摘要：为建立一种检测牛轮状病毒(BRV)抗体的双抗原夹心ELISA方法,本试验根据NCBI公布的BRV参考毒株NCDV序列,设计针对牛轮状病毒VP6基因的引物,用载体pCold-TF表达VP6蛋白,将表达的VP6蛋白作为捕获抗原,HRP标记的VP6蛋白作为检测抗原,建立检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法。特异性试验表明该方法特异性良好;敏感性试验显示,该方法可检测到血清最大稀释倍数为1∶1600;重复性试验表明,批间变异系数在4.21%~7.24%之间,批内变异系数为在1.35%~3.52%之间,重复性良好;临床样品检测表明与微球间接凝集方法检测结果符合率为94.4%。结果表明,建立的检测BRV血清抗体的双抗原夹心ELISA方法适用于临床样本的检测,可为牛轮状病毒的快速诊断提供技术支持。

摘要：X荧光多元素分析仪在有色冶金领域的作用日渐突显,多道技术是X荧光多元素分析仪中重要的信号采集处理技术,多道技术主要分为模拟多道和数字多道两类,目前已具有大量数字化的发展趋势。为了保证X荧光多元素分析仪的性能,在分析仪中设计并应用了数字多道技术。

摘要：背景:群体反应性抗体可介导超急性排斥反应,导致群体反应性抗体阳性致敏患者肾移植成功率和移植物存活率均低于非致敏患者。目的:根据人类白细胞抗原交叉反应组配型标准为群体反应性抗体阳性致敏肾移植患者选配合适供者,观察移植后急性排斥反应发生率及移植肾存活情况。设计:病例观察。单位:南方医科大学珠江医院。对象:选择1997-01/2003-12在南方医科大学珠江医院器官移植科施行肾移植136例群体反应性抗体阳性的致敏受者,男41例,女95例,年龄(45±9)岁。初次肾移植115例,2次移植18例,3次移植2例,4次移植1例。所有受试对象均对检测项目知情同意,实验经过医院伦理委员会批准。LAT莱姆德抗原板和LAT-Mix混合抗原板购自美国OneLambda公司。SMT72R抗人类白细胞抗原-Ⅰ类单克隆抗体湿板和人类白细胞抗原-Ⅱ类DNA分型试剂购自美国OneLambda公司。方法:以酶联免疫吸附试验动态监测患者手术前后IgG型抗人类白细胞抗原抗体水平及其特异性。应用抗人类白细胞抗原-Ⅰ类单克隆抗体湿板进行供、受者人类白细胞抗原-Ⅰ类抗原分型,微量序列特异性引物法进行供、受者人类白细胞抗原-Ⅱ类基因分型,根据美国器官共享网制定的人类白细胞抗原交叉反应组配型标准和Ⅱ类抗原可接受性错配原则进行供、受者选配。评估抗原交叉反应组配型原则下患者移植术后急性排斥反应发生率及移植肾1,3,5年存活率进行评价。主要观察指标:①致敏患者手术前后抗人类白细胞抗原抗体水平及特异性。②供受者人类白细胞抗原组织配型。③肾移植术后急性排斥反应发生率及移植肾存活率。结果:纳入136例PRA阳性致敏患者均进入结果分析,无脱落者。①致敏患者中104例存在抗人类白细胞抗原-Ⅰ类IgG抗体,76例存在抗人类白细胞抗原-Ⅱ类IgG抗体,44例同时存在抗人类白细胞抗原-Ⅰ类和Ⅱ类IgG抗体。②按照传统人类白细胞抗原配型标准供、受者人类白细胞抗原0,1,2,3,4个抗原错配者分别为7,26,47,39和17例;按照人类白细胞抗原交叉反应组配型标准供、受者人类白细胞抗原抗原0,1,2,3,4个抗原错配者分别为31,53,36,16和0例。③按人类白细胞抗原交叉反应组配型原则,人类白细胞抗原无错配者的急性排斥反应发生率明显低于2个和3个抗原错配者,差异有统计学意义(P<0.05),人类白细胞抗原无错配者移植肾1,3,5年存活率高于2个和3个抗原错配者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:①人类白细胞抗原交叉反应组配型标准能提高肾移植供受者的相配率。②良好的人类白细胞抗原配型可降低肾移植术后急性排斥反应的发生率,提高移植肾的存活率。

摘要：介绍铝热轧机主电动机采用可控硅串级调速的方法及应用,设计一种铝热轧机大功率交流电动机的可控硅串级调速系统,对电动机调速控制进行仿真,给出调速系统原理图、PI调节器和触发器等主要模块组成电路及其功能。介绍该系统应用过程的可控硅导通测试方法和其他模块调试方法,并在较大变速范围内使用。与其他大功率电动机调速系统相比,该调速系统具有能耗低、调速范围大且平稳、机械特性硬度好、动态性能好、投资少等优点。

