摘要：提取吕氏泰勒虫裂殖子的总RNA,采用RT-PCR方法扩增其表面蛋白TlSP(Theileria luwenshuni surface protein)基因的cDNA片段,结合生物信息学方法,对TlSP蛋白抗原表位和跨膜区进行预测,设计表达引物,分别扩增得到TlSP全长及逐一去除跨膜区的4个片段,并将其分别克隆至pET-30a原核表达载体,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S感受态细胞进行诱导表达,并对融合蛋白的反应原性进行分析。结果表明,TlSP融合蛋白的N端具有较好的抗原性,而在C端存在3个跨膜区:185~207 aa、228~250 aa和255~277 aa;SDS-PAGE结果表明,只有去除全部跨膜区的重组载体可成功表达。Western-blot分析表明,TlSP融合蛋白能与吕氏泰勒虫、尤氏泰勒虫、绵羊泰勒虫及环形泰勒虫阳性血清发生反应,而与巴贝斯虫、羊无浆体阳性血清无交叉反应。本研究为今后TlSP候选亚单位疫苗的研究奠定了基础。

摘要：观察精苓消瘤胶囊长期给药对Beagle犬产生的毒性反应,确定无毒反应剂量,为临床安全用药的剂量设计提供参考资料.将Beagle犬分为对照组及精苓消瘤胶囊高、中、低(1.50、0.60、0.25g/kg)3个剂量组,每组6只,雌雄各半,每天灌胃给药,每周给药6 d,共给药180 d,并进行恢复期观察.心电图指标中,给药结束时0.60 g/kg组心率、1.50、0.60 g/kg组PR及0.25 g/kg组QRS间期与对照组比较均有降低.血液学检查,给药结束时1.50 g/kg组的WBC与对照组比较有升高.生化学检查,给药90 d时,1.50、0.25 g/kg组的TP与对照组比较有降低,0.60 g/kg组BUN升高,0.60、0.25g/kg组TG降低.给药结束时,1.50 g/kg组ALB降低.恢复期结束时上述指标统计学差异消失.尿常规检查,各组BLO、KET、PRO有一定的阳性结果.在本试验条件下,Beagle犬口服精苓消瘤胶囊180 d给药的未见明显毒性反应剂量为0.60 g/kg.

摘要：目的:评价胶体金法对霍乱弧菌检测的真实性、可靠性和实用性,探讨其应用价值。方法:用血清凝集试验方法作为金标准,并用胶体金方法对同一份标本进行检测,对胶体金方法的诊断试验的评价指标作出计算。结果:两种方法的检测结果之间有极好的一致性(φ=0.943,Kappa=0.941),胶体金法诊断霍乱与金标准方法的差异无统计学意义(P>0.05),胶体金法检测霍乱弧菌诊断试验的灵敏度为93.18%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为95.38%,假阴性率为6.82%,假阳性率为0。结论:胶体金法在基层霍乱检测工作中具有一定的应用价值,该方法的特异性高,一致性也较高,但其灵敏度仍有待提高。

摘要：目的建立间接ELISA,检测血清中抗A型肉毒神经毒素(botulinum neurotoxin type A, BoNT-A)中和抗体。方法以纯化的BoNT-A作为包被抗原,抗BoNT-A兔血清作为一抗,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记的金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococal Protein A, SPA)作为二抗,结合实验设计,建立检测血清中抗BoNT-A中和抗体的间接ELISA,验证该方法的特异性、灵敏度和重复性,并与经典动物中和试验法检测抗BoNT-A中和抗体的结果进行比较。结果①间接ELISA条件的建立与优化,使用2.50μg/mL纯化的BoNT-A抗原包被,4℃过夜;1%明胶作为封闭剂,37℃封闭2 h;确定一抗优化条件:反应条件为1∶5 000稀释,37℃孵育90 min;二抗优化条件:反应条件为1∶10 000稀释,37℃孵育90 min;加入底物37℃显色10 min,加终止液终止后,用酶标仪测定A450 nm值;②经过验证该方法特异性好,所包被抗原与抗伤寒杆菌兔血清、抗破伤风毒素兔血清、抗B型肉毒毒素兔血清、抗E型肉毒毒素兔血清、抗F型肉毒毒素兔血清均无交叉反应;灵敏度高,当抗BoNT-A兔血清按照1∶320 000稀释时,检测结果依然呈阳性;重复性良好,批内重复性验证CV分别为2.62%、1.40%、2.14%,变异系数均小于3%,批间差异无统计学意义(P=0.103,P>0.05);该方法检测抗BoNT-A中和抗体检出限为抗-0.03 LD50/mL,大约是经典动物中和试验法的1/30,显著地提高了检测灵敏度。结论建立了一种可用于检测血清中抗BoNT-A中和抗体的间接ELISA。

