摘要：目的构建阿替利珠单抗修饰二氢丹参酮Ⅰ纳米粒(ATEZO DHT NP),优化其制备工艺,并进行体内外药效评价。方法采用乳化溶剂扩散法制备载二氢丹参酮Ⅰ聚合物纳米粒(DHT NP),以包封率为评价指标,单因素实验联合正交设计优化制备工艺;阿替利珠单抗巯基化后与DHT NP表面马来酰亚胺基反应,制备ATEZO DHT NP,BCA法测定单抗的偶联率和载药量;粒度仪考察纳米粒粒径和电位,透射电镜观察纳米粒形貌,并考察稳定性和体外释药情况;在胃癌细胞模型上,激光共聚焦显微镜评价细胞摄取情况,MTT法考察细胞毒性,流式细胞术考察细胞凋亡情况;在胃癌裸鼠模型上,通过肿瘤体积变化、HE和TUNEL染色法评价药物抗肿瘤药效,生理生化检测和正常组织HE染色评价药物安全性。结果ATEZO DHT NP的最佳制备工艺为:有机相浓度为1.5%,水相为2%胆酸钠溶液,有机相与水相体积比为1∶1.8,药物与载体质量比为1∶2;DHT NP的二氢丹参酮Ⅰ载药量和包封率分别为11.73%和54.49%;ATEZO DHT NP的阿替利珠单抗偶联率和载药量分别为56.93%和14.43%,粒径246.9 nm,Zeta电位-19.57 mV,形态近似球形,具有良好的稳定性和缓释特性。在胃癌细胞模型上,ATEZO DHT NP有效提高原药细胞增殖抑制能力和诱导细胞凋亡能力;在胃癌裸鼠模型上,ATEZO DHT NP诱导肿瘤细胞凋亡,显著抑制肿瘤生长,给药期间裸鼠体重无明显下降,血浆生化指标均在正常范围,主要器官形态学无变化,没有明显的毒副作用。结论本研究成功构建了ATEZO DHT NP,能有效增强二氢丹参酮Ⅰ的体内外抗肿瘤作用且安全性良好。

摘要：目的:建立反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)检测甲型H1N1流感病毒HA基因的方法,并用于检测临床样本。方法:通过在线软件Primer Explorer V4设计H1N1 HA基因的RT-LAMP引物,建立RT-LAMP检测方法,并评价其灵敏度和特异度。结果:与传统RT-PCR方法相比,RT-LAMP检测方法具备更高的灵敏度,达到10个拷贝,并且具有良好的特异性;在76份呼吸道感染儿童的咽拭子标本中检测到2份阳性,与RT-PCR方法检测结果相同。结论:建立的H1N1 RT-LAMP检测方法灵敏特异,简单快速,具备H1N1现场检测应用前景。

摘要：本文以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行毒株FJzz1/2011株的S1蛋白的切割位点设计合成特异性引物,通过RT-PCR扩增获得S1基因,将其克隆至转移载体p Fast Bac HTA中,获得了重组质粒p Fast Bac HTA-S1,将该重组质粒转化*** DH10Bac感受态细胞,得到重组穿梭质粒r Bacmid-S1,再将重组穿梭质粒r Bacmid-S1转染Sf9细胞,48 h后即可观察到明显的细胞病变。将收获的r Bac-S1-P1代病毒在Sf9细胞上连续传3代后,收获细胞培养物,分别用间接免疫荧光鉴定(indirect immunofluorescence assay,IFA)、SDS-PAGE电泳和Western blot分析。结果显示,P3代重组病毒r Bac-S1感染的细胞均呈现亮绿色荧光,证实表达产物可以被PEDV阳性血清和抗S1蛋白的单抗特异性识别;SDS-PAGE电泳结果显示在大约120 k Da左右可观察到特异性条带;Western blot结果证实该蛋白可以被抗S1蛋白的特异性单抗识别。综上研究结果,证明利用杆状病毒表达系统在Sf9细胞中成功表达了PEDV的S1蛋白,为进一步研究PEDV S蛋白的抗原性奠定了基础。

摘要：以65份来自种质资源库的水稻品种为材料,根据品种的产量性状进行统计分析、多样性指数分析以及相关性分析。结果表明,供试材料在产量性状上存在丰富的遗传多样性,多样性指数介于1.607~2.000之间,单株产量与单株有效穗数、每穗实粒数及穗着粒数存在极显著的正相关,相关系数分别为0.346、0.586和0.508;聚类分析结果表明,65个水稻材料可聚为22个类群,说明供试材料的遗传距离较远,种质资源分化程度较高;通过主成分分析,获得3个主成分,累积贡献率达到85.212%,并通过对应的特征向量获得3个主成分因子,分别为粒数因子、结实率因子及有效穗数因子,可以作为种质资源综合评价指标。通过每个品种的各主成分排名及综合排名对各品种进行综合评价,排前5名的水稻材料分别为奥野占6号、R995、油粘8号、丝苗12和R998。在水稻育种中应注意利用具有丰富遗传多样性的种质资源,并在亲本选配时选择遗传距离较远且综合性状表现差异较大的种质材料。

摘要：为了给全联合变电构架风荷载设计提供依据,以华中地区某500kV变电站联合构架为工程背景,运用Solidworks三维建模软件,建立了500kV变电站全联合构架的实体模型。采用有限元分析软件ANSYS Workbench对全联合构架划分网格进行模态分析,得到了全联合构架前20阶模态频率以及模态振型图。通过分析找到了500kV全联合构架前20阶模态频率分布特点以及模态振型规律,发现该联合构架为风荷载的敏感结构,水平方向的脉动风速容易激起构架的低阶振型。

