摘要：目的:提高外源蛋白可溶性肿瘤坏死因子相关促凋亡配体(sTRAIL)在巴斯德毕赤酵母中的分泌表达。方法:根据GenBank公共数据库中公布的模式生物酿酒酵母的分子伴侣(Ssa1p、YDJ1、Kar2p和PDI)基因序列设计引物,利用PCR方法从酿酒酵母基因组中得到各基因片段,并将单独Ssa1p或Kar2p、组合YDJ1+PDI、Kar2p+PDI或YDJ1+PDI+PDI分别构建到pPIB2Z表达载体中,并整合到外源蛋白sTRAIL工程菌(毕赤酵母GS115)中进行筛选和诱导表达。结果:SDS-PAGE分析表明,sTRAIL的表达量明显提高,特别是整合了分子伴侣组合YDJ1+PDI的工程菌。Western印迹分析整合的分子伴侣基因后,分子伴侣蛋白在工程菌中的表达量得到了提高。结论:提高细胞内分子伴侣的表达,可以增加外源蛋白的分泌表达,为进一步研究巴斯德毕赤酵母奠定了基础。

摘要：目的利用shRNA干扰沉默人乳腺癌细胞MCF-7的解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinases 17,ADAM17)基因,观察其对细胞增殖的影响。方法针对ADAM17基因设计合成具有特异性的ADAM17-shRNA,经脂质体Lipofectamine TM 2000转染MCF-7细胞。实验设对照组(空白PBS)、干扰组(转染干扰无义序列ADAM17-sh NC)、实验组(转染ADAM17-shRNA),采用Realtime PCR检测各组细胞ADAM17 mRNA的表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果实验组ADAM17 mRNA的相对表达量显著低于对照组和干扰组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组的MCF-7细胞增殖活性较其他两组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);实验组的MCF-7细胞进入S期(23.60±1.09)%和G_2/M期(6.30±0.82)%的比例降低,绝大多数细胞停留在G_0/G_1期(65.17±1.35)%,细胞周期延缓,与对照组、干扰组相比较差异具有显著性意义(P<0.05)。结论 ADAM17-shRNA对人乳腺癌细胞MCF-7的ADAM17基因具有沉默作用,从而抑制MCF-7细胞的增殖活性,延缓细胞周期进展。

摘要：目的:评价国产数字化动态导航和数字化静态导板在口腔种植手术中的精准度及手术时长。方法:选择2018年9月-2019年12月于青岛大学附属医院口腔种植科行种植手术的40例牙列缺损患者,随机分为2组,第1组应用数字化动态导航辅助种植手术(n=21),第2组应用数字化静态导板辅助种植手术(n=19)。记录2组单牙缺失的手术时长,并分别测量2组在顶部、根尖和角度上的线性偏差。采用SPSS 25.0软件包对数据进行统计学分析。结果:第1组平均手术时长23.2 min,第2组14.5 min;第1组术前设计与实际位点平均测量偏差分别为顶部(0.74±0.3)mm,根尖部(0.78±0.31)mm,角度(2.45±1.26)°;第2组平均测量偏差分别为顶部(0.79±0.39)mm,根尖部(0.78±0.35)mm,角度(2.44±1.07)°,2组在顶部、根尖部、角度的测量偏差无统计学差异(P>0.05)。结论:国产数字化动态导航与数字化静态导板辅助口腔种植手术的精准度无显著差异。在单牙缺失病例中,静态导板较动态导航可缩短手术时长。动态导航较静态导板的手术适应证更广,临床上需要根据具体病例加以选择。

摘要：以抗凝血活性作为评价指标,优选出抗凝活性最佳的水蛭品种和最佳的酶解工艺。采用了单因素试验法确定三种基原水蛭的酶解工艺,筛选出具有最佳抗凝血活性的品种,对活性最强的日本医蛭进行响应面优化设计,确定蛋白酶用量、酶解温度、酶解pH值三个影响因素的最优水平。结果三种水蛭抗凝血活性由高到低顺序为:水蛭>柳叶蚂蟥>蚂蟥;酶解因素影响的顺序为:酶用量>酶解温度>酶解pH值;优选的最佳酶解工艺为:最佳蛋白酶是胰蛋白酶,蛋白酶最佳用量为7657.28 u/g,最适宜温度为53.20℃,最佳酶解pH值为8.30,以此最优条件对日本医蛭进行酶解,得到的产物抗凝血活性达到558u/g。模型可靠性较高,通过对比试验优选了抗凝血活性最强的水蛭品种和最佳的酶解工艺,可以提高水蛭的抗凝血活性。

摘要：目的:构建针对人CC亚族趋化因子配体20(CC chemokine ligand20,CCL20)基因外显子2的置换型打靶载体。方法:设计和合成引物,利用长距离聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)从永生化人角质形成细胞系(HaCaT)基因组DNA中克隆出CCL20基因组DNA片段,再以CCL20基因为模板扩增出长度为1969bp的同源短臂和2356bp的同源长臂,分别插入ploxP载体的Neo基因上游和下游,构建针对人CCL20基因外显子2的置换型打靶载体(ploxP-hCCL20)。将打靶载体线性化并以电穿孔方法转移入HaCaT,观察克隆的形成。结果:经过PCR、限制性内切酶鉴定及DNA序列测定,证实该载体的两条同源臂包含人CCL20基因的外显子1、3、4及其邻近的部分内含子。结论:ploxP-hCCL20载体构建成功,增加Neo基因下游同源臂长度的策略有可能提高细胞基因敲除的同源重组率。

