检测表达物与纯产物。结果双酶切和DNA测序结果显示,PCR正确扩增了Daxx-C基因片段并成功连入载体pET28a,构建了原核表达载体pET28a/DM626-740;该质粒在***中诱导表达分子量约19kDa目的蛋白,且该蛋白能被抗Daxx抗体检出。结论构建的原核表达载体pET28a/DM626-740能在***中表达目的的蛋白6His-DM626-740,并具有良好的抗原性。

摘要：目的：制备苏丹红I完全抗原。方法：根据苏丹红I（Sudan-I）分子特点，合成Sudan-I结构类似物，与sudan-I结构相比，该结构类似物在其偶氮环对位引进一个羧基。通过碳二亚胺法（EDC）与牛血清蛋白（BSA）载体蛋白偶联，偶联产物经透析纯化后，用SDS凝胶电泳、紫外扫描鉴定，Sudan-I结构类似物与BSA的平均偶联比达到2～3个。用该偶联物免疫小鼠，获得抗苏丹红I血清。结果：成功制备了苏丹红I完全抗原。结论：通过合成结构类似物，与大分子物质偶联，获取抗苏丹红I血清是可行的。

摘要：针对传统采煤工艺在缓斜中厚煤层应用中煤炭采出率低及采掘接续紧张等问题,结合郭屯煤矿4302工作面地质条件,提出采用顺拉方式设计工作面的施工方案。首先对工作面回采巷道布置、生产系统等进行了合理设计;其次优化设备选型,改进原运输机缺陷;最后对缓斜煤层倾角影响下的俯采角度控制、设备防护等问题提出了针对性工艺及措施。

摘要：目的研究盐酸水解过程中,水解时间和添加巯基乙醇和苯酚保护剂对鸡肉中18种氨基酸含量的影响,确定获得鸡肉氨基酸最高含量的盐酸水解方法。方法以30个鸡胸肌(3种鸡、每种10个)为实验对象,设计6个水解时间,研究盐酸水解时间对鸡肉样品中18种氨基酸含量的影响,确定获得氨基酸最高含量的盐酸水解时间。在上述研究的基础上,随机选择6个鸡胸肌(3种鸡、每种2个)为实验对象,设置3个水解时间,研究巯基乙醇和苯酚对鸡肉样品中18种氨基酸含量的影响,最终确定获得鸡肉中18种氨基酸最高含量的盐酸水解方法。结果缬氨酸(valine,Val)和异亮氨酸(isoleucine,Ile)的最佳水解时间为24或26h,两水解时间无显著性差异(P>0.05);其余16种氨基酸的最高含量均在水解22 h时;Ile的含量在盐酸水解法水解24 h显著高于20和22 h (P0.05)。Gly在苯酚+盐酸水解法水解22h含量最高,Ala在盐酸水解法水解22 h含量最高,Tyr和Phe在巯基乙醇+盐酸水解法水解22 h含量最高;Val在盐酸水解法水解24 h含量最高,脯氨酸(proline,Pro)和赖氨酸(lysine,Lys)在苯酚+盐酸水解法水解22 h含量最高,亮氨酸(leucine,Leu)在巯基乙醇+盐酸水解法水解22h含量最高;其余氨基酸在不同水解方法及水解时间中均无显著性差异(P>0.05),但都在盐酸水解法水解22 h时含量最高。结论巯基乙醇和苯酚对鸡肉中的含硫氨基酸无保护作用,获得鸡肉中18种氨基酸最高含量的盐酸水解方法是盐酸水解法水解22 h。

摘要：利用腺胃扩张症(PDD)患病鹦鹉腺胃RT-PCR阳性病料,接种猪睾丸(ST)传代细胞,分离禽波纳病毒(ABV),建立实时RT-LAMP检测方法。将阳性病料接种ST细胞单层传代,出现细胞圆缩、脱落,ABV基质蛋白(M)基因扩增产物出现预计大小351bp条带,测序后进化树分析显示为ABV5基因型。针对M基因设计ID37、ID30、ID19、ID6和ID1共5组引物,后3组引物RT-LAMP呈阳性反应。利用钙黄绿素建立实时RT-LAMP,分别在36(ID30)、38(ID37)和49(ID19)min出现扩增反应曲线,60min内扩增达到峰值。对各种临床样品检测与RT-PCR结果一致,新城疫等类症病毒未见阳性反应,显示较高的特异性;对细胞培养物检测10-1～10-5为阳性,比较RT-PCR敏感性提高约100倍。RT-LAMP检测方法的建立为PDD防制提供新的检测方法,也是波纳病公共卫生研究有益的参考。

