摘要：以16S rRNA基因为检测靶基因,设计10种常见细菌的DNA探针,将探针固定于硝酸纤维素膜条;PCR扩增细菌的16S rRNA基因片段并标记生物素后与膜条杂交;采用碱性磷酸酶标记的链亲和素检测生物素标记,以NBT/BCIP显色。该膜条不仅能单独检测10种细菌中的任何一种,也能同时检测5种细菌。该方法具备高通量、低成本、快速、准确等特点,具有良好的临床应用前景。

摘要：目的研究淫羊藿苷(ICA)联合LY294002对人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)细胞的促凋亡作用及机制。方法不同浓度ICA、LY294002作用ACC-M细胞24 h、48 h、72 h后采用噻唑兰比色法测定细胞的抑制率。筛选联合用药浓度并将细胞分为:A(阴性对照组,不加任何药物)、B[(LY294002抑制浓度(IC)_(50)),即阳性对照组]、C(ICA IC_(50))、D(ICA IC_(20)+LY294002 IC_(10))、E(ICA IC_(40)+LY294002 IC_(10))组;各组分别给予相应药物处理细胞48 h后,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,免疫印迹法检测各组细胞磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子(NF)-κB蛋白表达水平。结果与A组相比,不同浓度ICA、LY294002对ACC-M细胞增殖均具有抑制作用。不同浓度ICA联合LY294002 IC_(10)均可抑制细胞增殖,抑制率与ICA浓度呈剂量依赖性(P<0.05)。干预48 h后,E组的细胞凋亡率高于B、C组(P<0.05),镜下可见各浓度药物组细胞均表现有典型的凋亡细胞形态学特征;E组p-AKT、NF-κB蛋白表达水平低于B、C组(P<0.05)。结论ICA联合LY294002可能是通过抑制p-AKT、NF-κB蛋白表达而促进ACC-M细胞的凋亡。

摘要：为分析不同免疫状态下禽网状内皮组织增生症病毒(reticuloendotheliosis virus,REV)和A亚群禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV-A)共感染对鸡生长性能及免疫器官的影响,通过对1日龄和10日龄常规疫苗免疫鸡群、1日龄灭活疫苗免疫鸡群、1日龄活疫苗免疫鸡群进行REV与ALV-A单感染或共感染,于不同日龄称重,采集免疫器官,对生长性能、免疫器官比重进行比较和分析。结果显示,1日龄鸡单感染或共感染REV和ALV-A均会引起发病、死亡及体重下降,REV、ALV-A单感染组及共感染组平均病死率依次为27.6%、11.6%及31.9%,表明,疫苗免疫刺激增强了REV与ALV-A感染的致病性。10日龄鸡REV、ALV-A单感染及共感染于81日内病死率分别为13.3%、6.7%及20%,低于1日龄感染各相应组,体重下降程度也低于1日龄感染鸡,表明鸡的日龄越高对REV、ALV-A感染的抵抗力越强。活疫苗与灭活疫苗免疫的比较显示,两种疫苗免疫应激均能引起鸡体重下降明显,且活疫苗免疫对体重的抑制作用更明显。REV单感染和共感染对生长发育的抑制作用高于ALV-A单感染,尤其是共感染对鸡体重的抑制作用最明显。对免疫器官比重的影响方面,1日龄感染时,共感染组胸腺比重显著降低,10日龄感染影响不显著,表明鸡日龄越大对病毒感染的抵抗力越强;常规免疫可引起法氏囊比重下降,但对法氏囊的影响是可恢复的,而REV单感染和共感染会加重常规免疫对法氏囊的损伤,且损伤更持久或不可恢复;ALV-A单感染对法氏囊的损伤影响不明显;单感染和共感染对脾脏比重的影响均不显著。本研究为深入研究REV和ALV-A单感染或者共感染诱导鸡群发生免疫抑制机制积累了重要的实验数据。

摘要：以核壳结构复合而成的催化剂,在催化反应中常表现出较高的整体活性、大的比表面积、优异的择形催化效果和良好的热稳定性.部分催化载体因具有优异的择形效果和结构稳定性,在多元复合核壳催化剂的设计中也占据了一定的地位.本文主要介绍了几种常用催化剂载体(Al_2O_3、SiO_2、ZSM-5)参与复合的核壳催化剂制备与应用的概况.

摘要：临床见习作为连接理论知识和临床实践的桥梁,在医学生的早期职业生涯中担负着至关重要的作用,如何在有限的见习时间内激发学生的学习兴趣,培养独立思考、综合应用理论知识分析、解决临床问题的能力成为临床教学关键。针对心血管疾病特点,在八年制医学生循环系统临床见习阶段采取心内科联合心外科的CBL教学模式,为心血管疾病的临床教学提供新的思路,提高了学生对心血管专业知识的兴趣,促进学生最大程度获取直接临床经验以及带教老师的间接经验,利于学生横向及纵向的宏观临床思维能力形成,同时节约了教学时间成本。

