摘要：目的使用CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除人类肝癌细胞HepG2中的甲状腺激素受体相关蛋白3(THRAP3)基因,构建THRAP3基因敲除细胞系。方法根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性靶向THRAP3基因第3个外显子相关序列的多条小向导RNA,通过T7核酸内切酶筛选出切割效率最高的载体,构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒。测序鉴定后,将重组质粒转染至HepG2细胞中,用嘌呤霉素(puromycin)抗性筛选细胞株,挑取单克隆,再用PCR、测序等方法鉴定细胞基因型,免疫印迹方法鉴定细胞THRAP3敲除效果。使用高通量测序的方法进行基因表达分析。用流式细胞仪检测基因敲除对细胞周期的影响,CCK-8试剂盒检测细胞增殖。结果成功构建pSpCas9-THRAP3真核重组表达质粒,筛选出特异性敲除THRAP3基因的细胞系,验证了THRAP3敲除对细胞周期以及细胞增殖的影响。结论利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建并获得了THRAP3基因敲除细胞系并初步探究了THRAP3基因功能。

摘要：针对通径机对不同直径的钢管进行通径检测时,存在中心线对中问题,设计了钢管通径自动调心机。其核心部件由曲柄滑块机构及平行四边形机构组成。通过液压缸或丝杠升降机运动获取动力,使托举钢管的V型架能上下运动,实现钢管自动对中。通过运动分析,得到了钢管直径、丝杠行程和V型架调节高度之间的关系式。为实现不同直径钢管的自动对中从而提高钢管通径效率提供了理论基础。

摘要：目的:针对重症救治方舱对危重伤病员实施紧急救命处置的功能需求,研究一种优化的重症救治方舱结构布局方案,使其能够有效地实施快速、持续、综合的急救功能。方法:在总结分析二代方舱医院不足的基础上,系统梳理卫生装备构成体系和医疗设备配置方案,通过方案布局比较,实现重症救治方舱结构布局优化设计的目的。结果:重症救治方舱形成了一种以急救设备集成吊塔为核心功能区的优化方案,并进一步开展了方舱的试制。结论:优化后的重症救治方舱与前两代重症救治方舱相比,操作使用更加便捷,更加有利于开展急救处置等医疗作业,增强了重症救治方舱的救治能力。

摘要：目的了解北京健康教育微博体系初建参与者网络及微博使用习惯的现状,为北京健康教育微博体系的全市推广提供科学依据。方法采用自行设计的调查问卷,于2012年3月对177位北京健康教育微博体系初建参与者进行网络使用情况、微博了解情况、微博利用现状等方面的现场调查。结果回收有效问卷175份。不同年龄、专业背景、工作单位、工作领域等网络使用情况的差异均有统计学意义,不同年龄、专业背景对微博了解情况的差异亦有统计学意义(P<0.05)。使用超过了半年有53人(30.29%),每月使用10次及以上49人(28.00%),发表了100条以上微博32人(18.29%)。结论北京健康教育微博体系初建参与者网络使用率高,有利于新媒体传播的开展,但利用微博情况有待加强;年轻、非临床医学专业的人员在掌握微博知识方面具有显著优势,应该促使潜在的微博内容提供者关注微博等新媒体。

摘要：针对高等院校和企事业单位等集体性食堂在售米饭时排长龙、饭量不均、卫生状况差以及粮食浪费和打饭工人工作强度大等问题,利用SolidWorks设计了一台可实现自主刷卡自动出售的米饭售卖机。其采用两级打散,称重计量。设置了售卖模式和免费送饭模式。机器具备保温和自动清洗功能。售饭过程高效、卫生,计量精确。

摘要：为了减轻教师于学期末出试卷的工作量及便于试题共享,采用VC#.NET的数据库访问技术,OF-FICE的COM组件技术,VBA技术等,设计了基于.NET的题库与试卷管理系统。该系统采用改进的MD5算法解决系统的安全性问题,采用VC#.NET的流式读写技术实现试题库中图文并茂的试题存储和显示,采用基于OFFICE的COM组件技术和VBA技术自动生成满足特定格式要求的WORD试卷文档及相关文档。