摘要：为了探讨油茶(Camellia oleifera)化肥减量增效技术,本试验以嫁接4年的油茶高接换冠林分为对象,设计4个处理(处理A:有机肥2.50 kg+化肥0.50 kg,处理B:有机肥3.50 kg+化肥0.25 kg,处理C:有机肥5.00 kg+化肥0.10kg,处理D:化肥1.00 kg),研究有机肥和化肥配施在生长结实、产量及经济性状、效益面的施肥效应,并采用隶属函数法进行综合评价。试验结果表明:冠幅面积、叶片数、花朵数、春梢数在各处理间差异不显著;单株的平均成果数、产果量和产油量3个指标,均以处理A最高,分别达到150.78个、3.72 kg和0.24 kg,比处理D分别提高65.69%、47.04%和50%;不同配比施肥对果实经济性状影响较大,从果油率来看,4个处理两两之间的差异均达到显著水平,依次为处理C>处理D>处理A>处理B。投入产出比为处理A>处理B>处理D>处理C;施肥效应综合评价为处理B>处理A>处理D>处理C。

摘要：[目的]对江苏省吴中地区养殖池塘患病的中华绒螯蟹进行诊断。[方法]结合临床流行病学调查和分子生物学鉴定,对江苏省吴中地区发病的中华绒螯蟹进行实验室检测与鉴定。参考Gen Bank中白斑症病毒(WSSV)的基因序列设计1对特异性引物,以从中华绒螯蟹的鳃、肝胰腺、肌肉等组织提取的DNA为模板,进行PCR扩增。[结果]经过解剖观察,发现病蟹内脏器官无明显变化。从病蟹的肝胰腺和肌肉中未分离到致病菌。通过PCR扩增,均能扩增出预期大小的特异性产物,测序比对显示扩增条带的基因序列与WSSV的基因序列同源性高达99.6%。病理切片显示鳃和肝胰腺可见大量细胞核肿大细胞,与WSSV引起对虾组织的病变相一致。[结论]经初步诊断,确定引起中华绒螯蟹发病死亡的病原为WSSV。

摘要：文章简述了稀土轨研发生产历程,对不同时期稀土轨研究做了简要总结。重点针对TB/T 2344.1—2020标准中U76CrREH钢轨技术规定及工业生产进行了介绍。U76CrREH是包钢自主设计和研发生产、我国铁路最高强度等级的钢轨。主要利用稀土净化钢水和细化显微组织,实现提高钢轨服役疲劳寿命的作用。工业生产从成分进行窄范围要求,采取低H、低O等控制技术,保证了钢轨内部冶金质量;通过采用轧制、在线热处理冷却技术,U76CrREH钢轨抗拉强度不低于1280 MPa,踏面硬度(HB)不小于370,微观组织为珠光体,表面质量达到标准技术要求。钢轨在某局管内小半径曲线进行应用,服役三个多月,累计通过总重达到30 Mt,钢轨表面状态、磨耗等正常,侧磨为0~0.13 mm。

摘要：为南阳烟区烤烟生产合理施肥提供参考,以云烟99、NC71和渠首1号3个烤烟新品种为材料,采用2因素随机区组试验设计,研究不同氮肥施用量对其农艺性状、氮代谢、常规化学成分、中性致香物质含量、感官质量和经济性状等的影响。结果表明:N肥施用量为30~60kg/hm2时,株高、叶片数、茎围、节距、腰叶的长宽和产量等农艺性状及烟叶氮代谢生理指标,3个烤烟品种均随施氮量增加呈不断升高趋势;产值、均价、上等烟比例和中性致香物质含量,云烟99随施氮量增加呈逐渐降低趋势,渠首1号则呈先升高后降低趋势,NC71呈逐渐升高趋势。在南阳烟区生态条件下,云烟99的耐肥性较差,其N肥施用量以30kg/hm2左右为宜;渠首1号和NC71的适宜N肥施用量分别为45kg/hm2左右和60kg/hm2左右。

摘要：目的了解除虫菊素、茶多酚和茶皂素3种植物源农药复配剂对台湾乳白蚁的毒力效果和最优复配比。方法以除虫菊素、茶多酚、茶皂素浓度为正交实验设计因子,以白蚁死亡率为目标因子,建立正交实验表。结果含除虫菊素100 mg/L及以上浓度处理组,1 h内白蚁均全部死亡;除虫菊素对白蚁死亡率具有显著影响,茶多酚、茶皂素对白蚁死亡率无显著影响;3种试剂对白蚁死亡率影响的强弱顺序为:(1~4 h)除虫菊素>茶皂素>茶多酚,(8~24 h)除虫菊素>茶多酚>茶皂素。结论除虫菊素、茶多酚和茶皂素复配剂对白蚁具有良好的毒杀作用,复配比例为8∶1∶8,且除虫菊素含量须为100 mg/L及以上。