摘要：通过对采集到的青岛市某发病羊场羊口疮病料(强毒)在山羊成纤维细胞上连续传90代(弱毒)后,分别进行病毒基因组提取,并对提取到的基因组分别命名为ORFV-QD和ORFV-RD。根据GenBank上发表的ORFV全基因组序列设计并合成3对特异性引物,分别扩增ORFV-QD和ORFV-RD的B2L基因、F1L基因和VIR基因片段,并将扩增得到的基因组片段分别克隆到pMD-19T载体上,转化到DH5α感受态细胞中,对重组质粒进行鉴定后送至测序公司进行测序,用DNASTAR软件对测序结果进行拼接及3组基因之间核苷酸同源性比较分析,将测序结果与NCBI上已公布的13组ORFV全基因组相应基因核苷酸序列进行同源性比对分析、构建系统进化树及氨基酸序列比对分析。结果表明,3组基因与参考序列的B2L基因、F1L基因和VIR基因核苷酸同源性分别为92.1%~98.4%、96.1%~99.1%和94.6%~100%。将2株病毒基因组与参考序列进行氨基酸序列比较分析,结果显示2株病毒基因组之间并没有较为明显的差异。

摘要：在黄淮海北部地区,以先玉335为试材,采用双因子裂区试验设计,其中,种植密度设60000和75 000株/hm2计2个水平,行距配置设等行距50、60、70和80 cm以及宽窄行(80+40)cm计5种模式,研究了不同种植密度与行距配置对夏播玉米产量相关性状的影响。结果表明:不同种植密度的产量差异不显著,不同行距配置的产量差异达到了极显著水平。在60000株/hm2密度条件下,80+40 cm宽窄行种植产量(11068 kg/hm2)最高,显著高于其他行距种植,其中较第2位产量高8.58%;在75 000株/hm2密度下,60 cm等行距和(80+40)cm宽窄行种植产量较高,二者产量差异不显著。在试验的种植密度与行距配置条件下,60 000株/hm2密度、(80+40)cm宽窄行配置先玉335产量最高。

摘要：目的评价重组人甲状旁腺素(1-34)治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效和安全性。方法入选绝经后骨质疏松症患者50例,采用随机、开放、对照试验设计分为2组,试验组37例,每日皮下注射重组人甲状旁腺素(1-34)20μg,对照组13例,每周肌肉注射依降钙素(益盖宁)20U,所有患者均口服钙尔奇D600 0.6g/d,试验时间为6个月,观察患者治疗前后的骨密度变化、骨折发生情况,以及血尿常规、肝肾功、电解质、心电图改变等。结果试验组和对照组基线情况中,年龄、L1-L4骨密度、腰椎平均骨密度和大粗隆骨密度之间差异无统计学意义(P>0.05),试验组股骨颈骨密度显著高于对照组(P0.05);试验组自身前后对比,L1、L2、L3、L4及腰椎平均骨密度增加显著(P0.05),Ward s区骨密度有所降低,亦无统计学意义(P>0.05);对照组自身前后对比,L3及腰椎平均骨密度增加显著(P0.05);大粗隆骨密度有所降低,亦无统计学意义(P>0.05)。试验组新发骨折2例,1例右肱骨骨折,另1例腰椎压缩骨折,对照组新发1例右腓骨头线性骨折;安全性观察:两组不良事件发生率相似。结论重组人甲状旁腺素(1-34)治疗绝经后骨质疏松症有效,对L2骨密度的改善优于益盖宁对,对Ward s区骨密度作用次于益盖宁,对腰椎及股骨其他部位与益盖宁作用相似,安全,不良反应较轻,适用于骨量严重低下和有骨质疏松性骨折的患者。

摘要：目的:探索青蒿琥酯用于艾滋病免疫功能重建不全的适宜人群、有效剂量和最佳疗程。方法:多中心、前瞻性队列研究设计,纳入符合研究标准的艾滋病抗反转录病毒疗法(ART)后免疫功能重建不全患者,在ART常规抗病毒治疗基础上加用青蒿琥酯片,疗程48周。其中,青蒿A组:50 mg/次,1次/d;青蒿B组:50 mg/次,2次/d;ART组:单纯ART;于基线及治疗24、48周评价3组T淋巴细胞亚群计数或比例情况。结果:3组比较:24周青蒿B组CD4^(+)计数显著高于其他两组(P200 cells/μL亚组:24、48周青蒿B组CD4^(+)计数显著高于其他两组(P200 cells/μL和年龄≥40岁患者,高剂量、中短程(24周)应用青蒿琥酯可促进免疫重建。为避免T淋巴细胞激活,不建议低剂量下任何疗程以及长疗程下任何剂量使用。

摘要：采用分三个正交区组的四因素二次正交旋转组合设计方法,在乌兰察布地区选取氮、磷、钾和有机肥为决策变量,以马铃薯鲜薯产量为目标函数,通过在较为贫瘠无前茬作物的试验地进行田间试验获得的数据,建立了马铃薯产量与参试因子间的数学模型。得出了各因素与产量的主次关系和双因素搭配的产量效应。最后,通过计算机模拟寻优获得了在本试验地条件下900kg/667m^2以上施肥方案.