摘要：目的采用自行设计的颈环结构引物，建立外周血检测microRNA-34a（miR-34a）的检测方法，并初步应用于类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）患者外周血单个核细胞（peripheral blood monocytes，PBMCs）样品的检测。方法用TRlzol提取外周血单个核细胞的总RNA，以颈环结构的RT引物逆转录出相应的cDNA，然后以miR-34a的PCR引物进行PCR检测，电泳观察结果。结果建立的颈环RT—PCR能正确检测miR-34a。在RA患者外周血中检测到miR-34a的表达，其中初发者栓出率较高（2／6），复发者检出率为（1／9）；而健康志愿者外周血和治疗好转者未见表达。结论成功建立检测miR-34a的方法，miR-34a检测可能对RA的诊断有一定意义，但尚需进一步深入研究。

摘要：设计合成了一种基于新型香豆素水合肼希夫碱荧光探针,结构经1H NMR表征.利用荧光光谱研究了该探针分子对铜离子的识别作用.实验表明,该探针对铜离子具有较好的选择性识别能力,加入铜离子后,该探针的荧光发射强度显著减弱,并且荧光发射强度随着Cu2+浓度的增加而减弱.通过荧光离子滴定实验对其选择性和抗干扰能力进行了系统研究,发现加入其他常见金属离子(如Al3+、Ca2+、Co2+、Cr3+、Fe3+、K+、Mg2+、Na+、Ni2+、Zn2+等),荧光强度没有发生变化,并且上述各种离子分别与铜离子共存时,对其没有干扰.结果表明,香豆素水合肼希夫碱荧光探针对铜离子具有较高选择性识别.

摘要：目的 观察h-R3与放疗联合治疗晚期鼻咽癌的疗效和不良反应。方法 采用随机对照设计，共7个治疗中心参加了这项研究。符合入组标准的晚期鼻咽癌患者随机分为单放组和联合治疗组，两组患者均接受单纯根治性放射治疗，总剂量70～76Gy，联合治疗组同时给予h-R3治疗，剂量为100mg／次，静脉滴注，每周给药1次。结果 共137例患者入组，其中单放组67例，联合治疗组70例。联合治疗组治疗结束、治疗后第5周和第17周时的肿瘤完全缓解（CR）率，在全分析集（ITT集）分别为65．63％、87．50％和90．63％，在符合方案集（PP集）分别为67．21％、90．16％和93．44％，均显著高于单放组。联合治疗组治疗后第17周时，在ITT集和PP集的有效率均为100．00％，均显著高于单放组（90．91％和92．31％）。治疗前后两组间Karnofsky评分差异无统计学意义，联合治疗组患者体重恢复情况明显好于单放组。与h-R3相关的主要不良反应是发热（4．28％）、血压下降（2．86％）、恶心（1．43％）、头晕（2．86％）、皮疹（1．43％）。h-R3对血常规和生化指标无显著影响，并且未增加放疗的副作用。结论 h-R3联合放疗可显著提高晚期鼻咽鳞癌患者的疗效，药物不良反应轻微，对治疗晚期鼻咽癌有很高的临床应用价值。

摘要：目的:构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法:分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果:通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIH-mLumin融合蛋白。结论:成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。

摘要：试验以彦粳软玉1号水稻为供试作物,采用随机区组设计和田间小区试验方法,研究了氮肥减量 30%并配施两种复合微生物菌剂处理对水稻土养分及水稻产量的影响。结果表明:与常规施肥相比,氮肥减量配施两种复合菌剂处理均提高了土壤有效养分含量。就产量而言,相比常规施肥,添加两种复合菌剂均可以增加水稻产量,其中,化肥减量配施复合菌剂S处理的产量最高。可见,施用微生物菌剂可以在一定程度上替代化肥对水稻产量及土壤养分的贡献。研究结果对化肥合理减施并保障作物产量和合理应用微生物菌剂有理论和实践意义。

