摘要：本研究旨在建立对肠道主要共生菌的快速定量方法。根据细菌16S rRNA基因的保守序列并参考相关研究,设计针对总肠道菌群的通用引物和探针,以及针对双歧杆菌属、肠球菌属和肠杆菌科的特异性引物和探针,采用引物设计工具(Primer-BLAST)以及聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增以验证引物和探针的特异性。通过分子克隆技术,构建各目标菌属目的基因的重组质粒作为qPCR检测的标准模板,选择标准模板进行重复性实验,并计算组内和组间重复变异系数。用所建立的方法对不同年龄段的临床粪便标本进行3类细菌的检测,并初步分析这些菌群与增龄的关系。结果显示,引物和探针具有较高的特异性;各目的细菌标准曲线在一定范围内线性关系良好,总菌群或各目标菌属的线性范围分别为:总菌群2.9×103~2.9×10^(12)copies/μL、双歧杆菌3.1×10^(2)~3.1×10^(9)copies/μL、肠球菌5.9×10^(2)~5.9×10^(9)copies/μL、肠杆菌6.3×10^(2)~6.3×10^(9)copies/μL,决定系数R2≥0.995;检测的最低拷贝数为总菌群7.5×10^(2)copies/μL、双歧杆菌46 copies/μL、肠球菌37 copies/μL、肠杆菌51 copies/μL;重复性实验变异系数在1.32%以下,具有良好的可重复性。对不同年龄段临床粪便标本检测的结果显示,肠球菌和肠杆菌含量随增龄呈增长趋势,且老年组含量显著高于青年组,但在高龄老年人中未发现肠球菌数量增加。双歧杆菌含量随增龄减少,且各组间差异显著,在高龄老年人中也未观察到双歧杆菌显著减少。结果提示,本研究建立了一种可供临床推广的菌群绝对定量方法,能够同时检测3类细菌和菌群总量,对于菌群定量研究具有实际意义。

摘要：多端柔性直流系统在分布式能源和直流负荷接入、网络柔性互联、电能质量等方面具有显著优势,成为未来电网的重要发展趋势。为了保证多端柔性直流系统安全稳定可靠运行,需要能够在数毫秒内开断故障电流的直流断路器。本文面向张北±500 k V柔性直流电网示范工程的应用需求,开展了500 k V直流断路器原理研究与样机研制。首先,提出500 k V耦合负压换流型混合式直流断路器系统方案,给出其拓扑结构、工作原理和控制逻辑;进而,设计基于电磁斥力操动机构和电磁缓冲机构的快速机械开关、基于二极管和复合被动保护支路的交叉桥式电力电子开关和基于耦合负压电路的换流装置等;最后,研制500 k V耦合负压换流型混合式直流断路器工程样机进行实验验证。研究结果表明,研制的100 k V混合式直流断路器能够在3 ms开断25 k A短路电流,具有低损耗、低成本、高可靠性等特点,相关成果已经过实验验证。

摘要：背景:农民工作为中国社会典型的弱势群体,其社会处境已引起普遍关注,因此,深入了解农民工的心理健康状况,提高他们的心理健康水平,对创建和谐社会来说具有重大的现实意义。目的:了解返乡农民工的心理健康状况,为有效干预农民工的心理健康问题提供可靠的依据。设计:横断面调查。单位:衡阳师范学院教育科学系。对象:调查于2005-02在中国15个省完成。采取横断面调查方式,抽取300名春节期间返乡的农民工为调查对象。方法:运用90项症状自评量表进行个别测试;做答前给予指导语,农民工根据最近1周内的自我感觉答题,独立完成,当场收卷。结果数据运用光电阅读机输入计算机进行统计分析。如有5个以上项目未答或总分低于95分的问卷视为无效而不进行分析。所有数据输入计算机后运用SPSS11.0软件包进行统计分析;计量资料的组间差异比较用t检验或方差分析。主要观察指标:①返乡农民工心理健康的基本情况。②返乡农民工心理健康状况的性别、文化程度、打工时间、经济收入差异比较。结果:共发放300份问卷,回收275份问卷,回收率91.67%。最终有245名有效被试进入结果分析。男118人,女127人;年龄16～52岁,平均年龄26.09岁。90项症状自评量表调查结果显示:①受测农民工的SCL-90总分和阳性项目数显著高于中国成人常模[(173.13±44.35,129.96±38.70)(t=15.237,P<0.001);(52.96±20.27,24.92±18.14)(t=21.654,P<0.001)]。②农民工的躯体化、强迫、人际关系敏感、抑郁、焦虑、敌对、恐惧、偏执、精神病性等9项因子分显著高于中国成人常模[(1.73±0.55,1.37±0.48)(t=10.260,P<0.001);(2.12±0.56,1.62±0.58)(t=14.092,P<0.001);(2.10±0.59,1.65±0.61)(t=12.076,P<0.001);(1.99±0.59,1.50±0.59)(t=13.072,P<0.001);(1.88±0.53,1.39±0.43)(t=14.260,P<0.001);(1.98±0.69,1.46±0.55)(t=11.951,P<0.001);(1.74±0.58,1.23±0.41)(t=13.692,P<0.001);(2.00±0.61,1.43±0.57)(t=14.647,P<0.001);(1.81±0.57,1.29±0.42)(t=14.472,P<0.001)]。③受测农民工的心理健康状况没有明显的性别、文化程度、经济收入、打工时间的差异。结论:返乡农民工的心理健康状况显著低于常模水平,性别、文化程度、经济收入和打工时间对返乡农民工的心理健康没有显著影响。

