摘要：【目的】旨在建立一种检测鸭骨形态发生蛋白(BMPs)mRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RTPCR检测方法。【方法】根据GenBank中BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP10和BMP15的核苷酸序列设计并合成特异性引物进行PCR扩增,产物回收后克隆至pMD-18-T载体,构建阳性重组质粒作为标准品,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,建立其标准曲线,对建立的方法进行特异性、敏感性和重复性试验。【结果】建立的BMP1、BMP2、BMP3、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP8a、BMP10和BMP15基因实时荧光定量检测方法特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线为单峰,相关系数R2均大于0.998,组间和组内变异系数均小于1%。应用该方法检测BMPs基因在半番鸭组织中的表达水平,结果显示,BMP1、 BMP2、 BMP5和BMP7基因在心脏中表达量较高,分别为5.5×10^(4)、 1.1×10^(5)、 5.1×10^(5)和7.7×10^(5)拷贝·μL^(-1);BMP6和BMP10基因在肝脏中表达量较高,分别为7.5×10^(4)和7.6×10^(3)拷贝·μL^(-1);而BMP3、 BMP4、BMP8a和BMP15分别在法氏囊、胸腺、喙和脾脏中表达量最高,分别为1.5×10^(5)、2.1×10^(4)、1.8×10^(3)和3.3×10^(3)拷贝·μL^(-1)。【结论】本研究建立的实时荧光定量PCR方法特异性强、重复性好,为检测鸭BMPs表达水平提供了技术手段。

摘要：【目的】研究新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)弱毒S株C30在雏番鸭血液中的病毒血症,口咽、泄殖腔的排毒规律及靶器官的带毒时间,了解弱毒S株在雏番鸭体内的增殖规律和致弱机理。【方法】设计特异性引物,建立检测NDRV核酸的RT-qPCR方法;新型鸭呼肠孤病毒弱毒S株第30代(NDRV-S-C30)腿部肌肉注射2日龄雏番鸭,在免疫后1、2、3、4、6、8、10、12、14 d(Days post vaccination,dpv)采集其血液、肝脏、脾脏、泄殖腔分泌液和口咽液,用RT-qPCR方法检测NDRV在血液、口咽、泄殖腔及靶器官的增殖能力及带毒时间。【结果】建立了检测NDRV核酸的特异性RT-qPCR方法,使用该方法检测NDRV弱毒攻毒雏鸭的口咽和泄殖腔排毒时间分别为2~8 d和2~10 d,排毒高峰期为4~6 d;病毒血症时间为1~4 d,其中1~2 d为病毒血症高峰期;弱毒在肝脏的带毒时间为3~6 d,在脾脏的带毒时间为1~8 d。【结论】NDRV-S-C30弱毒株免疫雏番鸭后可通过口腔和泄殖腔向外界排毒,仅能引起较弱的病毒血症反应,且在肝脏中的增殖能力弱,丧失了对易感靶器官造成病理损伤的能力。明确了NDRV弱毒S株的排毒规律及病毒血症时间,为建立弱毒免疫效力评价方法奠定了基础。

摘要：为研究辣木多糖的酶促提取工艺和辣木不同部位的多糖含量,在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,选择纤维素酶用量、提取温度、提取时间、液料比为试验因素,采用二次回归正交旋转组合设计对纤维素酶辅助提取辣木多糖的工艺参数进行优化,并在此基础上研究辣木不同部位的多糖含量差异。4种因素对辣木多糖提取率的影响顺序依次为:纤维素酶用量>提取温度>液料比>提取时间。建立辣木多糖提取率(Y)与纤维素酶用量(X1)、提取温度(X2)、提取时间(X3)、液料比(X4)的二次正交回归模型:Y=18.6602+0.8134X1+0.7572X2–0.4312X3+0.6909X4–0.5181X12–0.4935X22–0.6277X42,该模型拟合度好,4个因素均对多糖提取率有显著影响(p<0.05)。通过回归模型获得优化的提取工艺为:纤维素酶用量1.60%,提取温度53℃,提取时间68 min,液料比52∶1,在此条件下辣木多糖提取率为19.83%,实际值与预测值一致。辣木不同部位的多糖含量结果表明,辣木根、花、嫩叶、茎中均含有丰富的多糖,其中根中含量最高且极显著高于其他部位(p<0.01),可进一步开发利用。采用二次回归正交旋转组合设计优化得到的辣木多糖酶促提取工艺条件准确可靠,可有效提高辣木多糖提取率并可在生产中推广应用。