摘要：[目的]构建猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)ORF2 DNA核酸疫苗,并评价其免疫效果和安全性。[方法]设计一对特异性引物,扩增PCV2-ORF2,利用T载体对其进行克隆,与真核表达载体PcDNA3.1在同等条件下进行双酶切,并进行连接,转化感受态细菌DH5α并克隆,经双酶切鉴定筛选阳性重组质粒,即DNA核酸疫苗,命名为PcDNA3.1-ORF2。将该核酸疫苗瞬时转染Vero细胞,通过RT-PCR鉴定其在细胞内的表达情况;并且将该核酸疫苗按100μg.只-1腿部肌肉注射免疫Balb/c小鼠,同时设PBS和PcDNA3.1空载体为对照,免疫2次,间隔2周。分别于首免后第14 d和第28 d采血,用ELISA方法检测其血清抗体。取首免后56 d小鼠的心、肝、脾、肺、肾和脑等实质器官,采用PCR方法检测该核酸疫苗的安全性。[结果]成功地构建了PcDNA3.1-ORF2核酸疫苗,在体外Vero细胞中得到了瞬时表达,并且能诱导小鼠产生较强的免疫应答。安全性试验表明该核酸疫苗未整合到小鼠染色体上。[结论]PcDNA3.1-ORF2核酸疫苗可以诱导小鼠产生较强的免疫应答,并且是安全的。

摘要：目的:建立一种可快速检测沙门菌的实时荧光定量PCR方法,对粪便、海鲜等样本中的沙门菌进行检测。方法:根据沙门菌ompF基因的特异性序列设计引物和TaqMan探针,建立检测沙门菌的实时荧光定量PCR快速检测方法,对方法的特异性、敏感性和稳定性进行评价,并对临床样本中的沙门菌进行检测。结果:该检测方法可扩增不同型别沙门菌的基因组DNA,对其他10种不含沙门菌的肠道病原菌基因组DNA均不扩增,具有很好的特异性;对构建的阳性质粒模板检测灵敏度可达0.1 ng/L,对菌株样本基因组DNA检测灵敏度为10 CFU/mL,可快速准确地检出临床样本中分离的沙门菌阳性菌株,且与商业化沙门菌检测试剂盒的阳性检出率相同;该方法的重复性也很高,5次重复实验Ct值的变异系数低于0.8%。结论:建立的沙门菌TaqMan实时荧光定量PCR法具有简单快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可应用于临床沙门菌核酸检测。

摘要：提出了一种基于紫外臭氧的在线检测COD的方法,在氧化消解过程中,可以利用多个传感器来采集检测数据,而不需要在其结束后才测定氧化剂的消耗量。紫外臭氧协同氧化消解不仅降解能力强,而且高效环保,值得深入研究推广。

摘要：根据云南省滇中4个代表站30多a的逐日气象资料,应用Penman-Monteith方法系统分析了参考作物的逐日需水量ET0,采用小波理论分析各站点逐年ET0的变化特征,并利用R/S分析法对参考作物的逐年ET0变化趋势进行了分析,结果表明：各代表站点的年ET0变化并非线性的持续增加或减小,存在明显的5~30 a的动态变化周期;同时各代表站点ET0年序列具有一定的持续性,即在将来一段时间仍然保持与过去相一致的变化趋势,也即未来的总体趋势仍为减少趋势。

摘要：目的 研究我国类风湿关节炎（RA）患者发生骨折的临床特征，进一步评估发生骨折的危险因素。方法设计专门的登记表，随机现场调查全国9省市18个医院门诊及住院RA患者681例，收集的资料包括年龄、性别、病程、关节受累表现、治疗情况、骨折的发生情况等。采用Logistic回归分析对RA患者发生骨折的相关危险因素进行评估。结果在此次调查的681例RA患者中有48例共发生过54处骨折，骨折发生率达8％。骨折发生在不同部位，足，踝、股骨、脊柱及腕为多发部位。Logistic回归分析骨折危险因素显示：病程长（OR：1．245，95％CI：0．987。1．570，P=0．065）、男性（OR：0．433，95％CI：0．199～0．942，P=0．035）、畸形关节数多（OR：1．042，95％CI：1．006～1．079，P=0．023）、有RA家族史（OR：2．201，95％CI：0．984。4．923，P=0．055）、健康测量量表（SF-36）分数高（OR：1．017，95％CI：1．002．1．033，P=-0．028）增加了RA患者发生骨折的风险。骨折的危险因素按强弱顺序依次为：病程、SF-36、性别、畸形关节数、RA家族史。结论RA患者中骨折的发生率高，病程长、男性、畸形关节数多、RA家族史阳性为RA患者发生骨折的危险因素。早期对RA患者评估危险因素，积极治疗阻断疾病发展、避免关节发生畸形，对防治RA患者的骨质疏松、减少骨折的发生有利。