摘要：为了克隆表达纯化鸡颗粒溶素（chicken granulysin,ChGNLY）并进行活力鉴定。本试验以基因组数据库预测的ChGNLY基因为模板设计引物,对提取的鸡脾脏总RNA进行RT-PCR,扩增得到的ChGNLY基因插入pMD-19T载体中并测序。将测序正确的GNLY基因克隆至pGEX-6p-1,构建重组表达质粒pGEX-6p-1-GNLY,并将其转化至感受态BL21,IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE、Western-blotting和蛋白质谱鉴定融合蛋白的正确性。CellTiter-Glo2.0Assay检测融合蛋白的生物学活性。另外,对GNLY的分子特性进行了生物信息分析。结果显示,测序结果显示克隆的ChGNLY片段长237bp,编码79个氨基酸,所表达的融合蛋白相对分子质量约为36 000。重组ChGNLY融合蛋白能特异性与人颗粒溶素抗体发生反应。纯化后的GNLY融合蛋白经CellTiter-Glo2.0Assay检测,发现其具有剂量依赖性的细胞毒活性。系统发生分析显示GNLY可明显分为4个群。结构分析发现,ChGNLY活性区域表面带有大量正电荷,且位点保守。结果表明,本试验利用原核表达系统成功表达了具有生物学活性的ChGNLY,为ChGNLY后续功能的研究奠定理论基础。

摘要：目的评估NOR型非球面角膜塑形镜矫正近视的临床有效性和安全性。设计前瞻性多中心队列研究。研究对象2019年5月至2020年12月11家医院配戴NOR型非球面角膜塑形镜的近视患者456例(912眼)。方法所有患者均配戴NOR型非球面角膜塑形镜,并完成戴镜前及戴镜后1天、1周、1个月、3个月的检查与随访。主要指标裸眼远视力、球镜度、柱镜度、等效球镜度、眼压、角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞多形性级别、并发症、镜片配适及镜片状态。结果456例(912眼)中女性300例,平均年龄15.59±8.24岁。戴镜后各随访时间点,双眼裸眼远视力与基线期比较均有显著提升(P均0.05);双眼非接触式眼压与基线期比较均显著降低(P均<0.05);双眼未出现严重并发症,仅个别病例出现1级或2级球结膜充血、角膜上皮点染及角膜浸润,经停戴或药物控制后均可实现继续戴镜;镜片配适情况及镜片状态总体良好。结论配戴NOR型非球面角膜塑形镜可有效提升青少年近视患者裸眼远视力,降低等效球镜度,且对角膜内皮细胞参数和眼压影响较小,镜片配适和镜片状态良好。

摘要：为验证高压齿轮泵泵体结构设计与材料选用的合理性,基于ANSYS Workbench软件对齿轮泵壳体组件进行结构静力学与热的综合分析,得到在工作状态下油液压力、温度及受力共同作用下泵体的总变形和等效应力分布情况。结果表明,泵体在高压出口附近发生较大变形,最大等效应力发生在出油孔内壁。为减少泵体变形,从结构上加以改进,仿真结果证明了结构改进的可行性。