摘要：目的采用RT-LAMP技术建立一种针对H7N9人禽流感病毒的特异、灵敏、快速、可视、简便的检测方法。方法根据H7N9人禽流感病毒HA基因的保守序列,利用Primer Explorer V4软件,设计一套针对HA基因的7个区域的5条特异性引物,优化反应体系与扩增条件,并验证其特异度与灵敏度。结果该方法能检测出H7N9亚型流感病毒,而对H1亚型、H3亚型、H5亚型、H6亚型、H9亚型流感病毒、乙型流感病毒、人副流感病毒、呼吸道合胞病毒、人冠状病毒、人偏肺病毒、人腺病毒、人博卡病毒均无扩增反应,其最低检出限为0.01 pg。另外,扩增反应只需要45 min即可判读结果,并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化诊断。结论本研究建立的RT-LAMP检测方法具有高特异度、高灵敏度、快速简便、可视化判读结果等优势,适合在基层进行H7N9人禽流感病毒的快速检测,并可以应用于大流感疫情的准确筛查。

摘要：设计了一种三角形嵌套结构的具有四个频带的多频天线,该天线由三个三角形金属环和一个三角形金属片形成的辐射单元嵌套构成,四个单元共用一个顶点,可通过共面波导进行馈电。应用电磁仿真软件CST进行仿真分析,结果表明多频天线的频带个数、中心频点和带宽是由嵌套三角形的个数、高度和顶角角度控制,且各频点与相应单元的高度之间具有一致的规律。仿真设计了2.4GHz、3.5GHz、5.2GHz和5.8GHz四个频带的多频三角形分形嵌套单极印刷天线,并制作了天线实物进行实验验证。研究表明,三角形分形嵌套天线通频带可控性良好,且尺寸较小,易于制造,可广泛应用于WLAN/WiMAX等领域。

摘要：建立同时鉴别检测幼发拉底斑鳖和斑鳖的双重荧光PCR方法。通过对鳖科动物细胞色素b基因序列比对,针对幼发拉底斑鳖和斑鳖,设计合成通用引物和特异性鉴别探针,经反应体系和反应参数优化,建立了快速检测鉴定幼发拉底斑鳖和斑鳖成分的TaqMan双重荧光PCR方法。特异性试验结果显示,建立的方法可以快速、准确地鉴定幼发拉底斑鳖和斑鳖,与白唇泥龟、大麝香龟、巴西红耳龟、窄桥麝香龟、东北鳖以及豹纹陆龟等6种龟鳖目动物无交叉反应。分析灵敏度试验结果显示,对内含目的基因的重组质粒,检测下限均可达到10 copies/μL,能够满足龟鳖产品检测对灵敏度的需求。对58份口岸送检的龟鳖目动物样本进行检测,检出幼发拉底斑鳖样品1份,与普通PCR测序结果一致。本研究建立的双重荧光定量PCR方法灵敏、特异,重复性好,可快速准确鉴定斑鳖属动物及其制品,本方法为口岸濒危动物及其产品快速鉴定提供了新的可靠方法。

摘要：防生化防护服是医疗以及从事生物化学研究人员所必需的防护装置,也是工作人员与有毒有害物质隔离的有效措施。但是,目前大多数防生化防护服都使用正压原理,使得工作人员操作的灵活性下降,并且穿脱困难不易掌握;同时,在工作中还存在着面罩结雾、服内温度高等问题,不仅舒适性差,而且严重影响工作人员的工作效率。本研究基于防护服以上弊端,在保证防护服防护性能的前提下,通过引入新设计理念、优化防护服结构,从提升防护服舒适性、灵活性方面着手,对防护服进行科学合理的优化改良,对医疗服务及生物化学相关行业发展具有十分重要的推动作用。