摘要：在“九五”“蛋鸡系统”研究基础上,进一步集成和扩充,实现鸡场龙头企业信息系统以及系统后台数据库的升迁,介绍实现系统平稳升级的编程和数据库设计技巧,构建一个适用于我国国情的企业生产经营管理辅助决策系统。系统采用Client/Server与Browser/Server相结合的方式运行,以不同的接入方式输入和获取企业生产经营管理决策信息,系统的实现将为集约高效养殖企业提供更全面、准确与及时的生产及经营信息,提高生产、管理、决策和经营水平。

摘要：本研究旨在比较牛溶血性曼氏杆菌（***）和牛多杀性巴氏杆菌（***）A型、B型生理生化特性和PCR鉴定方法,为临床上述三种细菌的分离鉴定提供指导。培养牛溶血性曼氏杆菌、牛多杀性巴氏杆菌A型、B型菌,分别开展革兰氏染色镜检、生化鉴定、生长曲线测定、致病性检测和PCR鉴定。*** A型、B型血平板培养基上***不溶血、***溶血,在麦康凯培养基上***不生长、***生长良好;三株细菌在生化特性方面基本相同,但***能形成靛基质、不发酵肝糖和肌醇,***不能形成靛基质、可分解肝糖和肌醇。三株细菌生长趋势大致相同,均于2～4h进入稳定期,18～20h开始衰退。小鼠感染低至5个*** A型、B型菌可致死,***原液仍不能致死小鼠。所设计各菌株PCR引物能快速鉴定*** A型、B型和***。*** A型、B型和***在部分培养特性、生理生化特征、致病力及PCR鉴定方面存在显著差异。

摘要：针对我国畜禽生产龙头企业的总体水平现状以及对禽蛋需求的增加,构思和完善畜禽养殖业龙头企业生产经营管理辅助决策支持系统,以蛋鸡为实例,设计基于数据库、网络技术的蛋鸡生产龙头企业生产经营管理系统,探索建设养鸡场生产网络信息系统的技术和方法,已建成一个可在单机、局域网以及Internet/Intranet等不同模式运行的生产经营管理系统。以提高我国规模化蛋鸡企业生产管理水平为目标,为科学饲养提供早期预测和辅助决策支持,为管理人员提供蛋鸡生产动态管理及科学决策提供依据。

摘要：目的探讨复治肺结核患者耐药情况及相关危险因素,为制定肺结核防治策略提供相关参考依据。方法统一设计的调查问卷,选择全国22家医疗机构2009-2012年确诊的复治肺结核患者377例,按是否耐药分为耐药组和敏感组,比较两组在基本情况,首次治疗情况及既往史方面的差异,分析复治肺结核患者耐药的相关危险因素。结果复治肺结核患者中共148例耐药患者,耐药率为39.26%(148/377),经单因素分析结果表明结核病接触史(χ~2=6.375,P=0.012);治疗前症状及体征评分(χ~2=11.899,P=0.005);既往治疗次数(χ~2=10.209,P=0.001);既往用药个数(χ~2=3.986,P=0.046)及既往用药不良反应(χ~2=4.468,P=0.035)差异有统计学意义。多因素非条件logistic回归分析表明治疗前症状及体征评分≥6分和既往治疗>2次是耐药发生的独立危险因素,OR (95%CI)分别为1.894 (1.228~2.922)和2.166(1.074~4.370)。结论复治肺结核患者耐药率较高,服药不规律及既往治疗次数增多增加了复治肺结核患者耐药风险。