摘要：副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus,Vp)是我国食源性疾病的首要致病因素,是海产品上市前的必检微生物.某种意义上讲,检测的增菌时间决定了海产品的质量安全性和市场价值.为缩短增菌时间,采用单因素试验和响应面分析法优化Vp培养条件和增菌培养基.单因素分析确定最适于Vp(ATCC 17802)生长的温度、氧浓度和培养方式分别为37℃、透气胶塞和摇床培养.以混合蛋白胨、牛肉膏、Na Cl为主要影响因素,利用Design-Expert 8.0软件的BoxBehnken设计进行增菌培养基优化,得到的二次回归方程具有很高的拟合性,优化的培养基配方为:酪蛋白胨6.75 g/L、胰蛋白胨3.25 g/L、牛肉膏4.76 g/L、Na Cl 36.75 g/L.利用优化培养基对模型进行验证,培养12 h的Vp菌体密度可达模型最大预测值的98.77%,说明获得的模型可以对ATCC17802的生长动态进行预测和分析.

摘要：目的通过对上海市学龄前儿童的户外活动情况进行横断面现况调查,了解其户外体力活动的参与现状,为学龄前儿童户外体力活动评价及干预提供参考。方法于2018年3-6月间使用课题组自行编制儿童户外体力活动调查问卷,以监护人代答的方式对454名在园学龄前儿童近期的日常活动情况进行调查,正态分布数据两组均数的比较采用t检验,非正态分布数据间比较采用非参数检验,率的比较采用χ^2检验等。结果学龄前儿童工作日参与户外活动时间平均1.49 h/d,双休日平均2.64 h/d。最受儿童喜爱的5个运动项目分别是散步、滑板/轮滑、跑步、自行车、舞蹈,组织类型大多数以家庭为主。学龄前儿童运动项目在不同年龄段、家长鼓励程度间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论上海市学龄前儿童户外活动现状不容乐观,在运动方式、场地、陪同者、运动项目等方面体现出上海市学龄前儿童生活环境的特点。

摘要：【目的】为优化雾培马铃薯原原种生产技术,为雾培原原种生产氮素营养管理提供科学的理论依据,本文研究了氮素水平对不同生育期养分吸收、积累与分配规律的影响。【方法】试验采用双因素随机区组设计,以品种川芋117和米拉为试验材料,设5个氮素水平(120、240、360、480、600 mg/L),在雾培不同生育期分别测定各器官干重和氮、磷、钾含量,分析其干物质积累、氮磷钾养分吸收积累及分配。【结果】(1)同一氮素水平下,相同生育期米拉的单株干物质积累量均大于川芋117,不同品种和生育期,均在氮素水平为240 mg/L单株干物质积累量达到最高,在定植90 d时,川芋117和米拉分别达到2.86和4.23 g/plant;(2)氮素水平增加有利于2个品种各生育期植株各器官氮磷钾含量的提高,定植90 d,2个品种均在240 mg/L氮素处理植株的氮、磷、钾养分积累量最高,川芋117分别为0.306、0.070、0.544 g/plant,米拉分别为0.489、0.117、0.899 g/plant;(3)不同品种和生育期,中氮处理的叶、茎和根的氮、磷、钾分配比例大于低、高氮处理,而块茎则与之相反,生育前期,氮、磷和钾在叶、茎和根中比例大于块茎,生育后期,营养元素往块茎转移;(4)2个品种均在氮素水平240 mg/L单株结薯数、结薯产量达到最高,川芋117和米拉分别为24.78粒/株,53.78 g/株和29.31粒/株和82.23 g/株。【结论】适量增氮,可以促进植株对氮、磷和钾的吸收积累,有利于原原种产量的提高。在四川盆地弱光生态条件下雾培马铃薯,240 mg/L的氮素水平可以获得较高的原原种产量。

摘要：刺激响应性和可生物降解性天然聚合物基水凝胶是药物缓释载体研究的重要发展方向。基于此开发了基于普鲁兰多糖(Pullulan)的p H/氧化还原响应水凝胶。以Pullulan为基体,以甲基丙烯酸二甲氨乙酯(DMAEMA)和丙烯酸(AA)为p H响应性单体,以具有N, N'-双(丙烯酰)胱胺(BAC)为交联剂,制备具有p H/氧化还原响应性的水凝胶(PPAD),通过调控p H值和溶胀-收缩机制来控制OMT缓慢释放。载药水凝胶在p H=1.5、p H=6.8和p H=7.4时,对氧化苦参碱(OMT)的累计释放量分别为66.7%、40.0%和35.2%。PPAD1~6在p H=1.5的累计释放量分别为60.34%、66.7%、74.0%、73.0%、63.5%、54.6%,氧化还原降解实验验证了PPAD的氧化还原性。