摘要：目的原核表达、纯化树鼩干细胞生长因子(stem cell factor,SCF),并检测其免疫原性。方法根据GenBank预测的树鼩SCF基因序列设计引物,PCR扩增SCF基因,克隆至原核表达载体p ET-30a(+)中,构建重组表达质粒pET-30a(+)-SCF,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白经Ni柱纯化后,免疫家兔,Western blot和ELISA法检测其免疫原性,并检测SCF在树鼩不同组织中的分布情况。结果重组表达质粒pET-30a(+)-SCF经酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为34 500,表达量约占菌体总蛋白的35. 6%,以包涵体形式存在;纯化后的重组蛋白纯度达90%以上,可与兔抗人SCF多克隆抗体特异性结合,且免疫原性良好,抗血清效价为1∶256 000。在鼻、气管、肺、脾、肾、食管中能检测到SCF的分布。结论在大肠埃希菌中高效表达了重组SCF蛋白,纯化复性后具有良好的免疫原性。

摘要：为提高鼻咽癌放射粒子植入位置的准确度,使得术后术前剂量一致,本研究尝试利用鼻咽癌患者鼻咽部及颈部的CT数据,结合治疗计划系统(Treatment Planning System,TPS),在医学三维重建软件Mimics、3-Matic下构建病灶与毗邻组织模型,探讨利用数字医学与3D打印技术设计、制作鼻咽癌粒子植入个体化导板的可行性,为实现鼻咽癌的粒子植入放射疗法的"精准治疗"提供参考。

摘要：目的探讨多指标综合评分法优选芩蒿滴鼻剂的提取工艺。方法采用L_9(3~4)正交设计,以一枝蒿酮酸、绿原酸、盐酸伪麻黄碱、总黄酮含量及出膏率的综合评分为考察指标,优选芩蒿滴鼻剂的提取工艺。结果最佳提取工艺为:用60%乙醇溶液,加12倍量,提取3次。结论本研究优选出的提取工艺简单、可行,适合大生产需要,可作为该制剂合理开发的依据。

摘要：目的以正交设计试验优选元胡止痛方的最佳水提取工艺,为元胡止痛方的提取工艺条件以及工业化生产提供实验依据。方法将影响提取效果的A(浸泡时间)、B(提取溶剂量)、C(提取时间)以及D(提取次数)4个主要因素,每个设3个水平,以正交表L_(9)(3^(4))设计正交实验;通过梯度洗脱并以HPLC法同时测定指标成分延胡索乙素、欧前胡素的含量,经加权评判进行提取工艺的优选。结果加权后元胡止痛方提取工艺影响因素由大到小顺序依次是B>C>A>D;B和C起主要作用,其中B有极显著性差异(P<0.01);C有显著性差异(P<0.05),而A、D均无统计学意义。结论考虑到经济效益,确定元胡止痛方以10倍量水浸泡30 min后再回流提取2次,每次提取3 h为其最佳提取工艺。经验证表明,该工艺稳定,可行,可考虑作为工业化生产条件。

摘要：目的及时总结经验，为季节性流行性感冒（简称流感）暴发时期开展甲型H1N1流感防控提供参考。方法2009年5月25至31日，我国内地发生首起甲型H1N1流感输入性患者引起社区续发患者（1例输入性患者，2例社区续发患者）。在患者的密切接触者中，出现发热（体温≥37．5℃）或咳嗽、咽痛等呼吸道症状，经实验室检测排除甲型H1N1流感病毒感染，而本人或本人的密切接触者中检测季节性流感阳性结果的患者14例。以疾病预防控制专业人员面对面访谈和电话调查相结合的方式，收集患者个案信息。了解62名相关密切接触者的基本情况。对14例患者咽拭子进行甲型H1N1流感检测，采集其中7例患者进行季节性流感排查。结果14例发热患者，发病率在各年龄组[15-岁组19．2％（5／26），25～岁组25．0％（9／36），χ^2=0．287，P=0．592]、性别[男性24．0％（6／25），女性21．6％（8／37），χ^2=0．048，P=0．826]、部门[化妆及设计部、摄影部、门市部及其他、影楼客户分别为42．1％（8／19）、27．3％（3／11）、12．5％（2／16）、6．3％（1／16），χ^2=7．653，P=0．054]和是否居住集体宿舍[集体宿舍33．3％（4／12）、非集体宿舍29．4％（10／34），χ^2=0．699，P=0．403]等方面差异均无统计学意义。14例患者以低热为主（37．5～37．9℃），未发现有腹泻症状的患者，本次暴发中3例甲型H1N1流感患者中1例出现腹泻的症状。14例患者咽拭子检测甲型H1N1流感核酸阴性，7例患者咽拭子检测6例呈甲型季节性流感阳性反应。结论本起事件为我国内地首起社区甲型H1N1流感暴发患者密切接触者中发生季节性流感暴发。提示调查甲型H1N1流感患者时，必要时需排查季节性流感和继续加强季节性流感的防控工作。