摘要：自新冠肺炎(COVID-19)疫情发生以来,口罩由于可以有效的防止病毒传播,成了不可或缺的防疫物资,在复工复产的过程中也发挥了重要的作用。在保证安全的前提下,口罩的重复利用,对缓解市场的供需矛盾和避免资源的浪费具有重大意义。常用的一次性无纺布口罩分为里、中、外三层,中间一层为隔离过滤层,是起到防护效果的关键层,使用的材料是超细聚丙烯熔喷布(简称熔喷布)。在生产过程中,熔喷布通常需要驻极处理,从而利用静电作用吸附病毒及含病毒的颗粒,达到防护效果,并且电荷越多,吸附能力就越强,对病毒的阻隔效率也越高。因此,对熔喷布电荷稳定性的研究是实现口罩可重复利用的关键。本论文系统总结了驻极工艺、储存环境及聚丙烯的结构对空间电荷的影响,主要包括充电电压、充电温度与时间、储存环境、聚丙烯的结晶结构与纤维结构,从而对高性能可重复利用口罩的设计与生产提供科学指导。

摘要：目的构建人降钙素原(procalcitonin,PCT)原核表达载体,获得高纯度PCT重组蛋白。方法根据NCBI上PCT基因序列设计引物,利用PCR技术扩增PCT基因,构建PCT/p ET-22b(+)重组表达载体,转化至大肠埃希菌(***)BL21中诱导表达;采用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白,用western blot和胶体金法对其进行鉴定。结果琼脂糖凝胶电泳结果显示PCR扩增产物约为350 bp。同源性比对分析结果表明,PCT基因片段(348 bp)成功插入p TG19-T载体,未出现碱基突变。用Bam HⅠ和HindⅢ对重组表达载体双酶切,得到约为350 bp和5 500 bp片段。SDS-PAGE电泳显示PCT重组蛋白以可溶性形式存在,Mr约14 000,经镍柱亲和层析法纯化后即可获得。western blot和PCT胶体金法结果呈阳性,显示融合蛋白含组氨酸标签(His-tag),成功表达出PCT重组蛋白。结论应用重组DNA技术成功构建PCT基因融合重组表达载体,通过蛋白质表达纯化技术获得PCT融合蛋白。

摘要：目的测定芒柄花素的平衡溶解度和油水分配系数,为设计芒柄花素新剂型提供理论基础与依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定芒柄花素在水、不同缓冲盐溶液中的质量浓度,并运用摇瓶法测定芒柄花素在正辛醇-水、缓冲液体系中的表观油水分配系数。结果 37℃下芒柄花素在水中的平衡溶解度为2.079±0.036μg·mL^(-1),随着pH值增大,芒柄花素的平衡溶解度增大。芒柄花素在正辛醇-水体系中的表观油水分配系数lg P_(app)=2.79±0.03,随着缓冲盐溶液的pH值增大,芒柄花素在正辛醇-缓冲盐溶液体系中的油水分配系数减小。结论建立的方法可以准确测定芒柄花素的平衡溶解度和表观油水分配系数,科学合理地预测药物在体内的吸收与分布情况。

摘要：目的 构建人白细胞介素(interleukin,IL)-26慢病毒表达质粒与基因敲除质粒,为研究IL-26基因在细胞信号通路及细胞自噬中的功能奠定基础。方法 利用RT-PCR从人外周血单个核细胞中扩增IL-26基因序列,克隆至pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP真核表达载体中,构建过表达质粒;并根据IL-26外显子序列设计4个敲除靶点Exon1sgRNA1、Exon1sgRNA2、Exon3sgRNA1、Exon3sgRNA2,利用CRISPR/Cas9技术构建至lentiCRISPRv2载体中,构建基因敲除质粒。将过表达质粒和基因敲除质粒分别瞬时转染至HEK293T细胞,利用RT-qPCR和Western blot验证IL-26 mRNA和蛋白的表达情况。并对IL-26进行氨基酸序列分析、结构预测及亚细胞定位观察。结果 通过酶切、测序鉴定及生物信息学分析显示,IL-26全长516 bp,编码171个氨基酸。IL-26过表达质粒转染的HEK293T细胞与正常对照组相比,IL-26 mRNA水平升高了656.789倍,蛋白质水平升高了1.978倍,差异均有统计学意义(t分别为17.976和7.859,P分别<0.000 1和<0.001)。4个敲除靶点Exon1sgRNA1、Exon1sgRNA2、Exon3sgRNA1、Exon3sgRNA2质粒转染至HEK293T细胞中后,IL-26的表达水平分别下降了0.930、0.980、0.523 3和0.316 9倍,其中Exon3-sgRNA2质粒能够显著下调IL-26的表达(t=7.440,P <0.001)。IL-26蛋白的前22个氨基酸存在信号肽结构,且具有一定的跨膜功能,IL-26存在于细胞质中。结论 成功构建了IL-26过表达和基因敲除质粒,为后续IL-26功能的研究奠定了基础。

摘要：目的探讨应用自体耳软骨游离移植矫治重度乳头内陷的方法及疗效。方法自2012年7月至2015年7月,对收治的12例(21侧)重度乳头内陷患者,在乳晕上设计4个区,对称、等大、菱形;切除菱形区内的乳晕皮肤,在下象限内的菱形区内彻底松解切断乳头下挛缩纤维束及平滑肌,将取出的耳甲腔软骨修剪成圆柱形,植于乳头内及乳头基底部,并用乳晕下的乳腺组织将软骨包裹;乳头基底部采用荷包缝合,然后在合适的位置上固定圆柱形软骨,切口分层缝合。结果术后所有患者获随访6~15个月,切口均一期愈合。无乳头坏死发生,无麻木感,乳头勃起功能正常,乳头凸度及外形满意,触感具有乳头组织的特有韧性;后期切口瘢痕不明显,无复发。结论采用自体耳软骨游离移植是治疗重度乳头内陷的有效方法之一。