摘要：【目的】建立一种检测鸭IFN-βmRNA转录水平的SYBR GreenⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法。【方法】根据GenBank中鸭IFN-β(KT428159)核苷酸序列设计并合成特异性引物,将鸭IFN-β基因克隆至pET-30a载体,以此构建的pET-30a-IFN-β阳性重组质粒作为阳性标准品,采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测,构建标准曲线,并进行引物特异性、灵敏度及重复性试验。【结果】该扩增特异性强,无引物二聚体及非特异性产物,熔解曲线单峰(Tm=87.94±0.16℃);Ct值在8.9-34.0线性拟合程度高,相关系数R^(2)>99.5%;灵敏度高,最低检测限为2.84 copies·μL^(-1);重复性好,对来自临床的3种组织样品检测的组内变异系数小于0.13%,组间变异系数不超过1%。【结论】该方法特异性强、灵敏度高、重复性好,为鸭IFN-βmRNA表达水平的定量分析提供了技术手段。

摘要：目的调查肾移植患者术后近期的抑郁发展动态,并分析其影响因素。方法采用纵向研究设计,回顾性分析2018年8月-2019年1月期间共128例终末期肾病患者接受肾移植手术的临床资料。采用自行设计的一般问卷了解社会人口学资料,抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)测量抑郁情况,通过采集血液学标本监测血红蛋白和血肌酐水平。测量时间为肾移植术前(T0)与术后1个月(T1)、2个月(T2)、3个月(T3)4个时间点。利用重复测量方差分析比较4次测量的结果,利用广义估计方程分析肾移植患者术后近期抑郁的影响因素。结果患者抑郁得分分别为60.14±8.440、51.12±9.092、49.55±8.597、48.79±7.992;抑郁症状检出率分别为91.6%、53.9%、41.4%、44.5%。移植后时间、学历、血红蛋白水平为患者抑郁的影响因素。结论终末期肾病患者的抑郁症状在接受肾移植后1个月内迅速好转,但仍有部分患者存在中重度抑郁症状,且抑郁水平是动态变化的。硕士学历、低血红蛋白水平的患者抑郁水平较高。

摘要：基于海外EPC铁路项目中的设计方视角,借鉴肯尼亚蒙巴萨—内罗毕标准轨距铁路(简称蒙内铁路)项目的成功建设经验,结合蒙内铁路项目所在地的自然条件、社会条件、建造技术水平及设计习惯等,对蒙内铁路桥涵属地化设计进行系统总结,涵盖建设项目勘察、设计及施工配合阶段,在桥涵设计标准、结构物形式选择、材料选择、水文计算、有关设计参数取值等方面,提出思路与建议,为其他类似海外工程项目减少设计风险、确保项目安全可靠实施提供参考。

摘要：文章基于“医学电子仪器设计”课程的特点,进行创新性教学改革。采用项目化教学设计,即以企业对医疗电子人才的需求为导向,将医疗电子仪器行业内最典型的脉搏、血氧、心电、血压四大生命参数监护仪器作为课程研发项目,将这些产品中基于单片机的各个模块融入课堂教学。通过线上线下混合式教学,减少理论课时,增加学生实践动手课时。学生通过前期的学习掌握单片机理论知识,并在后期的实践动手环节中将单片机理论知识应用于四大生命参数监护仪器的开发。

摘要：随着光伏产业的发展,太阳能光伏板的空气动力学特性对其结构稳定性起着至关重要的作用。基于计算流体动力学(CFD)数值模拟方法,采用剪切应力传输(SST)k-ω数值模型,分析了双轴太阳能跟踪光伏板阵列浸没在大气边界层流中的气动特性。通过对光伏板阵列结构下的风场模拟,研究了不同光伏板倾角(θ=0°、30°、45°、70°)对风场的影响。考虑到风的流动不限于一个方向,通过分析不同风向角(α=0°、45°、135°、180°)来确定特定光伏板倾角下的临界风向。此外,还研究了面板之间的纵向间距(L=10、15、20 m)和水平间距(H=1、2、3 m)的影响。结果表明光伏板的风压随光伏板倾角增大呈现逐渐上升的趋势;最大C_(L)的临界风向为180°,最大C_(D)的临界风向为0°;纵向间距增大会使第一排光伏板压力系数降低,水平间距增大对第一排光伏板压力系数几乎没有影响,而其他排光伏板压力系数均随着纵向间距和横向间距的增大而上升。计算结果可用于风荷载设计标准的改进。

摘要：目的评价十味香鹿胶囊治疗乳腺增生(肝郁兼痰凝证)的有效性和安全性。方法采用开放、单臂的试验设计,在27个平行中心进行观察。2200例患者口服十味香鹿胶囊,5粒/次,3次/d,疗程8周(2个月经周期)。比较观察时间内患者每个月经周期的经期前7 d乳房疼痛NRS变化,乳房肿块大小、质地和范围,双侧乳腺超声结果(BI-RADS分级)和安全性。结果与治疗前相比,治疗28 d、治疗56 d的月经前7 d乳房疼痛NRS评分,乳房肿块大小、质地和范围评分明显降低,中医证候疗效明显增加,随着疗程的延长改善更为明显;治疗56 d的BI-RADS分级明显改善。治疗过程中不良反应发生率低。结论十味香鹿胶囊治疗乳腺增生(肝郁兼痰凝证)安全有效。