摘要：标定曲面斜探头入射点、折射角和扫描零点的校准试块是目前超声波探头制造商、校准实验室和使用厂家亟需的无损检测技术。介绍了脚跟试块的技术特点和设计原理,脚跟试块的专项用途和常规用途。脚跟试块不仅能保证曲面斜探头对检出缺陷的精确定位,提高凸曲面锻件、铸件和管件周向超声波检测的水平,同时它还能"一块多用",测试仪器性能和校验灵敏度。

摘要：目的:构建一个高效且特异性的逆转录茎环引物,以准确定量检测小鼠的mi RNA-505基因,同时探讨茎环引物的结构对逆转录效率的影响。方法:规律性地改变通用茎环引物的茎部和环部的碱基结构,再进行不同的组合,利用逆转录-聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术,探寻效率最高的茎环引物。结果:当固定茎部结构为14对碱基,规律性改变环部碱基个数(15,18,21),经RT-PCR检测的CT值无差异,均为28.5;当固定环部结构为21个碱基,CT值随茎部碱基对(8,11,14)规律性地延长而逐渐增大;当环部结构为21个碱基,茎部结构为8对碱基时CT值最小,为26.7。结论:环部结构对茎环引物的效率无贡献;当环部结构为21个碱基,茎部结构为8对碱基时,茎环引物的效率和特异性是最佳的,适用于准确检测小家鼠的mi RNA-505基因。

摘要：目的建立以金纳米探针结合终端PCR技术超灵敏检测HIV-1p24抗原的方法。方法采用单克隆抗体1G12和1D4建立的夹心ELISA法检测合成的HIV-1p24抗原。挑选拟南芥基因组中一段47bp的DNA作为条形码DNA，与5’端修饰巯基的捕获DNA（条形码DNA的互补序列）杂交形成双链DNA。在金纳米粒子表面连接1D4，并与双链DNA通过巯基连接，制成金纳米探针。微孔板上包被1G12，与待检的重组HIV-1p24抗原及金纳米探针夹心结合。将结合的条形码DNA通过加热解离下来作为检测信号，设计并合成引物进行PCR检测及4％凝胶电泳分析，进而鉴定p24抗原的含量，然后与ELISA法灵敏度进行比较。结果采用单克隆抗体1G12和1134建立夹心ELISA法，检测HIV-1p24抗原最低检测限为1000pg／ml，采用相同抗体对建立金纳米探针法，通过PCR凝胶电泳法间接检测HIV-1p24抗原，显示PCR产物电泳条带的强弱与所检测p24抗原含量具有良好的对应关系，最低检测限可达到1pg／ml。结论金纳米探针结合PCR凝胶电泳法可以对HIV-1p24抗原进行检测，与ELISA法比较，其灵敏度可提高3个数量级。

摘要：目的构建并鉴定蛋白激酶C受体1(RACK1)过表达及干扰真核表达载体。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从人肝癌细胞系Huh-7.5.1中扩增RACK1全长cDNA系列,用巢式PCR扩增对应的CDS,并将其克隆到PIRES2-EGFP,PCR鉴定后进行测序分析。以人RACK1基因为靶基因,设计合成两对短发夹结构的互补DNA序列和一对阴性对照序列,退火后与酶切后的载体RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen进行连接,并行酶切分析和测序鉴定。将构建好的过表达载体和干扰载体用脂质体转染HUVEC细胞系。结果两对引物PCR扩增的序列大小与预期结果一致,PIRES2-EGFP/RACK1载体954个碱基成功插入到预计位点,序列完全一致。RNA干扰载体pRetroQ/RACK1-1、pRetroQ/RACK1-2和pRetroQ/HK插入序列均与预计相符。荧光显微镜观察,转染的HUVEC细胞均表达EGFP和GFP。结论成功构建RACK1过表达载体及其RNA干扰载体,并可被成功导入HUVEC细胞系。

摘要：采用自行设计制造的石英玻璃电解装置,以重氧重水为原料,通过碱性介质电解法进行了18O气体的制备,在原料重氧重水18O的摩尔分数>80%条件下,最终制得18O气体中18O2摩尔分数达63.66%,表明整个电解系统气密性良好。此外,制得的气体能够满足电子回旋共振离子源提供18O重离子束的实验要求。