摘要：目的:建立一种细胞、组织和器官生物膜表面唾液酸的染色及定量方法。方法:设计平行实验,确定最佳染色条件。将接种在盖玻片上的细胞用PBS洗涤后,加高碘酸钠(NaIO4,1 mmol/L)于4℃轻度选择性氧化生物膜表面的唾液酸在C-7位成醛;随后,加入甘油工作液终止氧化,再用冷的PBS清洗;再加入荧光素-5-氨基硫脲(FTSC,100μmol/L)荧光染料与生成的醛基避光反应,并采用PBS洗涤;最后,采用DAPI染核并采用PBS-T清洗,甘油封片、拍照,采用图像处理软件量化分析。组织切片经多聚甲醛固定后,按照上述优化后的步骤染色。结果:平行实验结果显示,FTSC染色40 min细胞表面唾液酸的成像效果最佳;3种不同的细胞经唾液酸染色后均呈现强的绿色荧光,经100μmol/L H_(2)O_(2)处理24 h后,荧光强度显著降低(P<0.01);该方法可原位检测小鼠组织切片和动脉内壁的唾液酸水平。假阳性结果可通过纳入仅采用FTSC处理组排除或扣除背景。结论:该方法可对不同细胞、组织和器官表面的唾液酸进行原位染色及定量分析。

摘要：基于知识图谱的问答系统可以解析用户问题,已成为一种检索知识、自动回答所询问题的有效途径.知识图谱问答系统通常是利用神经程序归纳模型,将自然语言问题转化为逻辑形式,在知识图谱上执行该逻辑形式能够得到答案.然而,使用预训练语言模型和知识图谱的知识问答系统包含两个挑战:(1)给定问答(questionanswering, QA)上下文,需要从大型知识图谱(knowledge graph, KG)中识别相关知识;(2)对QA上下文和KG进行联合推理.基于此,提出一种语言模型驱动的知识图谱问答推理模型QA-KGNet,将QA上下文和KG连接起来形成一个工作图,使用语言模型计算给定QA上下文节点与KG节点的关联度,并使用多头图注意力网络更新节点表示.在Commonsense QA、OpenBookQA和Med QA-USMLE真实数据集上进行实验来评估QA-KGNet的性能,实验结果表明:QA-KGNet优于现有的基准模型,表现出优越的结构化推理能力.

摘要：目的探究五倍子、黄芩、金银花、板蓝根、连翘、薄荷、山楂七味中药及其组方的抑菌作用。方法使用水煎煮法提取各单味中药及其组方的活性成分;采用琼脂平板打孔法、纸片扩散法和平板培养法测定其抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);设计7因素2水平的正交试验,初步确定最优抑菌配比。选择对抑菌活性影响最小的脱色方法。结果7味中药中五倍子对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径(30.3±0.81)mm;山楂对大肠埃希菌的抑菌作用最强,抑菌圈直径(17.7±1.03)mm;黄芩对白色念珠菌的抑菌作用最强,其抑菌圈直径为(14.5±1.38)mm。正交试验结果表明,连翘、山楂、板蓝根、五倍子、金银花、黄芩、薄荷按质量比为2∶1∶2∶2∶1∶2∶1组成的中药组合物抑菌效果最好。75%水提醇沉法脱色对抑菌作用影响小。结论五倍子、山楂和黄芩分别对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的抑菌作用最强,7味中药的配伍可以产生协同增效的效果,可使用75%水提醇沉法对药液脱色。

摘要：随着我国国民经济建设的高速发展,高速公路建设也以日新月异的速度飞速地发展着,国干和省干公路网络化改造也正在加紧实施着。西安咸阳国际机场专用高速公路工程的建设区域,在咸阳市和西安市,地处关中平原微度及轻度水力侵蚀区,水力侵蚀及重力侵蚀活跃。公路建设过程中会不同程度地扰动原地貌,使其原有的水土保持设施功能降低或丧失,若不及时采取有效的水土保持防治措施,就会造成人为水土流失的加剧,增加水土流失面积和流域输沙量,对周边区域的生态环境及水土资源的可持续利用造成不良影响。在上述背景下,分析了西安咸阳国际机场专用高速公路工程沿线自然概况,探讨了单项防治措施设计,可供参考。