摘要：目的探讨大鼠青光眼应激模型中视网膜神经节细胞PTEN基因表观遗传修饰及表达的影响。方法 (1)大鼠青光眼模型及处理。选择清洁级雌性Wistar大鼠30只,采用完全随机设计方法分为正常对照组10只、模型组10只、模型+药物干预组(甲钴胺处理)10只。除正常对照组外,其余大鼠均建立大鼠青光眼应激模型,建模完成后模型组不采取任何措施处理,正常对照组不参与建模,模型+药物干预组建模成功后采用甲钴胺进行处理,两组均干预11周。3组大鼠处死后,摘取眼球,完成视神经节细胞(RGCs)分离,用DAPI和PITC染色,荧光镜观察凋亡小体和caspase-3和PTEN细胞定位;采用免疫组织化学观察PTEN的表达。采用Western blot分析RGCs的PTEN和AKT(Ser473)表达量。(2)大鼠青光眼模型RGCs的PTEN基因表观遗传修饰的改变。造模后的1、3、5、7、9、11周处死大鼠,摘取眼球,完成RGCs分离,并将组织分为两份,一份用于测定PTEN的表达;另外一份于检测RGCs的PTEN基因启动子组蛋白(H3K9或H4K8)的乙酰化状态。结果模型+药物干预组处理后1、3、5、7、9、11周RGCs凋亡率低于模型组(P0.05),低于模型组(P0.05),均高于模型组(P<0.05)。结论大鼠青光眼应激模型中视网膜神经节细胞PTEN基因表观遗传修饰及表达能产生明显的影响,能通过改变AKT(Ser473)表达量抑制疾病发展。

摘要：为建立一种可同时检测鹅星状病毒(GoAstV)、鹅细小病毒(GPV)和鹅坦布苏病毒(TMUV)的方法,根据GenBank上公布的GoAstV、GPV和TMUV的保守基因序列设计3对特异性引物,通过优化反应条件和反应体系,建立了能够同时检测GoAstV、GPV和TMUV的三重PCR方法,并初步应用于临床。结果显示:所建立的三重PCR检测方法能特异性扩增GoAstV、GPV和TMUV三种病毒的目的片段,对鹅副黏病毒、禽流感病毒、禽腺病毒和鹅圆环病毒的检测结果均为阴性,对GoAstV、GPV和TMUV的最低检出浓度分别为1.26×10^(5)、1.26×10^(3)和1.26×10^(5)copies/μL。利用三重PCR和单项PCR方法同时对黑龙江省部分鹅场的32份临床样品进行检测,3种病毒的阳性检出率分别为56.25%、6.25%和6.25%,2种方法的检测结果一致。结果表明,本试验中建立的三重PCR检测方法快捷、敏感、特异,能够用于GoAstV、GPV和TMUV的流行病学调查和临床检测。

摘要：目的建立用于牛源性样本中牛副流感病毒3型(BPIV3)RT-PCR检测方法。方法选择已发表的BPIV3神经氨酸酶(HN)基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物,建立BPIV3 RT-PCR方法。并对方法的特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的RT-PCR方法检测137份牛源性样本。结果建立的BPIV3RT-PCR方法与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为6 lgTCID_(50)/mL;BPIV3cDNA在-30℃冰箱放置12个月仍可检测出目的条带;应用建立的方法检测137份牛源样本,核酸阳性率为14.6%。结论建立的BPIV3荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本中BPIV3核酸的检测。

摘要：使用TALEN技术制作p53基因敲除大鼠模型,建立种群并分析大鼠表型。设计特异性识别p53基因外显子2的TALEN蛋白并构建相应载体,将体外转录的TALEN m RNA注射SD大鼠受精卵,出生后从仔鼠中通过测序筛选靶位点正确剪切的阳性小鼠。结果显示,注射得到11只新生仔鼠,通过测序发现其中有10只靶位点发生剪切。选取其中4只作为首建鼠进行繁殖。p53基因敲除纯合子表现出肿瘤易发性,主要自发性肿瘤类型为恶性纤维组织肉瘤。此外,p53基因敲除纯合子大鼠表现出眼睛发育异常,视网膜变性及晶状体纤维排列紊乱。通过TALEN技术高效地获得了p53基因敲除大鼠模型,纯合子敲除大鼠除了易发肿瘤并伴有眼发育异常,因而该敲除大鼠模型除了可用于研究肿瘤发生机制外,也可用于研究p53基因在眼发育过程中的功能。

摘要：目的建立用于牛源性样本牛副流感病毒3型(BPIV3)实时荧光定量PCR (Q-PCR)快速检测方法。方法选择已发表的BPIV3 HN基因高度保守区域作为靶基因,设计合成引物和探针,建立BPIV3Q-PCR方法。并对方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性等进行方法学评价。同时用建立的Q-PCR方法检测105批次牛源性样本。结果建立的BPIV3Q-PCR方法线性范围为1×101拷贝/μl^1×108拷贝/μl;与牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛鼻气管炎病毒(BHV-1)、仙台病毒(SV)均无交叉反应;检测敏感度可以达到1.0×10~1拷贝/μl;3个不同浓度梯度标准品3次不同实验平均变异系数均小于5%。应用建立的方法检测105批次牛源性样本,BPIV3核酸阳性率为12.4%。结论建立的BPIV3QPCR检测方法线性关系良好,具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本BPIV3的快速定量检测。

摘要：能源与动力工程专业卓越工程师的培养将通过校企合作形成完整的培养流程,参与卓越计划的学生,专业设计能力、实践能力、创新能力、社会适应能力、团队合作能力、国际视野等各方面综合素质将得到显著增强;将进一步在具体方面逐步落实"卓越工程师计划",不断完善综合培养方案,将理论知识学习与专业实践相结合,同时将严格学生及导师考核制度,从而保证培养计划的顺利进行,为国家培养更多的卓越的工程型人才。